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  • 简介:TherearetwopossibleoutcomeswhenDNAdamageoccursinnormalmammaliancells:eitherinductionofcell-cyclecheckpointwhichinhibitstheprogressofthecellcyclesaswellasactivatesDNArepairpathways,oractivationofapoptosistoeliminatedamagedcells.Thep53tumour-suppressorgeneplaysakeyroleinselectingthesepathways.Inourpresentworks,thehumangastriccancercelllineAGSwastreatedwithtripchlorolide,apotentantitumorcompoundpurifiedfromaChineseherbTripterygiumWilfordiiHook.Singlecellgelelectrophoresis(Cometassay)showedthatthetreatmentoftripchlorolideresultedinDNAdamageinAGScells.ThedamagedAGScellswentthroughapoptosis,whichwastime-anddose-dependent.

  • 标签: 胃癌细胞 P53 激活 雷公藤提取物 诱导 细胞凋亡
  • 简介:从胖身体和棉花一种蛾的幼虫的中间的勇气的细胞色素P450(Cyt-P450)蛋白质,Helicoverpa有佩带徽章权利的人一,被一套纯化过程部分分别地包括微分离心分离,小伙子的增溶,由木钉降水的蛋白质降水和DE-32柱层析净化。Cyt-P450被COdifference光谱和SDS页的方法检测。从胖身体ofH的净化的solubilized微体的部分。有佩带徽章权利的人一多于17褶层被净化。三个蛋白质乐队被SDS页与分子的群众检测70600,63300和571200Da。有63300和571200Da的分子的质量的蛋白质是Cyt-P450的isozymes,是可能的。

  • 标签: 细胞色素P450 净化方法 棉铃虫 HELICOVERPA ARMIGERA 昆虫学
  • 简介:Recentstudiesindicatethatcell-cyclecheckpointsaretightlycorrelatedwiththeregulationofapoptosis,inwhichp53playsanimportantrole.OurpresentworksshowthattheexpressionofE6/E7oncogenesofhumanpapillomavirusinHeLacellsisinhibitedinthepresenceofanti-tumorreagenttripchlorolide(TC),whichresultsintheup-regulationofp53inHeLacells.Interestingly,underthesameTC-treatment,thecellsattheearlyS-phasearemoresusceptibletoapoptosisthanthoseatthemiddleS-phasealthoughp53proteinisstabilizedtothesamelevelinbothsituations.Significantdifferenceisexhibitedbetweenthetwospecifiedexpressionprofiles.Furtheranalysisdemonstratesthatanti-apoptoticgenesurvivinisup-regulatedbyp53intheTC-treatedmiddle-Scells,whereasitisdown-regulatedbyp53intheTC-treatedearly-Scells.Takentogether,thepresentstudyindicatesthatthedifferentialp53-regulatedexpressionofsurvivinatdifferentstagesofthecellcycleresultsindifferentcellularoutputsunderthesameapoptosis-inducer.

  • 标签: 细胞循环 P53基因 细胞凋亡 TC SURVIVIN 基因表达
  • 简介:1993年9月,第一届黏菌分类生态国际会议(ICSEM)在英国西北部的美丽海滨旅游城市切斯特(Chester)拉开了帷幕,黏菌学者从此拥有了一个属于自己的论坛和交流的同地,世界黏菌研究也进人了飞速发展的时期。根据会议上各国学者的共同愿望,达成了每隔3年召开1次类似会议的共识,一直延续至今,现已成功召开了七届黏菌大会。

  • 标签: 国际会议 生态学 分类学 黏菌 海滨旅游城市 西北部
  • 简介:在大肠杆菌中,利用新构建的含T7g-10LRBS以及λ-PR启动子的新型原核表达载体,通过表达gag-pol基因片段,获得了具有天然序列的人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)核心蛋白p24的高效表达。克隆的gag-pol基因片段在其阅读框架移位区域插入了4bp碱基,其表达的病毒蛋白酶在阅读框架上与gag一致,从而实现了对gag-pol融合蛋白的有效加工,产生成熟的核心蛋白p24及其它产物。重组p24以可溶形式存在,可以被抗p24的单克隆抗体特异识别。测定的N端8个氨基酸序列与从病毒纯化的p24完全一致。在使用硫酸铵沉淀后,采用两步离子柱层析,可将重组蛋白纯化到95%以上的纯度。结果表明,纯化的p24可以作为特异性很强的试剂而用于HIV感染的诊断病情的预后,并可用于p24的生化结构分析。

  • 标签: HIV-1 核心蛋白 表达 纯化 鉴定
  • 简介:本文作者已有的研究结果证明,完整的人干细胞生长因子(hSCGF)没有种属特异性,即可以作用于小鼠骨髓造血细胞.这一点与在Ca2+依赖糖识别结构域(CRD)缺失了78个氨基酸残基的截短分子(hSCGFβ)有所不同.本研究从hSCGF全长cDNA中完全删除了CRD结构域编码序列,进一步探讨CRD结构域的生物功能.由于该突变体序列GC含量较高,因此将该缺失突变体序列克隆在GST融合表达载体中进行融合表达.通过低温(28℃)诱导,表达产物主要以可溶蛋白的形式存在.利用亲和层析纯化CRD结构域完全缺失的hSCGF突变体融合蛋白,通过检测重组突变分子的协同刺激造血活性有无改变来初步探讨CRD结构域在hSCGF分子中的生物功能.研究结果表明,去掉完整CRD结构域的突变分子仍然具有造血刺激活性.据此推断CRD结构域在hSCGF分子中可能对于受体配体结合起辅助作用.

  • 标签: 细胞生长因子 缺失突变体 Ca^2+ 结构域 糖识别 生物学活性
  • 简介:目的:检测Y2HGold酵母株中表达的hPROKR2C端蛋白是否有毒性自激活,为后期利用酵母双杂交技术研究hPROKR2C端相互作用蛋白奠定基础。方法:构建酵母双杂交载体pGBKT7-hPROKR2-Ct质粒,将其转入酵母感受态中验证其是否表达并计算转化率;通过观察SD/-Trp平板上酵母菌落生长状态进行hPROKR2C端蛋白的毒性检测;通过观察SD/-Trp、SDO/-Trp/X、SDO/-Trp/X/Aba平板上酵母菌落生长状态进行hPROKR2C端蛋白自活性检测。结果:构建了酵母双杂交载体pGBKT7-hPROKR2-Ct,将其转入酵母感受态中,转化率为8.5×104cfu/μg;毒性自活性检测均显示hPROKR2C端蛋白对酵母菌株无毒性、不具有自活性。结论:可以利用酵母双杂交系统研究hPROKR2C端相互作用蛋白。

  • 标签: 酵母双杂交 PROKR2 自激活实验
  • 简介:CREB有约束力的蛋白质(CBP)和它的相当或相同事物p300是涉及细胞的活动的一个宽数组的各种各样的顺序特定的抄写因素的transcriptionalco使活跃之物,例如脱氧核糖核酸修理,房间生长,区别和apoptosis。Severalstudies建议了CBP和p300可能被看作瘤压制ors,与他们是的突出的角色响应各种各样的刺激的不同基因表示模式的跨coupling。他们主要经由乙酰化施加行动嘘和另外的规章的蛋白质(例如p53)。在CBP/p300功能的主要悖论是他们似乎能够贡献各种各样的反对细胞的进程。呼吸上皮tumorigenesis代表一个范围的多步累积的一个复杂过程基因并且epigenetic错误。通过激活和压抑的建筑群的交替的形成的Transcriptionmodulation是这些精神错乱的最终的收敛点,并且CBP/p300在这相互影响代表关键参加者。因此,他们的分子的行动和相互作用的照明能在呼吸上皮carcinogenesis为药理学干预揭示新潜在的目标。

  • 标签: 呼吸上皮 肿瘤发生 CREB结合蛋白 P300 作用
  • 简介:目的:探讨血流变和血清指标在骨折延迟愈合患者中的变化及其临床意义.方法:随机选取2010年1月~2016年6月在我院进行手术治疗的骨折延迟愈合骨折正常愈合患者各90例,分别为观察组与对照组,对比分析两组患者术后第1、8、12周时血清可溶性血管细胞黏附分子1(sVCAM-1)、胰岛素样生长因子l(IGF-1)、血小板衍生生长因子(PDGF)及人可溶性细胞间黏附分子1(sICAM-1)和红细胞刚性指数、红细胞聚集指数、血浆黏度的差异.结果:术后第1、8、12周两组血清血流变各指标整体相比差异均具有统计意义(均P<0.05),且组内两两比较均具有统计差异(均P<0.05).术后8、12周观察组血清slCAM-1、sVCAM-1、红细胞刚性指数、红细胞聚集指数、血浆黏度均高于对照组,而血清PDGF、IGF-1均低于对照组,比较差异均具有统计意义(均P<0.05).结论:骨折患者血清sICAM-1、PDGF、IGF-1、sVCAM-1红细胞刚性指数、红细胞聚集指数、血浆黏度水平会随着病程进展发生变化,并且血清sICAM-1、sVCAM-1红细胞刚性指数、红细胞聚集指数、血浆黏度水平的升高,血清PDGF、IGF-1水平的降低可能是引起骨折延迟愈合的重要因素,对于骨折患者的临床治疗具有重要临床意义.

  • 标签: 骨折 延迟愈合 血清学 血液流变学
  • 简介:对采自辽宁省仙人洞国家级自然保护区野生大孢虫花(IsariajaponicaYasuda)的生物特性和驯化栽培进行探究.试验结果表明:PDA培养基上适宜碳、氮源分别是蔗糖和谷氨酸,适宜pH为6;在3种供试培养料中只能在配方一(2%葡萄糖,0.1%硫酸镁,0.2%磷酸二氢钾,1.4%琼脂,96%蒸馏水,pH自然,0.3%蛋白胨)中形成子实体.

  • 标签: 大孢虫花 生物学特性 驯化栽培
  • 简介:目的:探究涎腺腺样囊性癌(SACC)组织中COX-2、Survivinlivin的表达临床意义.方法:收集2013年1月~2016年11月我院肿瘤外科收治的63例SACC患者癌变病理组织标本与30例SACC患者癌旁正常组织标本为研究对象;应用免疫组化法(SP法)检测COX-2、Survivinlivin蛋白在SACC组织和正常组织中的表达情况,分析SACC组织COX-2、Survivinlivin的表达与临床病理特征的关系,采用Spearman秩相关分析COX-2、Survivinlivin之间的关系.结果:Survivin、livinCOX-2在SACC组织中的阳性率依次为66.67%(42/63)、57.14%(36/63)73.02%(46/63),其阳性主要表达于肿瘤细胞胞浆或胞膜上,而正常组织细胞中未发现阳性表达;Survivin、livinCOX-2在不同性别、年龄、肿瘤部位的阳性率无统计差异(P>0.05);实体型、淋巴转移、中低分化Ⅲ+Ⅳ期患者Survivin、livinCOX-2的阳性率高于筛孔型+管状型、淋巴未转移、高分化、Ⅰ+Ⅱ期患者,差异均有统计意义(P<0.05);Spearman秩相关显示,Survivin与COX-2呈正相关(r=0.632,P<0.05);livin与COX-2呈正相关(r=0.453,P<0.05);Survivin与livin无相关(r=0.143,P>0.05).结论:Survivin、livinCOX-2在SACC患者中呈高表达,可能对SACC的发生、发展具有促进作用;Survivin、livinCOX-2可作为临床早期筛查SACC并预测疾病转归的指标.

  • 标签: 涎腺腺样囊性癌 COX-2 SURVIVIN LIVIN 相关性
  • 简介:蒙古沙冬青(Ammopiptanthusmongolicus)是中国西北荒漠区唯一的常绿阔叶灌木,具有很强的抗寒抗旱特性。利用PCR方法从该植物克隆到转录因子AmDREB2C的cDNA和基因组DNA的全长编码区,二者均由1191bp组成,无内含子序列,编码由396个氨基酸残基组成的蛋白,其中含1个AP2结构域和1个核定位信号。表达分析显示,AmDREB2C的转录受低温和干旱胁迫的诱导。此外,将该基因编码区cDNA成功构建到植物表达载体pCAMBIA3300-35ST上,为后续研究其功能奠定了基础。

  • 标签: 蒙古沙冬青 DREB 基因克隆 表达分析
  • 简介:目的探讨肺曲霉病急性期患者甘露聚糖结合凝集素(MBL)T细胞亚群的变化.方法收集2013年5月~2015年5月就诊于山东省胸科医院呼吸科的肺曲霉病患者51例,同时选52例健康查体者作为对照组,采用Elisa方法检测血清MBL和半乳甘露聚糖(GM)的水平.同时分离外周血单个核细胞,通过流式细胞仪检测测定CD3+CD4+T淋巴细胞百分比、CD3+CD8+T淋巴细胞百分比及CD3+CD4+/CD3+CD8+T淋巴细胞比值.结果肺曲霉病组、健康对照组血清MBL水平为197.96±148.16和120.25±98.65μg/mL,P〈0.05,差异有统计意义;血清GM水平分别为0.94±0.77μg/L和0.32±0.16μg/L,P〈0.05,差异有统计意义.肺曲霉病组、健康对照组CD3+CD4+T淋巴细胞百分比分别为33.07±7.97、40.32±7.30(P〈0.05),CD3+CD8+淋巴细胞百分比为33.00±8.29、25.98±6.65(P〈0.05),CD3+CD4+/CD3+CD8+T淋巴细胞比值为1.08±0.47、1.68±0.65(P〈0.05).结论肺曲霉病组患者的MBLCD3+CD4+T淋巴细胞、CD3+CD8+T淋巴细胞、CD3+CD4+/CD3+CD8+T淋巴细胞比值会出现显著的变化,可以初步评估患者机体免疫状态,也为肺曲霉病的免疫增强治疗提供了理论依据.

  • 标签: 肺曲霉病 甘露糖结合凝集素 T淋巴细胞 免疫
  • 简介:Changesinthedistributionof1P1-antigeninthedevelopingchickretinahavebeenexaminedbyindriectimmunofluorescencestainingtechniqueusingthenovelmonoclonalantibody(MAb)1P1.Expressionofthe1P1antigenwasfoundtoberegulatedinradialaswellasintangentialdimensionoftheretina,beingpreferentiallyorexclusivelylocatedintheinnerandouterplexiformlayersoftheneuralretinadependingonthestagesofdevelopment,Withtheonsetoftheformationoftheinnerplexiformlayer1P1antigenbecomesexpressedintheretina.Withprogressingdifferentiationoftheinnerplexiformlayer1P1immunofluorescencerevealed2subbandsatE9and6subandsatE18,Atpostnatalstages(afterP3)immunoreactivitywasreducedinaninside-outsidesequenceleadingtothecompleteabsenceofthe1P1antigeninadulthood.1P1antigenexpressionintheouterplexiformlayerwasalsosubjecttodevelopmentalregulation.Thespation-temporalpatternof1P1antigenexpressionwascorrelatedwiththetimecourseofhistologicaldifferentationofchickretina,namelythesynapserichplexiformlayers.Whetherthe1P1antigenwasfunctionallyinvolvedindendriteextensionandsynapseformationwasdiscussed.

  • 标签: 鸡胚 视网膜发育 网织层 IP1抗原 表达 时空分布
  • 简介:AktandBcl-xLbothpromoteresistancetoapoptosis.AcomparisonofAkt-andBcl-xL-dependentcellsurvivalwasundertaken.ExpressionofconstitutivelyactiveAktallowscellstosurviveforprolongedperiodsintheabsenceofgrowthfactors.ThissurvivalcorrelateswiththeexpressionlevelofactivatedAktandiscomparableinmagnitudetotheprotectionprovidedbytheanti-apoptoticgeneBcl-xL.Althoughbothgenespreventcelldeath,Akt-protectedcellscanbedistinguishedfromBcl-xL-protectedcellsonthebasisofincreasedglucosetransporterexpression,glycolyticactivity,mitochondrialpotential,andcellsize.Inaddition,Akt-expressingcellsrequirehighlevelsofextracellularnutrientstosupportcellsurvival.In

  • 标签: 细胞凋亡 非依赖性调控通路 线粒体 AKT BCL-XL