简介：目的构荧光蛋白和canstatin融合蛋白基因的真核表达载体pEGFP-N1／canstatin，以深化研究血管生成抑制剂canstatin的生物学性能和用于肿瘤生物治疗的可能性。方法提取人胚肝总RNA，RT—PCR扩增canstatin基因片断，T—A克隆到pGEM—T中，从pGEM—T／canstatin克隆载体中，将人canstatincDNA亚克隆入真核表达载体pEGFP-N1，构建含人canstatincDNA的重组质粒pEGFP-N1／canstatin，通过酶切鉴定出重组体并测序分析。结果成功构建pEGFP—N1／canstatin真核表达载体，双酶切及测序鉴定显示canstatin基因片断正确插入载体，与Genebank中报道的序列一致。结论pEGFP—N1／canstatin真核载体的构建为进一步进行canstatin蛋白表达和活性研究以及canstatin用于基因治疗奠定了基础。

简介：磁共振成像，多写成MRI，过去也叫过核磁共振，是高科技的检查项目，是一项昂贵的检查。美国癌症协会在新版的《乳腺癌筛查指南》中增加了一项新内容，即对有些发生乳腺癌的高危险妇女，要在筛查时联合乳腺照相作MRI扫描，不是代替乳腺照相。

简介：目的评价椎体入路经皮内镜颈椎间盘髓核摘除术（percutaneousendoscopiccervicaldiscectomy,PECD）的临床可行性及疗效。方法2013年9月至2014年7月,我科收治颈椎间盘突出症患者9例,其中男4例,女5例;年龄24-68岁,平均（44.5±12.4）岁。突出节段：C（3-4）节段1例,C（4-5）节段3例,C（5-6）节段4例,C（6-7）节段1例。行椎体入路PECD,于血管鞘和气管食管鞘之间进行椎体穿刺,置镜鞘于椎体内,镜下磨钻建立骨性通道,经皮内镜直视下去除突出的髓核,减压脊髓或神经根。记录手术时间、术中髓核组织摘除量以及相关并发症。分别于术前及术后1天、1周、1个月、3个月、6个月记录颈部和上肢疼痛的视觉模拟评分（visualanaloguescale,VAS）评估临床疗效。术后随访颈椎正侧位及动力位X线片、颈椎CT以及MRI检查。结果9例均顺利完成手术。手术时间60-135min,平均（81.5±23.4）min,髓核组织摘除量0.3-0.8g,平均（0.5±0.2）g。1例术后发生了四肢的肌力减退,2例出现了钻孔椎体的塌陷。术前VAS评分为（75±10）分,术后1天（32±4）分,术后1周（22±3）分,术后1个月（19±2）分,术后3个月（16±2）分,术后6个月（8±2）分。术后1天时VAS较术前显著降低,术后6个月时VAS评分与手术后1天比较进一步下降,6个月随访时,9例椎体骨隧道愈合。结论椎体入路PECD是可行和安全的。作为PECD一个补充的手术入路,该手术方式值得临床进一步研究应用。

简介：核内不均一核糖核蛋白A2/B1（hnRNPA2/B1）是核不均一核糖核蛋白家族的成员，其在细胞生命活动中起着非常重要的作用，主要参与pre-mRNA的可变剪接和转录调控、端粒维持及细胞增殖、迁移过程，在很多肿瘤中呈高表达的状态。本文就hnRNPA2/B1在肿瘤中的作用与机制及其所涉及的其他功能作一综述。

简介：目的通过观察增殖细胞核抗原Ki-67在子宫内膜腺上皮的表达，探讨其在子宫内膜生理及病理学变化及意义。方法用免疫组化EnVision二步法对99例子宫内膜诊刮样本组织标记。结果14例呈分泌反应、15例萎缩、24例增生、8例不典型增生、38例子宫内膜原发癌（I型25例，II型13例）腺上皮ki-67表达率分别为0％、33．3％、83．3％，75．0％、57．9％（I型44．0％，II型84．6％）。结论ki-67与子宫内膜增殖有关，分泌反应缺失表达；Ki-67的表达与子宫内膜癌的分类有关。

简介：目的总结椎间孔镜下腰椎间盘髓核摘除术中转开放手术的原因,探讨相应对策。方法回顾分析2012年6月至2015年8月,我科实施的80例椎间孔镜下髓核摘除术的病例资料,其中有3例失败,中转为开放性手术的患者,通过分析其失败原因,制订相应的对策。结果3例中转开放手术的原因分别为：出血、疼痛及硬膜外高压。结论通过分析中转开放的原因,制订相应的对策,能更好地指导临床工作,避免类似情况的发生。

简介：目的：回顾性分析结合和未结合骨髓单个核细胞（bonemarrowmononuclearcells，BMMCs）移植的打压植骨治疗骨循环研究协会（associationresearchcirculationosseous，ARCO）分期IIB期、IIC期股骨头坏死的疗效。方法34例（53髋）非创伤性股骨头坏死（osteonecrosisofthefemoralhead，ONFH）手术患者获得随访。男27例，女7例。手术时年龄28～42岁，平均38.1岁。手术方法：微创扩大髓芯减压坏死灶清除、人工骨打压植入。BMMCs移植组加入5ml浓集后的BMMCs，单纯植骨组未加入BMMCs。采用Harris评分系统评估术后患髋功能改善情况，应用视觉模拟标尺法（visualanaloguescale，VAS）进行临床疼痛测定，影像学按股骨头是否塌陷及病灶修复情况评定。结果两组患者整体术后终末随访Harris评分较术前显著提高（64.1±4.6）分vs（78.8±4.8）分，（P＝0.0000）。与单纯植骨组相比，BMMCs移植组术后终末随访Harris评分较术前提高幅度更明显（28.6±0.5）%vs（18.4±1.7）%，（P＜0.0001）。两组患者整体术后终末随访VAS评分较术前显著降低（6.3±0.9）分vs2.6±0.7）分，（P＝0.0000）。与单纯植骨组相比，BMMCs移植组术后终末随访VAS评分较术前降低幅度更明显（-66.3±1.4）%vs（-51.7±2.9）%，（P＜0.0001）。BMMCs移植组临床成功率（21/26）高于单纯植骨组（10/27），差异有统计学意义（P＝0.001）。BMMCs移植组放射学成功率（23/26）高于单纯植骨组（11/27），差异有统计学意义（P＝0.001）。结论微创扩大髓芯减压坏死灶清除、人工骨打压植入术在选择合适的中早期非创伤性ONFH（ARCO分期IIB期、IIC期）可获得优良的中期疗效。结合浓集BMMCs移植可提高保留关节手术疗效和骨修复质量。

简介：目的探讨后路显微内镜颈椎髓核摘除术（cervicalmicroendoscopicdiscectomy,CMED）治疗单节段神经根型颈椎病（cervicalspondyloticradiculopathy,CSR）的临床疗效。方法2010年9月至2013年3月,我科采用后路CMED治疗单节段CSR患者19例,18例获随访,其中男13例,女5例;年龄31~59岁,平均41.9岁;病变节段C（4~5）5例,C（5~6）9例,C6-74例;均表现为单侧神经根卡压节段性根性疼痛,颈椎动力位X线片未见颈椎不稳。首次随访时间6~25个月,平均12.7个月,末次随访28~51个月,平均32.5个月,随访观察患者的视觉模拟评分（visualanaloguescale,VAS）、日本骨科学会（Japaneseorthopaedicassociation,JOA）评分、颈椎病变节段稳定性和椎间高度的变化,并进行统计学分析。结果VAS评分由术前的（7.12±1.11）分降至出院时的（2.82±0.64）分,首次和末次随访时分别为（1.94±0.76）分和（2.00±0.51）分;JOA评分由术前（12.58±1.06）分提高至出院时的（15.63±0.51）分,首次和末次随访时分别是（16.12±0.72）分和（15.88±0.78）分;出院时、首次随访和末次随访与术前相比,差异均有统计学意义（P〈0.05）;术前病变节段的椎间高度为（5.55±0.52）mm,末次随访时为（5.39±0.51）mm,虽有所减少,但差异无统计学意义（P〉0.05）;过伸过屈位X线片未显示明显颈椎失稳。结论只要选择好合适的适应证,后路CMED治疗单节段CSR创伤小、并发症少,能够获得满意的短中期临床疗效,但远期疗效仍有待继续观察。

简介：目的研究内源性硫化氢合成酶在突出椎间盘髓核组织中的表达情况及其与缺氧相关的细胞因子HIF-1a的表达以及髓核细胞凋亡之间的关系.方法选取2009年2月至2009年8月间北京大学第一医院骨科因为腰椎间盘突出症而行后路手术切除的椎间盘髓核组织标本共40例,其中男性16例,女性24例;年龄20～81岁,平均49.3岁.根据腰椎MRI和术中所见,将其分为包含组（后纵韧带完整）和非包含组（后纵韧带破裂）,每组病例20例,同时选取先天性脊柱侧弯手术切除椎间盘髓核组织标本5例作为对照组.通过免疫组化研究CBS、CSE及HIF-1α在不同椎间盘突出类型髓核细胞中表达的情况;通过TUNEL染色研究不同椎间盘突出类型中髓核细胞凋亡的情况;分别比较CBS、CSE、HIF-1α免疫组化阳性率和TUNEL染色阳性率在对照组、包含型和非包含型之间的差异;进一步研究髓核细胞中CBS、CSE与HIF-1α表达的相关性以及与细胞凋亡的相关性.结果CBS在椎间盘髓核组织中的表达情况：非包含组阳性率为51.3%±3.9%,包含组中阳性率为38.2%±5.5%,对照组中阳性率为19.8%±4.9%（P〈0.01）.CSE在椎间盘髓核组织中的表达情况：非包含组阳性率为51.5%±4.7%,包含组中阳性率为31.0%±5.3%,对照组中阳性率为18.3%±2.4%（P〈0.01）.HIF-1α在椎间盘髓核组织中的表达情况：非包含组阳性率为54.2%±4.8%,包含组中阳性率为29.3%±3.5%,对照组中阳性率为13.9%±4.0%（P〈0.01）.椎间盘髓核组织TUNEL染色情况：非包含组阳性率为21.4%±4.2%,包含组中阳性率为16.2%±6.1%,对照组中阳性率为7.6%±1.9%（P〈0.01）.经Person相关分析后,CBS和HIF-1α的表达正相关,r=0.849,（P〈0.001）;CSE和HIF-1α的表达正相关,r=0.915（P〈0.001）;CBS的表达和TUNEL阳性表达正相关,r=0.671,（P〈.001）;CSE的表达和TUNEL阳性表达正相关,r=0.801（P〈0.001）.结论腰椎突出椎间盘组织中表达内源�

简介：目的：研究地塞米松(DXM)和长春新碱(VCR)对高三尖杉酯碱(HH)诱导白血病细胞系K562-n凋亡与核因子-κB(NF-κB)活化的影响。方法：采用TdT介导的dUTP缺1：2末端标记技术(TUNEL)、DNA电泳方法观察K562-n细胞凋亡。采用电泳迁移率变动分析(EMSA)观察K562-n细胞NF-κB活化。结果：K562-n细胞未经药物诱导NF-κB有轻度活化；HH0．5μmol／L可明显诱导K562-n细胞NF-κB活化，DXM1．0μmol／L和VCR0．1μmol／L能显著抑制HH0．5μmol／L诱导的NF-κB活化，抑制率分别为32．0％和39．4％(P均<0．05)。HH0．5、5、50μmol／L均能诱导K562-n细胞凋亡，凋亡率分别为(30．00±3．34)％、(47．13±3．18)％和(68．63±8．14)％。DXM1．0μmol／L和VCR0．1μmol／L本身无诱导K562-n细胞凋亡的作用，但均能增强HH0．5μmol／L诱导的K562—11细胞凋亡，凋亡率分别提高达85．8％和114．6％(P均<0．05)。结论：HH诱导K562—13细胞凋亡的同时激活NF—κB；DXM和VCR可通过抑制NF-κB活化，增强其诱导K562-n细胞凋亡的作用。

简介：目的构建细胞外基质蛋白1基因（ECM1）的真核表达载体ECM1-pEGFP-N2，检测其在人乳腺癌细胞系MCF-7中表达。方法采用PCR方法，以ECMleDNA为模板，扩增出ECM1基因，用Bg1Ⅱ和KpnⅠ双酶切ECM1基因和pEGFP-N2载体，连接酶切目的片段，转化大肠杆菌DH5，筛选阳性克隆酶切、测序鉴定；利用脂质体介导的转染技术转染MCF-7细胞，荧光显微镜检测报告基因表达产物EGFP，免疫组化检测ECM1蛋白表达。结果利用PCR克隆出约1．6kb的ECM1基因；PCR鉴定、酶切鉴定及测序结果证实成功构建ECM1-pEGFP-N2真核表达载体；转染MCF-7细胞后，可在细胞内观察到报告基因产生的绿色荧光，用免疫组化方法可检测到ECM1蛋白。结论成功构建了ECM1-pEGFP-N2真核表达载体，并在MCF-7细胞中表达，为进一步研究ECM1的功能奠定了基础。

简介：目的观察修饰有骨形态发生蛋白质7（bonemorphogeneticprotein7,BMP-7）功能片段的功能化自组装多肽纳米纤维水凝胶RADKPS在低浓度炎症因子白介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）（10pg/ml）持续作用下对大鼠髓核细胞蛋白多糖和Ⅱ型胶原代谢的影响。方法体外分离培养SD大鼠髓核细胞（nucleuspulposuscells,NPCs）,取第3代NPCs分别在无BMP-7功能片段的RADA16-I或修饰有BMP-7功能片段的RADKPS中培养,试验共分4组：A组（无IL-1β干预的RADA16-I组）、B组（有IL-1β干预的RADA16-I组）、C组（有IL-1β干预的RADKPS组）和D组（无IL-1β干预的RADKPS组）。分别在培养的第3天、第6天及第9天通过RT-PCR和ELISA检测髓核细胞蛋白多糖和Ⅱ型胶原在RNA和蛋白水平的表达量。结果RT-PCR和ELISA结果表明在第3天和第6天时C组蛋白多糖和Ⅱ型胶原的表达水平均明显高于A组,差异均有统计学意义（P〈0.05）,但到第9天时两组之间的差异无统计学意义（P〉0.05）;B组蛋白多糖和Ⅱ型胶原的表达水平在第3天、第6天及第9天时均低于A组,但差异均无统计学意义（P〉0.05）;在第3天时C组蛋白多糖和Ⅱ型胶原的表达水平低于D组,差异无统计学意义（P〉0.05）,在第6天和第9天时,C组中两者的表达量均明显低于D组,且差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论髓核细胞经BMP-7功能片段刺激后对IL-1β抑制其蛋白多糖和Ⅱ型胶原合成的作用更为敏感,但低浓度IL-1β（10pg/ml）不能完全抵消功能化自组装多肽纳米纤维水凝RADKPS中BMP-7功能片段对大鼠NPCs蛋白多糖和Ⅱ型胶原合成的促进作用。本研究表明RADKPS在体外条件下有一定的抗IL-1β作用,所以即使在炎症因子IL-1β的存在下,RADKPS仍能促进髓核细胞蛋白多糖和Ⅱ型胶原的合成。

简介：目的：观察耐药细胞株LS-174T核中YB-1的活性改变及其对P-gp和PCNA转录表达水平的影响,探讨YB-1在肿瘤顺铂耐药机制中的作用。方法：采用顺铂药物浓度递增法、间歇性作用的体外诱导法建立人结肠癌的多重耐药细胞系LS-174T;用EMSA检测耐药肿瘤细胞核中转录因子YB-1活性的改变,半定量RT-PCR检测P-gp和PCNAmRNA表达水平的改变。结果：耐药细胞株核中YB-1的活性明显增加,且P-gpmRNA和PCNAmRNA的表达水平均较非耐药细胞株明显增高（P〈0.01）。结论：顺铂耐药细胞株细胞核内YB-1活性增高促进了P-gp和PCNA转录表达水平,它们可能共同参与顺铂导致DNA损伤的修复,在肿瘤耐药机制中发挥重要作用。

简介：目的探讨测量肱骨颈干角及扭转角的测量方法。方法收集肱骨干标本56根，其中右侧30根，左侧26根，利用X线于前后位及轴位摄片测量其颈干角与扭转角，对测定值进行统计学分析得出正常值。结果通过本文介绍方法，测量出肱骨颈干角为133．25°±5．26°，扭转角为31．36°±7．96°。经统计学处理左右两侧肱骨颈干角及扭转角对比，差异无统计学意义（P〉0．05，独立样本凇验）。结论肱骨颈干角、扭转角变异较大，肱骨近端肿瘤假体颈干角、扭转角设计应个性化。X线测量法是测定肱骨颈干角及扭转角的方法之一，临床上健侧的颈干角及扭转角可作为患侧肱骨近端肿瘤假体设计及安放的理论参考依据。