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  • 简介:目的对皮下筋膜层与腹壁肌层之间移植自体子宫内膜制作子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)模型进行评估。方法取10只雌性未交配性成熟大鼠,术前雌激素诱导,手术开腹取右侧子宫,将自体子宫内膜种植于双侧皮下筋膜层与腹壁肌层之间,术后第29天取出异位组织,进行组织形态学观察,免疫组织化学染色观察微血管密度(Microvesseldensity,MVD)。结果异位内膜在腹壁内生长,呈隆起囊状小包块,内有黏液,具有正常子宫内膜基本组织结构。异位内膜中微血管密度较在位内膜正常子宫内膜高。结论此手术方法建立大鼠子宫内膜异位症模型异位内膜病理改变与EMs患者类似,可以作为子宫内膜异位研究动物模型。

  • 标签: 子宫内膜异位症 动物模型 大鼠 免疫组织化学染色 微血管密度
  • 简介:目的探讨建立可供药物评价或生物学功能研究表达人PSCA抗原小鼠肿瘤模型。方法克隆人PSCA基因,构建pcDNA-PSCA质粒,稳定转染RM-1细胞,用RT-PCR流式检测方法筛选稳定表达人PSCA抗原RM-PSCA细胞株;再将RM-PSCA细胞接种C57BL/6小鼠,观察其致瘤性,寻找能够稳定致瘤细胞数量;进而观测RM-PSCA所致肿瘤生长情况及小鼠存活状况。结果筛选到了表达人PSCA抗原RM-PSCA细胞,且1×105个肿瘤细胞能够保证10只实验小鼠全部成瘤;所致肿瘤生长迅速,接种后小鼠平均存活时间为37d。结论该研究成功建立了稳定表达人PSCA抗原小鼠肿瘤模型。

  • 标签: 前列腺干细胞抗原 前列腺肿瘤 小鼠
  • 简介:目的建立种耐药性稳定三阴性乳腺癌4T1耐药小鼠模型,为研究体内肿瘤耐药机制逆转药物筛选奠定实验基础.方法采用顺铂(DDP)低剂量诱导及体内外交叉致瘤结合方法建立三阴性乳腺癌耐药小鼠模型;MTT法检测细胞耐药特性;实时荧光定量PCR法分析耐药相关基因MDR1、BCRP、MMP7及GST-π表达差异;免疫组化分析耐药相关蛋白P-gp、BCRP、MMP7表达差异;蛋白印迹法检测磷酸化Akt(phosphorate-Akt,p-Akt)总Akt(total-Akt,t-Akt)蛋白表达;小动物成像检测观察肿瘤生长情况.结果MTT显示建立三阴性乳腺癌耐药4T1小鼠模型耐药指数为12.84;耐药小鼠肿瘤组织中MDR1、BCRP、MMP7、GST-π基因mRNA表达量及P-gp、BCRP、MMP7蛋白表达量均高于非耐药小鼠(P〈0.01);Westernblot显示,耐药小鼠肿瘤组织p-Akt蛋白表达明显高于非耐药小鼠,t-Akt蛋白表达没有差异.非耐药小鼠与耐药小鼠肿瘤组织生长速度未见明显区别(P〉0.05).分别给予这两种模型小鼠相同剂量DDP治疗后,耐药小鼠对DDP敏感性明显低于非耐药小鼠(P〈0.01).结论初步建立了三阴性乳腺癌耐药4T1小鼠模型,为三阴性乳腺癌临床个体化治疗及耐药逆转研究等提供了良好实验动物平台.

  • 标签: 三阴性乳腺癌 肿瘤抗药性 顺铂 动物模型 小鼠
  • 简介:目的通过追赶生长饮食诱导C57小鼠出现代谢综合征并发脑衰老样病变动物模型,研究其可能机制。方法40只C57小鼠随机分为4组,正常对照组10只,低能量饮食组10只,高能量饮食组10只,追赶生长组(先低能饮食喂养6周再开放高能量饮食)10只,各组动物均连续喂养12周,记录体重、血糖,于实验末检测代谢综合征相关生化指标,计算胰岛素抵抗指数,Westernblot技术检测衰老相关蛋白P53磷酸化P53(ser15)表达水平,电镜下观察海马区脂褐素沉积情况。结果低能量组小鼠体重、血糖、代谢综合征相关生化指标(血清胆固醇、三酰甘油、胰岛素样生长因子1、胰岛素)以及P53磷酸化P53蛋白表达水平低于正常对照组,脂褐素沉着较少;高能量组追赶生长组代谢综合征指标显著高于对照组,并出现明显P53磷酸化P53蛋白表达量增多以及脂褐素沉积;其中追赶生长组表现出更为明显胰岛素抵抗倾向脑衰老样变。结论追赶生长饮食喂养可诱导小鼠代谢综合征模型并发脑衰老样病变,本研究为饮食方式改变引起代谢综合征及其并发症神经变性样变动物模型构建提供研究新思路。

  • 标签: 追赶生长 代谢综合征 脑衰老
  • 简介:目的比较正常组、模型组及对照组图形视觉诱发电位(PVEP)扫描视觉诱发电位(SVEP)视力,研究各组视觉电生理表现,探讨单眼睑缝合1周是否可以建立形觉剥夺性弱视模型。方法分析三组PVEP波形变化、潜时及完成次诱发反应时间;比较各组由SVEP得出客观视力。结果①正常组PVEP由2个波峰组成“M型”(正向波向上),模型组及对照组出现波分离波形由多个波组成,而且完成次反应时间延长。②缝合侧N75延迟,SVEP视力较正常组差且差别有统计学意义。③对照组未缝合侧视力恢复到正常水平而缝合侧视力仍差且与正常组有统计学差异。结论短期形觉剥夺视觉电生理变化弱视猫种表现,单眼睑缝合1周即可建立形觉剥夺性弱视猫模型。

  • 标签: 弱视 形觉剥夺 视觉电生理
  • 简介:2型糖尿病大鼠模型建立能够为糖尿病及其并发症发病机制、预防、诊断及治疗研究提供理想动物实验技术平台。2型糖尿病大鼠模型成模率受多种因素影响,本文就建立2型糖尿病大鼠模型主要影响因素STZ应用、高脂高糖饮食及大鼠选择与饲养等做综述。以期对建立2型糖尿病大鼠模型方法提供参考价值。

  • 标签: 2型糖尿病 大鼠模型 链脲佐菌素 高脂饮食
  • 简介:目的:用主动脉瓣关闭不全法致新西兰兔心衰模型。方法运用导管术造成新西兰兔主动脉瓣膜关闭不全,制作超容量负荷型心衰模型。观察动物毛色、精神状态、活动情况、饲料消耗指数、体重增加指数、呼吸频率等指标对该模型进行评价;检测血清SOD活力MDA含量,判断模型组动物机体抗氧化能力;利用酶联免疫法检测血清中cAMP、cGMP变化情况;利用基因芯片技术分析该模型基因表达差异。结果模型动物SBP、DBPLVSP著性下降,LV+dp/dtLV±dp/dt明显下降,LVDP显著上升。模型组与正常组比较,毛发枯槁,活动减少,进食减少,反应迟钝,精神萎靡,抓起时反抗减轻。模型组呼吸频率加快;模型组血清SOD活性低于正常组,MDA含量高于正常组;模型组血清cAMP明显低于正常组,cGMP明显高于正常组;利用基因芯片共检测出665个差异基因,其中与心功能较密切相关基因主要与离子通道、肌收缩、信号转导等功能有关。结论采用主动脉瓣关闭不全法建立兔心衰模型方法可靠。主动脉关闭不全,使心脏前负荷增加,造成左心室舒张末期容积增加,导致左心室扩大肥厚及心力衰竭。心肌组织基因芯片检测结果显示,该模型基因表达出现了变化。

  • 标签: 心衰 主动脉关闭不全 新西兰兔 动物模型
  • 简介:用人成骨肉瘤细胞系LJH-OS传代移植瘤组织作为移植材料,进行胫骨原位移植及皮下移植。结果发现胫骨原位移植潜伏期较短,生长快。皮下移植瘤呈局限性膨胀性生长,有不完整纤维包膜,未见肺转移,观察7周无明显消瘦;而胫骨原位移植瘤浸润基层,无纤维包膜,且发生肺转移,7周时有明显消瘦。原位移植裸鼠血清ALP水平高于皮下移植者。说明裸鼠胫骨微环境较皮下组织更适于人骨肉瘤浸润及转移表达.裸鼠胫骨原位移植模型恶性生物学行为更接近临床骨肉瘤患者实际情况,该原位移植模型建立为骨肉瘤研究提供了良好实验模型。

  • 标签: 胫骨 原位移植模型 裸鼠 人骨肉瘤 肺转移 皮下移植
  • 简介:目的高脂诱导建立五指山小型猪动脉粥样硬化(AS)模型,观察脂蛋白相关磷脂酶A_2(Lp-PLA_2)在AS模型血浆斑块中表达变化。方法将10只五指山小型猪随机分为正常对照(Ctr)组4只饲喂普通饲料、AS模型(ASmodel)组6只饲喂高脂饲料,连续造模24周。造模24周时,空腹取前腔静脉血测定总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、甘油三酯(TG)、C-反应蛋白(CRP)、Lp-PLA_2活性成分变化,取主动脉进行油红O染色以及取腹主动脉血管行HE染色IL-6免疫组化染色,观察血管脂质沉积斑块病理以及IL-6蛋白表达变化。采用RT-PCRWesternBlot法观察腹主动脉组织中Lp-PLA_2mRNA蛋白表达情况。结果与正常对照组比,AS模型组体重、体质量指数(BMI)、TC、LDL-C、HDL-C、CRP、Lp-PLA_2活性成分均显著升高(P〈0.05,P〈0.01),同时主动脉脂质沉积明显(P〈0.01)AS斑块形成,腹主动脉组织中Lp-PLA_2mRNA蛋白表达以及IL-6蛋白表达均显著升高(P〈0.05)。结论长期高脂饮食24周能诱发五指山小型猪AS,且Lp-PLA_2在参与血管炎症AS斑块形成中发挥了关键作用。

  • 标签: 五指山小型猪 动脉粥样硬化 脂蛋白相关磷脂酶A2 炎症
  • 简介:[目的]建立禽流感H5N1病毒感染恒河猴动物模型,探讨禽流感在哺乳类动物发病机制。[方法]通过“环甲膜穿刺术”经气管注射鸡胚培养禽流感H5N1病毒(AF148678;ACGoose/Guangdong/11961H5N1)感染恒河猴,观察恒河猴染毒后出现临床体征,用显微计数法检测外周血白细胞动态变化,用ELISA检测禽流感病毒特异性抗体变化规律,用流式细胞仪检测外周血T淋巴细胞及其亚群动态变化。在染毒后第1天、第3天、第10天第14天分别剖杀染毒组恒河猴1只,HE染色观察主要组织器官病理变化,用病毒分离、免疫组化RT-PCR三种方法分析禽流感病毒侵袭机体特点。[结果]临床症状体征:急性起病,表现为发热,呼吸困难,精神状态下降,活动度明显减少,食欲下降,咳嗽,紫绀等,肺部听诊双肺可闻及干、湿音。1、病理特点:以肺部损伤为主,伴多器官病变。肺部病变主要表现为弥漫性肺泡损伤,先后经历渗出期、增生期纤维化期;在肝脏、肾脏中枢神经系统中也观察到变性、坏死等病理变化。2、病毒侵袭机体特点:病毒只在呼吸系统中复制,不在呼吸道以外组织器官中复制;肺内支气管上皮细胞、肺泡上皮细胞肺巨噬细胞...

  • 标签: H5N1禽流感病毒 恒河猴 非人灵长类动物模型 病理变化 免疫组织化学 病毒分离
  • 简介:目的应用改良左冠状动脉回旋支结扎方法联合微创手术,制备小型猪急性心肌梗死模型,评估其有效性稳定性,探讨其在科研应用中意义。方法选择3月龄巴马香猪25头,麻醉下行气管插管呼吸机辅助通气,微创开胸结扎左旋支中段,建立急性心肌梗死模型。并于术前、术后1h、4周行心脏超声评估模型动物心脏功能,术后4周处死动物,取心脏行TTC染色评估梗死面积及病理变化,统计死亡率死亡原因。结果结扎术后1h4周后心脏功能较术前均明显降低,EF值由(64.2±4.6)%分别降至(48.2±5.3)%(49.7±6.1)%(P〈0.01),左心室侧壁室壁厚度变薄,胶原增生。梗死后1h室颤率17.3%,梗死面积为(19.2±3)%。结论应用改良左冠状动脉回旋支结扎方法联合微创手术能够建立稳定猪心肌梗死模型,具有手术创伤小、模型稳定死亡率低等特点,为相关研究提供了经济、理想动物模型。

  • 标签: 急性心肌梗死 小型猪 回旋支冠状动脉
  • 简介:目的应用植入式生理信号遥测系统全身体积描记法肺功能检测技术系统,观察清醒大鼠昼夜节律变化,并用多索茶碱进行性能验证,为今后该技术系统用于药物安全药理学评价提供依据。方法SD大鼠8只,雌雄各半,采用外科术将植入子植入大鼠腹腔建立遥测系统,结合肺功能检测技术,在术后14d观察清醒大鼠24h生理参数及昼夜节律变化,包括心率(HR)、血压、心电图Q波到血压舒张点时间差(QA间期)、呼吸、活动、体温和肺功能等指标,分为正常对照组、多索茶碱4080mg/kg组(雾化吸入),观察给药后上述参数变化情况。结果术后14d清醒大鼠生理指标具有明显昼夜节律变化。与正常对照组比较,多索茶碱40mg/kg组大鼠HR、潮气量(TV)、每分钟通气量(MV)、50%呼气流量(EF50)、吸气流量峰值(PIF)呼吸流量峰值(PEF)均明显增加(P〈0.01),呼吸频率、QA间期增强呼气间歇(PENH)均明显降低(P〈0.05,P〈0.01),但对血压、活动体温变化不明显;多索茶碱80mg/kg组大鼠HR、血压、TV、MV、EF50、PIFPEF均明显增加(P〈0.01),呼吸频率、QA间期PENH均明显降低(P〈0.01),但对活动体温变化不明显。结论本技术系统对大鼠生理昼夜节律无明显影响,并可灵敏监测到心血管呼吸系统相关变化,可用于清醒大鼠心血管呼吸系统安全药理学研究。

  • 标签: 遥测系统 肺功能 清醒大鼠 安全药理学 多索茶碱
  • 简介:目的探究本课题组研发亲和吸附材料特异清除肠源性内毒素有效性及安全性。方法运用阑尾结扎穿孔方法建立犬肠源性内毒素血症模型,进行灌流治疗。实验过程中选取多个时间点,监测生命体征,采血检测内毒素含量及血液生理生化指标。结果灌流吸附1、2h后内毒素含量为(0.49±0.22)、(0.034±0.00)Eu/mL,与灌流开始(7.25±1.18)Eu/mL相比,差异有显著性(P〈0.05)。灌流2h后平均清除率R=99.52%。灌注治疗后白细胞、红细胞、血红蛋白、血小板、总蛋白、白蛋白、球蛋白、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、尿素、肌酐指标均有所下降,与灌流开始相比差异有显著性(P〈0.05),各值均在正常值范围。灌流过程中犬生命体征平稳。结论本课题研发亲和吸附材料能高效清除实验犬血液中内毒素并有良好血液相容性。

  • 标签: 内毒素 肠源性内毒素血症 血液灌流 亲和吸附材料
  • 简介:目的应用β-氨基丙腈(β-aminopropionitrile,BAPN)饮水联合血管紧张素II(angiotensinII,AngII)皮下埋泵建立小鼠主动脉夹层模型。方法40只3周龄雄性C57Bl/6J小鼠随机分为两组,均每日给予0.1g/(kg·bw)BAPN饮水,BAPN饮水后第28天给予皮下埋泵,BAPN饮水+生理盐水埋泵组持续泵入生理盐水,BAPN饮水+AngII埋泵组持续泵入AngII,每分钟1000ng/(kg·bw)。采用小鼠无创血压测量计尾套法检测小鼠血压心率。实验中死亡小鼠立即解剖,分离主动脉。埋泵72h后,未死亡小鼠注射过量戊巴比妥钠处死,留取主动脉。苏木素-伊红染色显微镜下观察主动脉壁假腔形成情况。结果BAPN饮水+AngII埋泵组小鼠总夹层发生率为95%,死亡率为24%(夹层动脉瘤破裂死亡),BAPN饮水+生理盐水埋泵组夹层发生率为5%,死亡率为0;镜下主动脉病理切片显示夹层主动脉有假腔形成。结论成功建立高主动脉夹层发生率小鼠模型。

  • 标签: 主动脉夹层 血管紧张素II β-氨基丙腈 动物模型 C57B1/6J小鼠
  • 简介:目的:构建大鼠腹腔内工作型心脏移植模型,总结影响模型成功率因素。方法BrownNorway到Lewis大鼠心脏移植90例,其中预实验50例,正式实验40例。采用肺动脉左房吻合、主动脉受体腹主动脉吻合方法建立工作型心脏移植,统计手术存活率死亡原因,分析确保成功率关键因素。结果术者通过练习,手术成功率稳定77.5%,供心冷缺血时间为(34±5)min,整个手术时间为(71±11)min。HE染色显示移植后发生了免疫反应,移植模型可靠。结论决定手术成功率影响因素众多,其中主要因素有:合格实验动物、供体心脏保护、快速有效血管缝合术后动物护理。

  • 标签: 心脏移植 工作型心脏 动物模型 免疫排斥 大鼠
  • 简介:单克隆抗体(单抗)因其专性、高效价、低耐药性等显著优势,已成为生物制药业行业发展最快领域之,并成功用于治疗多种癌症、自身免疫病其他疾病等。最初鼠源性单抗发展至现今全人源单抗,新制备技术不断涌现,如单细胞分选测序技术等。同时,通过改变全人源单抗糖基化水平、优化单抗亲和力成熟技术等,有助于进步提高其稳定性、亲和力。目前,全人源单抗疗效安全性仍受到行业关注,也面临很多挑战,如何平衡在降低其免疫原性同时,进步提高其亲和力等,仍寄希望于新技术或策略。

  • 标签: 鼠源 全人源 单克隆抗体 糖基化 单细胞分选技术
  • 简介:目的探讨蜂胶乙醇提取物(EEP)安全性。方法用0.5%EEP对家兔进行皮肤急性毒性试验、皮肤刺激试验以及对豚鼠过敏试验。结果EEP低剂量、高剂量皮肤破损组对照组皮肤破损组各有’只家免,在24h观察到皮肤破损处微红,48h消失,其余各实验兔皮肤、毛发、眼、粘膜、呼吸、中枢神经系统均无任何中毒表现;按照皮肤刺激反应强度,评价标准,完整皮肤组平均分为0,判为无刺激性:破损皮肤组平均分值为033<0.50,亦判为尢刺激性;A组空白对照组B组EEP组动物均无红斑水肿反应,判为无致敏性。结论蜂胶提取物EEP在对实验动物体外寄生虫净化中安全、无毒、无刺激。

  • 标签: 皮肤 刺激性 EEP 蜂胶提取物 高剂量 对照组
  • 简介:目的了解鲫成体透明原因,探讨该性状应用特性,为透明鲫作为水生实验动物材料系统开发提供基础。方法对透明鲫进行繁殖,观察其后代性状,了解透明性状遗传规律;体视镜观察透明鲫色素细胞种类与分布,并与鲫比较;组织切片压片确认微孢子虫对透明鲫感染,观察感染症状变化。结果鲫透明性状可以遗传,大部分后代表现为通体透明,心、肝、肾、肠、鳔、鳃、脊椎等组织器官肉眼清晰可见。与正常鲫比较,透明鲫主要色素细胞为黄色素细胞,并未发现虹彩色素细胞,黑色素细胞数量也大为减少。微孢子虫对鱼体感染过程可直观观察,病原扩散空间分布能实时获得,具普通鱼类无法比拟应用优势。结论虹彩色素细胞缺失鲫透明突变结构基础。由于透明鲫内部器官可直接观测,无需依靠解剖或复杂仪器系统,在同动物身上可能获得系列动态试验数据,或可作为模型材料广泛应用于生命科学不同领域。

  • 标签: 透明鲫 虹彩色素细胞 感染 水生动物模型
  • 简介:目的:开发种新培养人胚胎干细胞(hESCs)包被基质,使hESCs培养更加简便。方法用甲醇固定小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)作为包被基质,人胚胎干细胞系X-01在该基质上生长,每隔5~6d传代次,培养10代后,对人胚胎干细胞特性进行检测,包括细胞形态、碱性磷酸酶染色、相关多能性基因表达分化能力。结果hESCs在新基质上生长良好,经10次传代后仍能保持典型hESCs克隆形态。碱性磷酸酶染色阳性,免疫荧光染色Oct4、SSEA4、Tra-1-60为阳性,体外分化可形成拟胚体。结论此种固定基质可以大量制备,长期保存,并可以长期维持hESCs未分化状态,为人胚胎干细胞体外扩增探索出了个新途径。

  • 标签: 人胚胎干细胞 小鼠胚胎成纤维细胞 甲醇固定 基质 MEF蛋白质复合物
  • 简介:目的研究氧氟沙星对昆明系小鼠胚胎胎鼠发育影响,确定其是否存在生殖毒性致畸性.方法①雄鼠分别灌服各剂量氧氟沙星,连续10d,末次给药24h后与母鼠合笼,在妊娠第三天取胚胎,记录各剂量组胚胎发育率.②孕鼠妊娠零天给药,分别经口灌服高、中、低剂量[36、72360mg/(kg.bw)]氧氟沙星溶液,连续给药3d,在妊娠第三天收集胚胎,记录胚胎发育率.③孕鼠妊娠零天给药,分别经口灌服各剂量氧氟沙星溶液,连续给药10d,在妊娠第16天取出胎鼠,记录胎鼠体重、胎盘重、活胎数、胎鼠外观畸形内脏畸形等指标.结果给药组与对照组相比,雄鼠服用高剂量组360mg/(kg.bw)氧氟沙星对着床前胚胎发育影响显著(P<0.05),而中等剂量低剂量组对着床前胚胎发育影响不显著(P>0.05).雌鼠服用不同剂量氧氟沙星对着床前胚胎发育影响不显著(P>0.05).氧氟沙星对受孕鼠活胎数吸收胎数均无明显影响,给药组活鼠体重、胎盘重均未见明显差异(P>0.05);药物组对照组均未出现外观畸形内脏畸形,也不存在剂量效应关系.结论孕鼠服用不同剂氧氟沙星对昆明系小鼠胚胎胎鼠发育无明显影响,表明氧氟沙星对雌性鼠不具有明显生殖毒性致畸性;但雄鼠服用高剂量氧氟沙星对着床前胚胎发育影响显著.

  • 标签: 氧氟沙星 生殖毒性 致畸性 发育影响 小鼠胚胎 着床前