简介：摘要目的制备特异性抗镰刀菌鸡卵黄抗体(IgY)并检测其对温度和pH的耐受性及抗真菌作用。方法取22周龄莱杭母鸡18只，采用随机数表法将其随机分为阴性对照组和实验组，每组9只。制备灭活镰刀菌丝悬液，将菌丝浓度2×107菌落形成单位(CFU)/ml的菌悬液与弗氏完全佐剂等体积混合充分乳化后，对实验组莱杭母鸡进行免疫，每只鸡注射1 ml，2周后换为弗氏不完全佐剂加强免疫。在免疫后的第5~16周每周收集卵黄，用硫酸铵盐析法制备IgY，将得到的蛋白溶液放入冻干机中制作成冻干粉，4 ℃保存。以质量分数0.9%氯化钠溶液代替菌悬液按照同样方式进行阴性对照组莱杭母鸡的注射，以制备非特异性抗体作为实验中的阴性对照。采用考马斯亮蓝法测定特异性IgY蛋白浓度，采用间接酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定其效价。将1×105 CFU/ml和1×103 CFU/ml镰刀菌悬液与不同浓度IgY及磷酸盐缓冲液(PBS)混合培养4 d后测定吸光度(A)值，用PBS及非特异性IgY与镰刀菌悬液共孵育作为空白对照组及阴性IgY组，绘制抗镰刀菌IgY的抑菌曲线。用pH 7.4的PBS将特异性IgY溶液稀释至0.02 mg/ml，分别在30、40、50、60、70、80和90 ℃水浴中孵育30 min后冷却至室温；此外，用pH值为l、2、3、4、5、6、7、8、9、l0、11和12的PBS将特异性IgY溶液稀释至0.02 mg/ml，4 ℃下放置1 h，均采用间接ELISA法测定抗体活性，评估IgY对不同温度和pH的耐受性。取SPF级8周龄雌性C57BL/6小鼠12只，采用随机数表法将其分为PBS对照组和特异性IgY治疗组，每组6只。用镰刀菌感染小鼠右眼角膜，建立小鼠真菌性角膜炎动物模型，建模后1 d，特异性IgY治疗组用200 mg/ml特异性抗镰刀菌IgY点眼，PBS对照组用PBS点眼，于感染后1、3和5 d在裂隙灯显微镜下观察小鼠角膜，根据炎症评分表对真菌性角膜炎的严重程度进行评分。结果免疫后第5~16周的IgY蛋白质量浓度分别为1.57、2.89、24.98、25.09、23.89、25.78、21.57、21.37、18.98、15.78、14.67和12.67 mg/ml。特异性抗镰刀菌IgY的效价从第5周开始升高，第7周时达到最高效价，为1∶10 000，可维持至免疫后12周，12周后抗体效价逐渐下降。抑菌曲线显示，与空白对照组和阴性IgY组相比，特异性IgY治疗组镰刀菌生长缓慢。抗体效价高于1∶10 000的特异性IgY在60 ℃以下具有较好的热稳定性；在pH 4~6具有最高活性，在pH 3~9的免疫活性能够保持在70%以上，随着pH值的进一步降低或升高，其活性迅速降低。镰刀菌感染后1、3和5 d，PBS对照组角膜炎症评分分别为3.50±0.55、7.33±0.82和4.00±0.63，特异性IgY治疗组角膜炎症评分分别为3.33±0.82、4.17±0.75和2.50±0.55。2个组不同时间点炎症评分总体比较，差异均有统计学意义(F分组＝247.35，P<0.05；F时间＝23.19，P<0.05)，其中镰刀菌感染后3 d和5 d，与PBS对照组相比，特异性IgY治疗组小鼠真菌性角膜炎炎症评分降低，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论用硫酸铵盐析法可成功制备高效价特异性抗镰刀菌IgY，其稳定性高，对温度和酸碱度均有一定的耐受性，可以在小鼠的真菌性角膜炎模型中减轻角膜溃疡的严重程度，降低炎症评分。

简介：

简介：摘要目的分析黑白石鸡救仙汤联合中药敷脐治疗放射性肠炎治疗20名放射性肠炎的效果。方法选择钦州市中医医院肿瘤科病房在2010年1月—2016年5月期间收治的20名放射性肠炎病患者作为研究对象，观察患者在使用黑白石鸡救仙汤联合中药敷脐治疗后的症状改善情况。结果患者的治疗有效率为90.0%多数患者得到了有效治疗，并且单项症状的积分前后出现了较大的改善。结论黑白石鸡救仙汤联合中药敷脐治疗放射性肠炎具有显著的治疗效果，存在显著的临床推广价值。

简介：摘要目的探讨建立肝细胞癌索拉非尼耐药细胞株鸡胚种植瘤模型的可行性。方法采用药物连续诱导法，构建肝癌索拉非尼耐药细胞株；利用鸡胚动物模型，建立索拉非尼耐药细胞株的移植瘤；初步探讨耐药细胞株鸡胚种植瘤模型成瘤特点，分析相关靶点和信号通路的表达。采用t检验。结果筛选到索拉非尼耐药的HepG2细胞(sHepG2)半数抑制浓度(IC50)为(88.7±7.6) μmol/ml，显著高于HepG2(t＝16.416，P<0.01)；建立HepG2与sHepG2细胞株鸡胚种植瘤模型各5例，成功种植成瘤率为70%[(3+4)/(5+5)]；种植瘤肿瘤鲜重HepG2组[(0.093 2±0.012 2) g]低于sHepG2组[(0.141 1±0.019 4) g，t＝3.709，P<0.05]；成瘤组织蛋白质印迹法(Western blot)检测，sHepG2组磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)(t＝9.336，P<0.01)、磷酸化蛋白激酶(p-Akt/p-PKB)(t＝7.123，P<0.01)表达显著高于HepG2组，人第10号染色体缺失的磷酸酶及张力蛋白同源基因(PTEN)(t＝6.164，P<0.01)、成纤维细胞生长因子受体1 (FGFR1)(t＝6.297，P<0.01)表达显著低于HepG2组。结论体外建立索拉非尼诱导的HepG2耐药细胞株，并在鸡胚移植瘤动物模型中成瘤，移植瘤生长以及瘤组织相关靶点与信号通路的差异性表明，鸡胚种植瘤模型可作为肝细胞癌索拉非尼耐药的在体研究方法。

简介：摘要目的观察650 nm半导体激光(功率2 mW)照射以视锥细胞为主的鸡视网膜后是否存在慢性光损伤，探讨该波段激光对视网膜的安全性。方法采用随机数字表法将60只自然光线下饲养1个月的小鸡分为正常对照组、照射3-min组、照射6-min组和照射30-min组，每组15只。采用650 nm激光并按照分组不同各组小鸡双眼每日接受不同时间的激光照射。分别于激光照射后1个月(2月龄鸡)、3个月(4月龄鸡)和6个月(7月龄鸡)各组任选5只进行活体光相干断层扫描(OCT)检查，测定鸡的相对视网膜面积；采用过量麻醉法处死并制备视网膜切片，行苏木精－伊红染色和TUNEL染色，分别观察各组鸡视网膜面积变化和视细胞凋亡情况；实验眼制备视网膜匀浆，分别采用TBA法和NBT法检测鸡视网膜中丙二醛质量摩尔浓度和超氧化物歧化酶(SOD)比活性；采用Western blot法检测鸡视网膜中L/M视蛋白和视紫红质蛋白的表达。结果2月龄时鸡照射30-min组视网膜中丙二醛质量摩尔浓度高于正常对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，4月龄时激光照射6-min组和照射30-min组丙二醛质量摩尔浓度均高于正常对照组，差异均有统计学意义(P＝0.026、0.003)，7月龄时所有激光照射组鸡视网膜中丙二醛质量摩尔浓度均高于正常对照组，差异均有统计学意义(P＝0.038、0.032、<0.01)。7月龄时激光照射30-min组鸡视网膜中SOD比活性和视紫红质蛋白相对表达量均低于正常对照组[SOD：(140.20±5.99)(nmol/s·mg)与(160.57±3.13)(nmol/s·mg)；视紫红质蛋白：0.392±0.065与0.566±0.072]，差异均有统计学意义(均P<0.05)。OCT检查显示，照射3-min组、照射6-min组和照射30-min组6个月内鸡视网膜相对面积及形态与正常对照组相比无明显差别；组织病理学检查显示各照射组鸡视网膜厚度均接近正常对照组，TUNEL染色显示各组鸡视网膜细胞排列整齐，未发现TUNEL阳性染色细胞。结论实验鸡眼接受650 nm半导体激光照射时，用2 mW的功率每日照射6 min持续6个月不引起明显光损伤；每日照射30 min持续6个月引起视网膜中自由基含量增高和视紫红质减少，提示存在光损伤。

简介：摘要目的探讨使用特异性鸡卵黄抗体喷剂治疗婴幼儿急性假膜型念珠菌性口炎的可行性。方法126例2岁以下的原发性鹅口疮患儿被随机分为观察组62例，对照组64例。观察组使用特异性鸡卵黄抗体喷剂病灶喷洒治疗，每日2次；对照组先用等渗碳酸氢钠溶液口腔护理，后用制霉菌素片研粉外涂病灶治疗，每日2次。两组疗程均为7天。结果观察组在开始治疗后口腔斑膜消退的时间明显短于对照组（p＜0.001），治疗7天内的治愈率明显优于对照组（p＜0.01），随访3个月的复发率明显低于对照组（p＜0.03），且药物的不良反应观察组也明显低于对照组（p＜0.05）。结论特异性鸡卵黄抗体IgY治疗婴幼儿鹅口疮是有效、简便而又安全的治疗方法，有较好的临床应用价值。

简介：

简介：【摘要 】目的 探讨c-erbB-2、MTA1及E-cadherin蛋白的表达与贲门癌的浸润、转移和分化程度之间的关系，以及它们三者之间的相关性。方法 采用免疫组织化学方法对60例贲门癌组织和18例癌旁组织中c-erbB-2、MTA1及E-cadherin蛋白的表达情况进行检测。结果 c-erbB-2的表达与贲门癌的浸润、转移呈正相关，与分化程度呈负相关(P值分别是0.018、0.040、0.016)，MTA1的表达与贲门癌的浸润深度无显著相关性，与贲门癌的淋巴结转移呈正相关，与分化程度呈负相关(P值分别是0.045和0.039)，E-cadherin的表达与贲门癌的浸润深度、转移呈负相关(P值分别是0.039、0.020)，与分化程度无关。Spearman等级相关分析显示，c-erbB-2与MTA1的表达呈显著正相关(rs = 0.276，P