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  • 简介:摘要目的探讨沉默P2X4R对6-羟基多巴胺(6-OHDA)诱导的帕金森病(PD)细胞模型的作用及其机制。方法(1)将给予6-OHDA作用的SH-SY5Y细胞依据6-OHDA浓度的不同分为0 µmol/L 6-OHDA组、50 µmol/L 6-OHDA组、100 µmol/L 6-OHDA组和150 µmol/L 6-OHDA组,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各组细胞的存活率,Western blotting及实时定量RT-PCR法检测P2X4R蛋白和mRNA的表达,以筛选出最适宜诱导PD细胞模型的6-OHDA浓度。(2)用不同序列的P2X4R-小干扰RNA(siRNA)慢病毒质粒(P2X4R-siRNA540、P2X4R-siRNA792、P2X4R-siRNA1401)及无义序列对照质粒(NC-siRNA)分别转染对数生长期的SH-SY5Y细胞(P2X4R-siRNA540组、P2X4R-siRNA792组、P2X4R-siRNA1401组和NC-siRNA组),采用Western blotting及实时定量RT-PCR法检测P2X4R蛋白和mRNA的表达,以筛选出沉默效果最好的P2X4R-siRNA序列构建P2X4R沉默细胞系。(3)将沉默效果最好的P2X4R-siRNA慢病毒质粒、NC-siRNA及P2X4R拮抗剂CORM-2分别转染最适宜浓度的6-OHDA诱导的PD细胞(PD+NC-siRNA组、PD+P2X4R-siRNA组和PD+CORM-2组),采用CCK-8法及流式细胞法检测各组细胞的存活率及凋亡率,Western blotting实验检测缝隙连接蛋白-1(PANX1)、Toll样受体-2(TLR-2)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和活化Caspase-3蛋白的表达。(4)合成PANX1及TLR-2过表达质粒(pCMV3-PANX1、pCMV3-TLR2),并与阴性对照质粒(pCMV3-NCV)分别转染PD+P2X4R-siRNA组细胞(PD+P2X4R-siRNA+pCMV3-TLR2组、PD+P2X4R-siRNA+pCMV3-PANX1组和PD+P2X4R-siRNA+pCMV3-NCV组),采用CCK-8法及流式细胞法检测各组细胞的存活率及凋亡率,Western blotting实验检测TLR-2、Caspase-3和活化Caspase-3蛋白的表达。结果(1)与0 µmol/L 6-OHDA组相比,50、100、150 µmol/L 6-OHDA组的细胞存活率呈剂量依赖性明显降低,P2X4R蛋白和mRNA表达呈剂量依赖性明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05),其中100 µmol/L 6-OHDA最适宜诱导PD细胞模型。(2)与NC-siRNA组相比,P2X4R-siRNA540组、P2X4R-siRNA792组和P2X4R-siRNA1401组的P2X4R mRNA和蛋白表达均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05),其中P2X4R-siRNA540组的P2X4R mRNA和蛋白表达最低。(3)与PD+NC-siRNA组相比,PD+P2X4R-siRNA组和PD+CORM-2组的细胞存活率均明显升高,细胞凋亡率均明显下降,Caspase-3、活化Caspase-3、PANX1和TLR-2蛋白的表达均明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。(4)与PD+P2X4R-siRNA+pCMV3-NCV相比,PD+P2X4R-siRNA+pCMV3-PANX1组TLR2蛋白的表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);PD+P2X4R-siRNA+pCMV3-TLR2组的细胞存活率明显提高,细胞凋亡率明显下降,Caspase-3和活化Caspase-3蛋白的表达明显降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论沉默P2X4R可以明显提高6-OHDA诱导的PD细胞模型的存活率,减少凋亡率,降低凋亡相关蛋白(Caspase-3和活化Caspase-3)的表达,发挥出神经保护作用,其机制可能与PANX1/TLR-2信号通路有关。

  • 标签: 帕金森病 P2X4受体 缝隙连接蛋白-1 Toll样受体-2 细胞模型
  • 简介:近日,华硕即将上市的一款面向高端市场的新产品——R800,给平静的导航仪市场带来了不小的波澜。华硕R800采用MicrosoftWindowsCE50的操作系统。界面一如既往的简洁亲切。内建MP3播放器,影片播放器,相片浏览器。在强大的400Mhz的中央处理和5英寸WQVGA大屏的支持下,所有的娱乐功能将不再仅仅是摆设。智能光源感应,蓝牙免提扩音转接/拨号,短信语音化,电话簿同步功能,

  • 标签: R800 导航仪 华硕 投影技术 MICROSOFT Windows
  • 简介:在打印技术的不断创新发展之下,打印机能够打印高质量的照片已经得到了广大专业人士的肯定。不过对于用户来说,总是希望自己的照片能够得到更完美的输出。越是对输出品质极端挑剔的专业用户,这种要求越是强烈。最近,爱普生推出了体现打印技术最新高科技成果的EPSONStylusPhotoR800照片打印机。

  • 标签: Epson公司 STYLUS PHOTO R800 性能评测 照片打印机
  • 简介:ThehistoricaltransitionoftimberdistributionpatterninChinawaspresentedfirstlywithmainpartsoftimberflowsinChina,whichincludedtimbermarkets,timbertransportsystemandregulationsoftimbertransport.BasedontheoverviewontropicaltimberflowsinChina,thetradeflowsoftropicaltimberfromproductionandimportsoftropicaltimbertoexportoftropicaltimberproductswereanalyzedbyvividillustrations.Atthesametime,problemsintimbertradeflowsinChinawereanalysedintheend.

  • 标签: 热带木材 木材分布 木材市场 对外贸易
  • 简介:在这篇论文,作者学习单个p拉普拉斯算符方程−∆pR−α+λg(x)uβ>N;在哪儿N≥3,1<p0,0<α<1,最大(p,2)<β+1<p*=。我们证明那在那里存在批评价值¤以便这个问题有至少二个答案如果0<λ<Λ;至少一个答案如果λ=Λ;并且没有答案如果λ>Λ。

  • 标签: LAPLACE方程 非奇异 拉普拉斯方程 正解的存在性 临界值
  • 简介:Inthispaper,wegetW1,p(Rn)-boundednessfortangentialmaximalfunc-tionandnontangentialmaximalfunction,whichimprovesJ.Kinnunen,P.LindqvistandTananka’sresults.

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  • 简介:“为R之所V”式的特征,前辈时贤已多有论述。笔者以日本《大正新修大藏经》为底本,调查了东汉三十四部佛经山,在十九部佛经(附录中加+者)中找到150例被动式,结合已有的成果分析,认为关于“为R之所V”式被动句的一些论断,仍有可以补充的地方。姑将自己的观察罗列于兹,敬请方家指正。东汉佛经的被动式共计十一种,具体资料见表格(一)。和中土文献不完全相同。与唐钰明(1987)提供的《东汉被动式频率表》㈢相比,佛经被动旬式有下面几个特点:“为Rv”、“为R之所v”式比中土文献运用频繁(“为RV”式东汉时在中土文献亦广泛运用,但在佛经中更为频繁);与中土文献相比,“见V”式运用得很少;中土文献的“见VR”、“VR式”、“为Rv”、“被”字式佛经未见用例;“为”式与中土文献大致持平;“所V”式、“为RV1所v2”式在中十文献中未见运用。下面,我们着重分析“为R之所V”式。广泛运用的时代吴金华(1985)、唐钰明(1987)、柳士镇(1992)均指出,这一句式在战国末年已经出现。如:《管子·枢言》:“凡国有三制:有制人者,有为人之所制者,有不能制人,人亦不能制者。”但何时广泛应用,说法纷纭。吴金华(...

  • 标签: 东汉佛经 被动式 为R之所V
  • 简介:在2007年拉斯维加斯PMA国际大展上,柯达对外发布了本年度春季上市机型。其中包括有两台高端Z系列,两台中端V系列和一台入门C系列。而V803作为中端V轻薄时尚系列其中的一员,以亮丽全新造型出现在众人面前,准备接替前任柯达卡片机王V550成为市场新宠。

  • 标签: 卡片机 V803 光学变焦镜头 自动对焦功能 两台 市场新宠
  • 简介:从生成语法的角度出发,验证了把"VP+NP"这一结构看作述补短语或动宾短语目前都是合理的,是因为它们反应了该结构的不同计算阶段。随着介词的虚化和后置用法的减少,"VP+NP"会逐渐倾向为动宾短语。

  • 标签: V+P+NP 重新分析 动宾短语 述补短语
  • 简介:Tegra4设备已经出现在市场了,东芝和NVIDIA自家分别推出了该芯片的设备,而作为竞争对手的高通骁龙800当然也不甘示弱,除了在6月25日盛大发布的XperiaZUltra之外,三星的GalaxyS4LTE—A也已经在韩国上市,下半年的SoC大战将会越来越精彩。

  • 标签: 设备 上市 NVIDIA GALAXY 竞争对手 LTE