简介:AIM:ToinvestigatetheroleofBrn-3bindifferentiationprocessofstemcellsderivedfromretinalMiillercellsintotheganglioncell.METHODS:ThepassageculturemethodofMiillercellsfromretinaofnewbornSpragueDawleyratswascarriedoutbyrepeatedincompletepancreaticenzymedigestionmethod.Thecellsweredetectedbyfluorescenceactivatedcellsorter(FACS),immunohistochemistrytechnologyandreversetranscription-polymerasechainreaction(RT-PCR)todeterminethepurity.Thethirdpassageofcellswasinducedintheserum-freededifferentiationmedium.TheexpressionofthespecificmarkersKi-67andnestinofretinalstemcellswasmeasuredbyRT-PCRandWesternblot.Thecellproliferationofretinalstemcellswasdetectedby5-Ethynyl-2’-deoxyuridine(Edu)staining.Thecellswererandomlydividedinto5groupsasfollows:groupA:Brn-3bsiRNAgroup;groupB:Brn-3bcontrolsiRNAgroup;groupC:pGC-Brn-3b-greenfluorescentprotein(GFP)group;groupD:pGC-GFPgroup;groupE:controlgroup(withoutanyhandling).ThepurifiedMullercellswereculturedfor3-7d,then,thepercentageofganglioncellswascountedbyimmunofluorescencestaining.RESULTS:FACSdemonstratedthepurityofretinalMullercellswasmore97.44%.Afewsphericalcellspheresappeared.Immunofluorescencestainingshowedthatstemcellswithinthesphereswerepositiveforretinalstemcell-specificmarkersnestin(redfluorescence,92.94%±6.48%)andKi-67(greenfluorescence,85.96%±6.04%).Meanwhile,RT-PCRanalysisshowedcellspheresintheculturetohaveexpressedabatteryoftranscriptscharacteristicofstemcellssuchasnestinandKi-67,whichwereabsentintheMullercells.WesternblotanalysisfurtherconfirmedtheexpressionofnestinandKi-67inthecellspheresbutnotintheMullercells.Edustainingshowedmostofthenucleiwithinthecellsphereswerestainedred(82.80%±6.65%),suggestingthenewcellsphereshadthecapacityforeffectiveproliferation.ThestatisticsresultshowedthedifferencebetweenBrn-3bsiRNAgroupand
简介:3型Stargardt病(STGD3,MIM600110)是一种常染色体显性遗传的早发性黄斑营养不良性疾病,是一种单基因遗传性疾病。目前为止,已知的STGD3致病基因为极长链脂肪酸延长酶4基因(ELOVL4)。ELOVIA是位于内质网上的一种调节极长链饱和及多不饱和脂肪酸生物合成的限速缩合反应中不可或缺的膜蛋白。作为一种遗传性疾病,STGD3目前仍无有效治疗方法。然而,饮食补充极长链多不饱和脂肪酸可能是治疗STGD3的一种可行疗法。对STGD3基因及致病机制的研究可能将有助于发现STGD3的有效治疗方法及进一步了解其他遗传性视网膜变性疾病和更复杂的年龄相关性黄斑变性。
简介:目的研究高眼压及其持续时间对大鼠视网膜caspase-3表达的影响。方法通过前房灌注平衡盐液建立大鼠急性高眼压模型:高眼压持续时间均为4h,依据眼内压的不同将sD大鼠60只随机分为正常对照组、40mmHg(1mmHg=0.133kPa)组、60mmHg组、80mmHg组、100mmHg组,每组12只。将眼内压为80mmHg的48只sD大鼠随机分为正常对照组、2h组、4h组、8h组,每组12只。正常对照组不给予前房灌注,其他各组分别给予不同的高眼压或高眼压持续不同时间。各组灌注结束后快速摘除眼球,分别采用Western印迹法和免疫组织化学法检测视网膜caspase-3的表达。结果与对照组相比,40mmHg组大鼠视网膜caspase-3的表达无增加(P〉0.05);60mmHg组、80mmHg组和100mmHg组大鼠视网膜caspase-3的表达均强于正常对照组(q值分别为4.87、5.28和6.71;P〈0.01),但各组之间差异无统计学意义(P〉0.05)。与对照组相比,2h组大鼠视网膜caspase-3的表达差异无统计学意义(P〉0.05),4h组和8h组大鼠视网膜caspase-3的表达均增加(q值分别为2.81和3.67;P〈0.01)。表达caspase-3的视网膜细胞主要位于神经节细胞层、外丛状层和内丛状层。结论采用前房灌注平衡盐液制作急性高眼压模型研究高眼压大鼠视网膜caspase-3的表达时,眼内压为80mmHg、高眼压持续4h即可。
简介:AIMTo学习discoidin象我一样domaincontaining蛋白质3的效果(EDIL3)在人的透镜的增长和上皮间充质的转变(EMT)上的弄空上皮的房间(LEC).METHODSRNA干扰被用来在vitro在人的LEC禁止EDIL3的表示。房间的形态学用一台转换显微镜被观察。房间增长用EdU工具包被估计。房间移植用Transwell房间被调查,LEC的EMT用共焦的显微镜并且西方的弄污被估计。转变生长因素(TGF)小径用数据显示出的西方的blotting.RESULTSThe被调查那个silencingEDIL3表达式改变了LEC形态学并且压制了LEC增长(P<0.05)并且移植(P<0.01)。而且,西方的弄污的结果证明那EDIL3弄空减少了光滑的肌肉肌动朊的表示(-SMA)(P<0.001)并且vimentin(P<0.01),当增加时E-cadherin的表示(P<0.001)。EDIL3弄空能压制Smad2的phosphorylation(P<0.01)并且Smad3(P<0.01)并且exracellular信号的激活调整了kinase(英皇家空军之阶级最低之兵)(P<0.05).CONCLUSIONThe调查结果显示EDIL3可能经由TGF小径在LEC参予增长和EMT并且可以是为以后的囊opacification的处理的一个潜在的治疗学的目标。
简介:研究显示,趋化因子受体3(chemokinereceptor3,CCR3)在眼部主要分布于视网膜色素上皮细胞中,亦表达于脉络膜血管内皮细胞(CECs)中。CCR3的特异性高表达在湿性年龄相关性黄斑变性(age-relatedmaculardegeneration,AMD)中被发现,并被证明在湿性AMD患者脉络膜新生血管(choroidalneovascularization,CNV)的产生中具有重要作用。本文拟对CCR3的结构、功能、目前研究存在的问题及未来的研究方向做一综述。相信随着对CCR3研究的进一步深入,必将帮助我们寻找到一种湿性AMD诊断和治疗的新方法,同时也可能对其它CNV性疾病研究以及新的抗CNV药物提供重要参考。
简介:目的:利用频域三维相干光学断层扫描(threedimensionalfrequencydomaincoherentopticaltomography,3D-OCT)评估准分子激光原位角膜磨镶术(laserinsitukeratomileusis,LASIK)对视网膜神经纤维层厚度(retinalnervefibrelayerthickness,RNFLT)的影响。方法:对83例83右眼接受LASIK治疗的受试者分别于术前及术后1d;1wk;1,3mo行3D-OCT检查,测量视乳头上方、下方、鼻侧、颞侧及12个钟点位RNFLT,利用重复测量方差分析及配对t检验对术前及术后的数据统计学处理。结果:术前及术后各时间点行重复测量方差分析显示,视乳头下方、颞侧、5:00~11:00位RNFLT均值无显著差异(P〉0.05),而视乳头上方、鼻侧、1:00~4:00位、12:00位RNFLT有显著差异(P〈0.05);进一步对术前及术后各时间点视乳头上方、鼻侧、1:00~4:00位、12:00位RNFLT分别行配对t检验得出,术后1d时视乳头上方、鼻侧及1:00~4:00位、12:00位RNFLT较术前变薄,差异有统计学意义(P〈0.05),术后1wk;1,3mo时以上各方位RNFLT较术前比较均无统计学差异(P〉0.05)。同时表明RNFLT变薄与屈光度及激光时间成正相关。结论:LASIK术后早期上方及鼻侧RNFLT变薄,但术后1wk恢复至正常水平,LASIK手术对RNFLT无长远影响。
简介:目的比较急性中心性浆液性脉络膜视网膜病变(CSC)的患侧与对侧眼视网膜频域相干光断层扫描(OCT)的图像特征。方法应用频域OCT对30例(60眼)单眼发病急性CSC患者患侧和对侧眼的黄斑部视网膜显微结构进行检测,比较患侧组与对侧组黄斑中心凹外核层厚度、光感受器层(IS/OS层)、视网膜色素上皮(RPE)形态差异。结果所有30例患者患侧眼均有不同程度黄斑部视网膜浆液性脱离,对侧眼中有4眼(13.3%)存在轻度视网膜浆液性脱离;患侧组黄斑中心凹外核层厚度均值为(95.32±24.87)μm,对侧组为(98.80±14.36)μm,两组差异无统计学意义(t=1.627,P=0.110)。患侧组中IS/OS层厚度均匀一致者12眼(40.0%),对侧组20眼(66.7%);患侧组IS/OS层厚度均匀一致伴内外节缺损、不均、凸起增厚者共18眼(60.O%),对侧组共10眼(33.3%),差异有统计学意义(X2=4.28,P=0.038)。患侧组中出现RPE异常者有24眼(80.0%),对侧组中有8眼(26.7%),差异有统计学意义(x。=17.143,P=0.000)。结论频域OCT能清晰显示急性CSC患者的细微病理结构改变,单眼发病CSC患者中一部分对侧眼存在IS/OS层和RPE异常,但是其发生率较患侧眼低。(中国眼耳鼻喉科杂志,2013,13:165—167)
简介:目的在视网膜缺血再灌注模型上,观察再灌注后视网膜内caspase-3的动态变化,探讨caspase-3与视网膜细胞凋亡的关系。方法结扎大鼠左侧颈总动脉1h,然后再灌注,检测再灌注后1、6、12、24、48、72h大鼠视网膜内caspase-3的水平及视网膜细胞凋亡平均发生率。结果再灌注后视网膜内caspase-3的表达出现在光感受器细胞层,在再灌注后1、6、12、24、48、72hcaspase-3平均光密度分别为0.067±0.004、0.923±0.045、1.962±0.377、3.793±0.860、2.039±0.427、1.332±0.109,细胞凋亡平均发生率(%)分别为1.8±0.1,7.1±0.2,18.2±1.4,34.7±2.1,22.6±0.9,16.3±0.4。结论再灌注后大鼠视网膜caspase-3表达与细胞凋亡呈现正相关,caspase-3可以促进视网膜细胞凋亡的发生。
简介:AIM:Toinvestigatethediffusioncharacteristicsofwaterofopticnerveandopticradiationinhealthyadultsanditsrelatedfactorsbydiffusiontensorimaging(DTI)at3T.METHODS:Atotalof107healthyvolunteersperformedheadconventionalMRIandbilateralopticnerveandopticradiationDTI.TheprimarydataofDTIwasprocessedbypost-processingsoftwareofDTIstudio2.3,obtainingfractionalanisotropyvalue,meandiffusivityvalue,principalenginevalue,orthogonalenginevaluebymeasuring,andanalyzedbytheSPSS13.0statisticalsoftware.RESULTS:Thebilateralopticnerveandopticradiationfiberspresentedgreencolorindirectionalencodedcolor(DEC)mapsandpresentedhighsignalinfractionalanisotropy(FA)maps.TheFAvalueoftheleftopticnervewas0.598±0.069andtherightwas0.593±0.065;themeandiffusivity(MD)valueoftheleftopticnervewas(1.324±0.349)×10-3mm2/sandtherightwas(1.312±0.350)x10-3mm2/s;theprincipalenginevalue(λ?)oftheleftopticnervewas(2.297±0.522)×10-4mm2/sandtherightwas(2.277±0.526)×10-3mm2/s;theorthogonalenginevalue(λ⊥)oftheleftopticnervewas(0.838±0.285)×10-3mm2/sandtherightwas(0.830±0.280)×10-3mm2/s;theFAvalueoftheleftopticradiationwas0.636±0.057andtherightwas0.628±0.056;themeandiffusivity(MD)valueoftheleftopticradiationwas(0.907±0.103)×10-3mm2/sandtherightwas(0.889±0.125)×10-3mm2/s;theprincipaleigenvalue(λⅡ)oftheleftopticradiationwas(1.655±0.210)×10-3mm2/sandtherightwas(1.614±0.171)×10-3mn2/s;theorthogonalenginvalue(λ⊥)oftheleftopticradiationwas(0.531±0.103)×10-3mm2/sandtherightwas(0.524±0.152)×10-3m
简介:目的:对比分析伴虹膜异色的青光眼睫状体炎综合征与Fuchs综合征患者的临床表现及特点,对两种疾病的鉴别要点作出分析及总结,利于临床医生对这两种疾病进行鉴别诊断。方法:对本院自2000年至今收治住院的3例伴虹膜异色的青光眼睫状体炎综合征(Posner-Schlossman’ssyndrome,PSS)患者进行详细的临床检查及研究,根据其临床资料总结出该病的临床特点,并对伴虹膜异色的PSS与Fuchs综合征的鉴别要点作出分析及总结。结果:共收集了3例伴虹膜异色的PSS患者,均为单眼反复发病,病程均在10a以上,发作时眼压明显升高,可达30.00~60.00mmHg,持续时间一般为3~7d,可自行缓解或用药后缓解,间歇期眼压正常,该3例患者除了具有典型的PSS表现外,虹膜均轻度异色。总结了该病在发作期及间歇期的临床表现,从发病情况、眼压波动情况、KP形态、晶状体情况、眼底及视功能情况详细论述了伴虹膜异色的青光眼睫状体炎综合征与Fuchs综合征的区别,并针对两种疾病的治疗提出了不同建议。结论:结合我们所提出的鉴别要点,对患者进行详细的临床检查,可以对这两种疾病进行鉴别诊断。
简介:AIM:ToIntroduceanewspecializedvisualacuitychartforamblyopicchildrenaged3-5yearsoldanditsclinicalapplications.METHODS:ThenewvisualacuitychartandnotationsweredesignedbasedonWeber-Fechnerlaw.Theoptotypeswereredagainstawhitebackgroundandwerespeciallyshapedfourbasicgeometricsymbols:circle,square,triangle,andcross.Aregulargeometricprogressionoftheoptotypesizesanddistributionwasemployedtoarrangein14lines.Theprogressionrateoftheoptotypesizebetweentwolineswas1.2589andthetestingdistancewas3m.VisualacuityscorecouldberecordedaslogMARnotationordecimalnotation.Agestratifieddiagnosticcriteriaforamblyopiaestablishedbyconsensusstatementondiagnosisofamblyopia(2011)amongmembersoftheStrabismusandPediatricOphthalmologyGroup,OphthalmologySociety,ChineseMedicalAssociation(SPOGOSCMA)wereillustratedinthenewvisualacuitychart.RESULTS:Whenassessingvisualacuityinchildrenaged3-5yearsold,thisnewvisualacuitychartthatconsistsoffoursymmetricalshapes(triangle,square,cross,andcircle)overcameaninabilitytorecognizethelettersofthealphabetanddifficultiesindesignatingthedirectionofblackabstractsymbolssuchasthetumbling’E’orLandolt’C’,whichthesubjectswerepronetoloseinterestin.Thevisualacuityscoremayberecordedindifferentnotations:decimalacuityandlogMAR.Thesetwonotationscanbeeasilyconvertedeachotherintheneweyechart.Themeasurementsofthisnewchartnotonlyshowedasignificantcorrelationandagoodconsistencywiththeinternationalstandardlogarithmicvisualacuitychart(r=0.932,P<0.01),butalsoindicatedahightest-retestreliability(89%ofretestscoreswerewithin0.1logMARunitsoftheinitialtestscore).CONCLUSION:Theresultsofthisstudysupportthevalidityandreliabilityofdistancevisualacuitymeasurementsusingtheneweyechartinchildrenaged3to5yearsoverawiderangeofvisualacuities,andtheneweyechartisgreatforearl