简介:目的构建Wilson病基因ATP7B的重组腺病毒载体.方法分别以BamHⅠ+SalⅠ双酶切pcDNA3.0/ATP7B和pDC315,将ATP7BcDNA目的基因片段和线性化的pDC315连接,定向克隆构建pDC315/ATP7B,以PCR和酶切的方法鉴定.pDC315/ATP7B与腺病毒骨架共转染293细胞构建Ad-ATP7B,PCR进行鉴定.结果经PCR和酶切鉴定证实pDC315/ATP7B构建成功.pDC315/ATP7B与腺病毒骨架共转染293细胞后见明显的毒斑,说明二者在293细胞中同源重组并包装成功.经PCR证实重组腺病毒Ad-ATP7B构建已完成.结论本实验成功构建了ATP7B外源目的基因序列完全正确的重组腺病毒载体Ad-ATP7B,为下一步采用ATP7B基因重组腺病毒载体对Wilson病进行基因治疗打下了基础.
简介:目的:探讨低频段小探头B超(LFSPU;频率范围3-9MHz)在神经外科手术中的应用价值。方法收集2014年1月至2014年12月利用LFSPU辅助颅脑手术的病例98例,其中脑肿瘤68例,脑脓肿12例,婴幼儿脑积水分流手术10例,脑内血肿8例。结果婴幼儿前囟或3cm×2cm骨窗即可满足LFSPU探头置放和探测需求,探测距离在7cm以上,探测到最小病灶直径为1.0cm,最深5.5cm。LFSPU均显示所有病灶、脑室端分流管和脓肿穿刺针,定位成功率为100%;肿瘤病灶切除后,术中LFSPU发现残留肿瘤23例,继续切除16例(病理学证实为肿瘤13例),7例因残留病灶位于重要区域未进一步切除。结论术中LFSPU可通过小骨窗和未闭前囟进行探测,实时动态监测手术过程,在神经外科手术中有重要的临床价值。
简介:目的:探索培养优秀护理人才的有效方法和途径。方法:护理部协同政治部研究制订了优秀护理人才库建设实施办法、培养方案、考核验收、后续使用等系列文件,于2013年选拔出85名优秀护理人才建立人才库,设专科护理骨干人才库、护理管理后备人才库、专科护士库3个子库分类培养技能型、管理型、专家型护理人才。在为期2年的培训期间针对各子库培养目标进行相关理论与实践的定向培训,期满后进行考核评审验收,并根据考核结果制定了后续使用办法。结果:人才库的建立得到全院护理人员的积极响应;得到医院管理部门的大力支持;考核结果显示,入选对象中69名考核达标,其临床、教学、管理、科研能力均明显提高。结论:人才库建设为护理人才发展提供了进步阶梯,明确了努力方向,激发了进取动力,为护理事业发展培养储备了所需人才。
简介:BACKGROUND:Studieshavedemonstratedthatthemechanismsunderlyingcellularapoptosissignaltransductionfocusontwopathways:intracellularmitochondriaandextracellulardeathreceptor.Thecurrentevidencesupportsthatsignaltransductionofcellularapoptosisalsoincludesendoplasmicreticulumstresssignaltransduction.OBJECTIVE:ToobserveCaspase-12expressionandcellularapoptosisfollowingischemiainratswithprogressivespinalcordcompression,andtoverifytheinfluenceofendoplasmicreticulumstressontheapoptosisinducedbyspinalcordinjury.DESIGN,TIMEANDSETTING:Arandomized,controlled,animaltrialwasperformedattheInstituteofNeuroscienceinChongqingMedicalUniversitybetweenJanuaryandOctoberin2006.MATERIALS:Immunohistochemicalkit,diaminobenzidine,andTUNELkitwerepurchasedfromBeijingZhongshanBiotechnology,China;rabbitanti-ratCaspase-12monoclonalantibodywasprovidedbySantaCruz,USA.METHODS:SixtyWistarrats,aged3-4months,wererandomlyassignedtoamodelgroup(n=50),whichunderwentspinalcordcompressionintheL_1segmentfollowingL_1laminectomyandarticularprocessexcisiontoestablishamodelofprogressivespinalcordcompression,andasham-surgerygroup(n=10),whichunderwentonlylaminectomy.Startingwiththefirstdayaftersurgery,theratswerelocallyanesthetized,theskinwasopened,andthescrewwasrotatedby1/4ofacycle,twiceweekly.MAINOUTCOMEMEASURES:At3,7,14,21,and28daysaftersurgery,ratsfromeachgroupwereanesthetized,andthespinalcordswereresected.Pathologicalchangesfollowingspinalcordcompressionweredeterminedusinghematoxylin-eosinstaining,Nissldye,andtransmissionelectronmicroscopy.TheTUNELmethodwasusedtoobserveneuronalapoptosisinthecompressedspinalcordsegments.ImmunohistochemistryandWesternblotwereutilizedtodetectCaspase-12expressioninthecompressedsegments.RESULTS:Cellularswelling,neuraldegeneration,andalteredendoplasmicreticulumstructureswereobservedat3days