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  • 简介:目的检测HighFive昆虫细胞系对BALB/c裸鼠致瘤性情况,以确保其作为疫苗生产细胞株安全。方法将裸鼠随机分为5组,分别为HighFive基础细胞库细胞试验组、HighFive最高限制代次细胞试验组、HEp-2细胞阳性对照组、CEF细胞阴性对照组不作任何处理空白对照组,用细胞悬液背部皮下接种裸鼠。3周12周后对裸鼠解剖及病理组织学检查,其是否有肿瘤形成。结果阳性对照HEp-2细胞组裸鼠接种后3周注射部位形成结节,病理组织学检查为鳞状细胞癌;阴性对照CEF细胞组HighFive细胞组均无结节形成,接种后12周经解剖用病理组织学检查,均无肿瘤形成。结论基础代次最高限制代次HighFive细胞均不具有致瘤,可安全地应用于疫苗生产。

  • 标签: 致瘤性 裸鼠 HIGH Five细胞
  • 简介:建立动物模型目的是在实验动物身上复制人类疾病模型,用于研究人类疾病病因、发病、病理变化以及疾病预防治疗。目前尚无理想阿尔茨海默病(Alzheimer’sdisease,AD)动物模型,AD实验动物模型滞后在很大程度上制约AD治疗药物筛选。随着AD病因发病机制研究不断深入,更完善AD动物模型也在陆续出现。近年来出现转基因动物模型属于AD病因模型,但也不能完整复制出AD所有特征。最大缺憾在于缺乏神经原纤维缠结(neurofibrillarytangles,NFTs)和在某些转基因模型中(尤其是单转基因模型)无广泛神经元丢失。虽然用免疫组化方法检测到tau蛋白,但从未发现成对螺旋纤丝(pairedhelicalfilaments,PHF)。

  • 标签: 转基因小鼠 β-淀粉样前体蛋白基因swe基因/突变早老蛋白dE9基因 阿尔茨海默病 β淀粉样蛋白
  • 简介:目的通过度他雄胺对大鼠附睾精子生育影响,探索调节雄性生育睾丸后作用靶点.方法使用度他雄胺2040mg/(kg·d)大鼠灌胃给药,连续2周.给药结束后雄雌鼠按1∶2合笼,计算生殖指数;采用计算机辅助精子分析系统分析精子活力形态;采用SYBR-14PI双重荧光染色计算精子存活率;采用Elisa法测定大鼠睾酮(T)双氢睾酮(DHT)血清浓度;采用HE染色法对各组睾丸、附睾进行组织学分析.结果度他雄胺低、高剂量组双氢睾酮浓度均显著下降,分别为0.540.28nmol/L(P<0.01),精子活力明显降低,分别为39.0%28.7%(P<0.01),畸形率分别增加为10.3%15.6%(P<0.05),最后受孕率分别降为62.5%38.4%.而睾酮水平和交配指数均无明显变化(P>0.05),睾丸附睾亦无明显病理学改变.结论度他雄胺通过抑制DHT生成,影响附睾精子成熟而导致大鼠不育,为今后男性避孕不育药物研发提供新思路.

  • 标签: 度他雄胺 附睾 精子成熟 生育力
  • 简介:目的建立具有稳定性高,重复性强,存活时间长大鼠心肌梗死模型,探讨采用心电图(ECG)心脏超声心动图(UCG)监测心梗后心电生理左室功能变化可行。方法Wistar大鼠经10%水合氯醛麻醉后,气管切开插管及连通呼吸机,开胸后结扎冠状动脉左前降支。于手术后4、812周行ECG检测UCG检查,术后12周取出心脏行病理检查。结果采用本法建立大鼠心肌梗死模型,术后72h内大鼠存活率为83.3%,术后12周以上大鼠存活率为73.3%。术后48、12周ECG监测示心梗后PR间期,QRS时限,QT间期QTc间期均较假手术组延长,同期行UCG监测示心梗后左室舒张末期内径左室收缩末期内径显著增加,左室射血分数值左室短轴缩短率值显著降低,12周后组织病理HE染色符合慢性心肌梗死病理改变。结论本技术操作简单、创伤轻、成功率高,术后采用ECGUCG可有效监测心梗后不同时期心电变化左室功能变化。

  • 标签: 心肌梗死 心电生理 左室功能
  • 简介:目的探讨快速建立系膜增殖肾炎大鼠模型方法。方法30只SD大鼠随机分3组。正常对照组;葡萄球菌内毒素(SEB)静脉注射,牛血清白蛋白(BSA)隔日口服及免疫佐剂皮下注射组;在第二组基础上加作肝左叶切除组,14周后分别作尿蛋白,IGA免疫荧光及病理组织检查。结果肝左叶切除组蛋白尿出现时间早于非肝切除组,但两组在14周后蛋白尿定量无明显统计学差异(P>0.05)。对照组尿蛋白定性始终均为阴性,光镜检测轻至中度系膜扩张,伴系膜细胞少量增生,但两组比较无明显统计学意义(P>0.05)。肝左叶切除组IgA免疫荧光强于非肝切除组。结论葡萄球菌肠内毒辣纱静脉注射,BSA隔日口服,免疫增强剂或在上述基础上加肝左叶切除方法都能诱发SD大鼠系膜增殖肾炎模型。肝左叶切除组蛋白尿出现时间早;但于14周后尿蛋白量无显著差异。

  • 标签: 系膜增殖性肾炎 大鼠模型 比较 IGA肾病 蛋白尿 免疫荧光
  • 简介:目的探讨噪声污染对大鼠血激素水平和热休克蛋白-70(Hsp-70)表达影响。方法40只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(正常饲养)实验组(分为35、65、85dB三个组),每组10只动物。每天刺激1次,每次刺激30min,连续刺激20d。第21天采血用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血液中去甲肾上腺素(NA),睾酮(T),多巴胺(DA),Hsp-70水平。结果ELISA法检测发现,实验组(35、65、85dB组)大鼠体重比对照组分别减轻23.45%,30.13%,35.64%,TDA水平分别降低了9.12%、20.06%、37.99%15.49%、18.31%、24.88%;血NAHsp-70水平分别升高了35.08%、171.52%、197.86%39.34%、195.09%、285.25%,差异均有显著(均P<0.01)。结论噪声污染能显著影响大鼠血激素水平和热休克蛋白-70表达。

  • 标签: 噪声污染 激素 热休克蛋白-70 WISTAR大鼠
  • 简介:目的探讨系统红斑狼疮(简称狼疮)TC小鼠肠道微生物菌群结构与抗dsDNA抗体之间关系。方法ELISA法检测狼疮TC小鼠血清抗dsDNA抗体,然后分别收集dsDNA阳性组阴性组小鼠粪便,利用IlluminaHiSeq2500高通量测序,进行粪便样本16S测序,比较两组之间肠道微生物菌群结构与抗dsDNA抗体水平之间关系。结果通过ELISA检测抗体结果小鼠粪便高通量测序结果显示,dsDNA阳性组TC小鼠物种群落多样显著低于dsDNA阴性组;同时,两组TC小鼠肠道微生物分别在门水平Chloroflexi(绿弯菌门);纲水平Betaproteobacteria(β变形菌纲)、Deltaproteobacteria(δ变形菌纲)Ktedonobacteria(纤线杆菌纲);目水平Burkholderiales(伯克氏菌目)、Desulfovibrionales(脱硫弧菌目)Ktedonobacterales(纤线杆菌目);科水平Alcaligenaceae(产碱菌科)Desulfovibrionaceae(脱硫弧菌科);属水平Parasutterella(副萨特氏菌属)Desulfovibrio(脱硫弧菌属)上差异有显著(P<0.05)。结论狼疮TC小鼠肠道微生物菌群结构与抗dsDNA抗体高度相关,本研究为进一步阐明肠道微生物菌群与系统红斑狼疮发病机制关系提供依据。【关键词】┣┣(中)关键词┫┫

  • 标签: 肠道微生物菌群 系统性红斑狼疮 抗DSDNA抗体
  • 简介:目的初步研究巴尔通体在恒河猴体内存在情况,并分析其柠檬酸合成酶(gltA)基因序列,判断巴尔通体种属。方法16只来自福建恒河猴,用血琼脂培养基分离可能存在巴尔通体。根据NCBI数据库上巴尔通体gltA基因序列,设计一对引物,以巴尔通体菌落为模板进行扩增,将获得序列进行克隆测序。结果从3只恒河猴体内成功分离到了巴尔通体病原,并获得了巴尔通体gltA全长基因序列,测序结果表明该序列与五日热巴尔通体同源99%。结论福建来源恒河猴种群携带巴尔通体病原,巴尔通体流行地区可能存在鼠与灵长类动物之间病原体流行传播。

  • 标签: 五日热巴尔通体 柠檬酸合成酶 恒河猴 序列分析
  • 简介:目的采用临床分离茄病镰刀菌感染树鼩角膜,建立茄病镰刀菌角膜炎树鼩模型。方法茄病镰刀菌接种到沙保氏培养基,26℃培养箱培养7d,收集真菌混悬液,血细胞计数板调整孢子数量为1×10^10CFU/mL。清洁级树鼩40只随机分为实验组(n=30)、对照组(n=10)。实验组用胰岛素针头(29G)将真菌孢子混悬液50μL注入角膜基中央,对照组注入生理盐水50μL。通过前段照相、共聚焦显微镜检查、病理组织学变化、感染角膜组织培养对模型进行评价。结果真菌浸润范围、角膜上皮细胞内皮细胞水肿程度、菌丝数量均与时间呈正相关;炎细胞浸润数量造模后第7天达到高峰,以中性粒细胞为主;实验各时间点均可见菌丝平行于基质纤维生长;感染后角膜组织培养可见茄病镰刀菌生长;造模成功率为86%。结论采用基质注射茄病镰刀菌孢子方法首次成功建立茄病镰刀菌角膜炎树鼩模型。

  • 标签: 树鼩 茄病镰刀菌 动物模型 真菌感染 角膜炎
  • 简介:目的探索建立化疗损伤卵巢功能早衰动物模型适宜方法及最佳时间。方法以70只ICR雌性小鼠为研究对象,腹腔连续注射顺铂7—14d,观察不同剂量时间条件下顺铂对小鼠体重、卵巢功能、肝肾毒性及卵巢组织抗氧化系统各指标的变化。结果顺铂可引起小鼠体重明显下降,卵巢功能减退,出现肝肾毒性,并可引起卵巢抗氧化及氧化损伤指标的异常,与对照组比较均有明显差异。结论3.0-4.0mg/(kg·bw)顺铂作用7d后即可引起小鼠出现明显卵巢功能衰退、肝肾损伤,氧化损伤是顺铂产生其毒性作用可能机制之一。该模型生殖内分泌病理组织学变化,与人类化疗损伤卵巢功能早衰病变过程相似。

  • 标签: 卵巢功能早衰 模型 动物 小鼠
  • 简介:目的通过剑尾鱼属内鱼类杂交,观察黑色素瘤在其杂交后代形成情况.方法白体剑尾鱼(♀)与黑体剑尾鱼(♂)杂交,子一代(F1)子二代(F2)分别自交,观察其后代外部特征变化黑色素瘤形成情况;对黑色素瘤进行组织病理观察.结果剑尾鱼杂交种F2代开始出现性状分离,F3中有较高黑色素瘤发生率,为20.5%.HE染色Lillie黑色素染色证实增生组织为黑色素瘤.结论通过不同剑尾鱼杂交自交,后代有黑色素瘤形成,可望进行黑色素瘤模型构建.

  • 标签: 剑尾鱼 杂交种 黑色素瘤 组织病理学 形成 动物模型
  • 简介:目的观察灵光注射液(复方樟柳碱)对失血性休克再灌注大鼠心脏肝脏损伤影响.方法将56只雄性大鼠随机分4组,分别设为假休克组(8只)、模型组(16只)、灵光注射液低剂量组(16只)高剂量组(16只),除假休克组外,大鼠均经历4kPa,70min失血性休克,在休克复苏后6h12h各组分别处死半数动物,检测血清CK、CK-MB、LDH、ALT、AST,心脏肝脏做组织学超微结构检查.结果与结论灵光注射液对大鼠失血性休克再灌注引起心脏肝脏功能形态损伤均有明显治疗作用,其机制可能与改善微循环、清除氧自由基保护生物膜作用有关.

  • 标签: 樟柳碱 大鼠 休克 出血性 心脏 肝脏 灵光注射液
  • 简介:目的探讨猪TCR基因分子结构复杂及其与人类相似。方法以公开猪TCRα链基因为参考序列设计两对特异性引物,用RT-PCR法从合作小型猪外周血、淋巴结脾脏淋巴细胞中克隆93个猪TCRα基因(简称STA)。结果测序分析表明,克隆猪TCRα链基因均含有可变信号肽区V区、高变J区恒定C区基因片段,但基因间核苷酸序列组成都不完全相同,且具有十分复杂多态多样,基因间同源在68.4%-98.7%,这与TCRα链基本基因结构特征相一致。依据TCRα基因同源对其分子结构、遗传演化关系归类分析发现,在其信号肽区、FR1区CDR1区、FR2区CDR2区以及FR3区CDR3区都存在一些变异集中点变异热点区。用IMGT/V-QUEST分析方法可将合作小型猪TCRαV区(STAV)、J区(STAJ)基因片段与人类进行比较分析,发现合作小型猪TCRα与人类遗传演化关系较近,每个序列都能找到与人类对应TRAV、TRAJ基因片段,甚至V区相似可达92%以上。结论近交培育合作小型猪在正常状态具有应对外界复杂微生物等环境TCR遗传多样分子基础,且适合作为人类免疫学及疾病研究动物模型。

  • 标签: 合作小型猪 TCRα基因 生物信息学 多样性
  • 简介:阿尔茨海默病(AD)是老年人最常见疾病,而实验动物模型研究滞后是制约AD机理研究药物开发瓶颈之一.恒河猴在AD机理研究药物开发等方面起着不可替代重要作用.恒河猴自发诱发AD模型都能较全面地复制AD各种病变,尽管造模方法还有待改进优化,但已显示出良好应用前景开发价值.现就恒河猴动物模型进展进行了综述评价.

  • 标签: 阿尔茨海默病 老年性痴呆 恒河猴 动物模型
  • 简介:椎间盘退行变动物模型已经应用于研究椎间盘生物力学行为、生物化学变化生物学改变。为了探讨生骨蛋白-1(OsteogenicProtein-1,OP-1)在椎间盘合成代谢抗分解代谢中作用,美国Rush大学生化系ChubinskayaS等人用椎间注射方法制作了椎间盘退行变模型,并用生物学免疫组化方法开展研究工作。该实验共用了34只大鼠,分成5组:空白对照组、阴性对照组、核浆(nucleuspulposus,NP)盐注射加压组、两组OP-1注射组:COP-1组(椎间盘注射OP-1后持续加压)ROP-1组(OP-1注射后停止加压)。

  • 标签: 椎间盘 分解作用 挤压性 慢性 生物化学变化 动物模型
  • 简介:目的:筛选豚鼠基因组多态微卫星标记,为豚鼠遗传质量控制及基因定位等工作奠定基础。方法采用磁珠富集法豚鼠基因组数据库筛选法获取微卫星位点序列,通过分析初步筛选,挑选部分候选位点,根据其序列设计引物,对5种不同来源豚鼠基因组DNA标本进行PCR扩增,以期获得多态分子标记。结果本实验采用磁珠富集法共获得微卫星序列304个,设计引物125对,最终获得多态位点1个,暂未发现多态特异性位点17个;用数据库筛选法共获得微卫星序列292个,设计并合成相应引物178对,最终发现多态位点25个,暂未发现多态特异性位点28个。结论本实验获得26个多态微卫星标记,45个潜在候选标记,为微卫星标记在豚鼠遗传质量监测及突变基因定位等工作应用奠定基础。

  • 标签: 豚鼠 微卫星 多态性标记 筛选
  • 简介:通过临床实验室研究,对人类疾病诊断、治疗预防方法医学科学不断地发展,作为一个基本方法,动物试验在医学研究领域起重要作用,并且解决许多以往不能解决实际问题重大理论问题。但同时也产生了一个伦理学矛盾。一方面,大部分活体动物实验都可能引起动物伤害,另一方面,这些研究,对人类疾病预防、治疗或减轻(症状或痛苦)又是非常有意义。对于如何解决这个矛盾,目前还没有统一认识。本文以非人灵长类(non-humanprimates,NHPs)动物模型在获得免疫缺陷综合征(acquiredim-munodeficiencysyndrome,AIDS)研究中应用为例,研究医学动物实验动物福利关系。Medicalsciencesondiagnosis,treatmentandprophylaxisofhumandiseasesdevelopceaselesslythroughclinicaltrialsandexperiments.Asabasicmethod,animalexperimentsplayimportantroleinmedicalresearch...

  • 标签: 动物实验 动物福利 动物模型应用
  • 简介:[目的]试图建立大鼠自发性乳腺癌产生C型肿瘤病毒瘤株,探讨大鼠自发性乳腺癌病理学形态特点与C型肿瘤病毒形态学结构。[方法]将大鼠乳腺原发性癌用细胞悬液法瘤块法交替传代建立瘤株;大鼠乳腺原发性癌移植癌分别用10%福尔马林液固定,石蜡包埋切片,HEAg染色,光镜观察;分别取大鼠乳腺原发性癌移植癌用2.5%戊二醛与1%锇酸双重固定,Epon812包埋,超薄切片,醋酸双氧铀柠檬酸铅双重染色,透射电镜观察。[结果]大鼠乳腺原发性癌细胞体积较小,直径为10μm,可见小球状结构,乳头状结构,弯曲条索状与肾小球样结构形成典型癌性腺管,Ag染色显示癌细胞由网状纤维分隔成不规则巢状,表明大鼠乳腺癌起源于上皮组织,其组织学类型为大鼠乳腺上皮间变型腺癌。移植癌细胞呈圆型、立方形、多边形,出现瘤巨细胞与苍白细胞等多种形态,排列成巢状、片状、小梁状、乳头状、小球状、癌性腺管裂隙状结构,异形显著。癌细胞形态不规则,细胞核大,核仁增多,胞质中有聚集成束张力原纤维,罕见分泌颗粒,细胞间存在原始腺腔桥粒;在瘤细胞间与胞浆内发现C型肿瘤病毒颗粒,其形态学为球形,直径100nm,外部有囊膜、内膜、中央核心。[结论]...

  • 标签: 乳腺肿瘤 实验性C型肿瘤病毒大鼠 近交系 病理学 瘤株
  • 简介:目的建立泰泽氏病原体(Ty)纯化方法,获得纯菌体供抗原研究,为ELISA诊断抗原制备提供依据;并尝试建立Ty隐性感染血清学抗原检查方法。方法选择特异性抗体包被磁珠,从感染大鼠肝脏中富集纯化Ty;用SDS-PAGEWesternblot技术考察纯化Ty蛋白抗原图谱;同时用免疫磁珠分离技术(IMS)直接检查隐性感染大鼠肠道上皮细胞内Ty。结果用辛酸-硫酸铵纯化Ty单克隆抗体M5以0.5μg/10^7beads以上浓度包被抗IgG抗体预结合磁珠4h,可最大效率地富集Ty;分离反应进行1h,敏感性达到1矿菌体/mL;吖啶黄染色镜检法可以直接、快速地观察到结合于磁珠上细菌;抗原分析表明,IMS较好地去除了肝组织真核细胞成分,纯化TvRJ株具有3个免疫优势抗原成分,相对分子质量(Mr)分别为160×10^3、116×10^3、55×10^3;此外,IMS法可直接从隐性感染大鼠盲肠上皮细胞中检测到少量寄生Ty。结论用IMS技术可有效地富集纯化Ty,并可以作为Ty隐性感染血清学抗原检查候选方法。

  • 标签: 免疫磁珠 泰泽氏病原体 血清学试验
  • 简介:目的探明孕马血清促性腺激素(PMSG)调控哺乳动物生殖生理机制。方法用4IUPMSG分别处理出生第5天、第10天、第15天第21天幼鼠,观察其对卵巢子宫发育影响。结果(1)PMSG处理后,出生第15天幼鼠卵巢指数(33.08%)与对照组(27.16%)间差异显著(P〈0.05);(2)PMSG处理后,第5天、10天第15天幼鼠初级卵泡有腔卵泡相对数量与对照相比无差异,而21d处理组次级卵泡相对数量显著增加;(3)虽然出生后10d前幼鼠子宫对PMSG反应较弱,但是,PMSG对出生后15-21d幼鼠子宫重量指数、子宫肌层子宫内膜层厚度发育具有明显促进作用,而对子宫腺体数量增加无影响。结论PMSG对幼鼠卵巢发育无明显影响;PMSG对出生后第15天前后子宫发挥作用,而且其作用随着出生日龄增加而增强。

  • 标签: PMSG 雌性幼鼠 卵巢 子宫