简介：摘要目的探讨脑源性神经营养因子反义RNA(brain-derived neurotrophic factor-antisense，BDNF-AS)对高糖诱导的肾小管上皮细胞损伤的影响和可能机制。方法体外培养肾小管上皮细胞HK-2，分别转染BDNF-AS小干扰RNA、miR-145-5p模拟物或共转染BDNF-AS小干扰RNA和miR-145-5p抑制剂，之后采用30 mmol/L葡萄糖干预转染后的细胞24 h，用RT-qPCR法检测细胞中BDNF-AS和miR-145-5p的表达，用CCK-8法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡，Western印迹法检测细胞中Bcl-2和Bax蛋白的表达，酶联免疫吸附法检测细胞培养上清中IL-1β和IL-6的水平。用双荧光素酶报告基因实验验证BDNF-AS和miR-145-5p的调控关系。结果高糖处理促进了HK-2细胞中BDNF-AS的表达(P<0.05)，而抑制了miR-145-5p的表达(P<0.05)。干扰BDNF-AS或过表达miR-145-5p降低了高糖诱导的HK-2细胞抑制率、凋亡率及Bax蛋白、IL-1β和IL-6的表达(P<0.05)，促进了Bcl-2蛋白的表达(P<0.05)。干扰miR-145-5p逆转了干扰BDNF-AS对高糖诱导的HK-2细胞增殖、凋亡及IL-1β和IL-6表达的影响。BDNF-AS可靶向结合并负调控miR-145-5p。结论干扰BDNF-AS可能通过靶向负调控miR-145-5p促进高糖诱导的肾小管上皮细胞增殖，并抑制细胞凋亡及炎症因子表达。

简介：摘要目的探讨miR-92a-3p在老年骨质疏松症（osteoporosis，OP）中的表达情况及其在髋部脆性骨折中的诊断价值。方法借助美国国家生物技术信息中心（National Center for Biotechnology Information，NCBI）网站检索与OP、miRNA相关的数据集并进行分析与筛选获得目标miRNA。收集2020年1月至2020年6月期间，从山西医科大学第二医院骨科纳入53例OP患者与24例健康人的血清标本，将OP患者分为发生髋部脆性骨折组（OP_F组，30例）和未发生髋部脆性骨折组（OP_WF组，23例），分析受试者的骨密度与血清中的骨代谢标志物测量：钙、磷、甲状旁腺激素、25-羟基维生素D、骨碱性磷酸酶、血清c末端肽。利用qRT-PCR检测血清标本中目标miRNA的表达水平。χ2检验、t检验、斯皮尔曼等级相关、接收者操作特征曲线（receiver operating characteristic curve，ROC曲线）分析miR-92a-3p表达水平与患者临床特征的潜在关系。结果从NCBI网站中分析得出miR-92a-3p在OP患者中表达较健康人水平升高（t=3.41，P=0.007），miR-1304-5p表达水平降低（t=5.13，P<0.001）。qRT-PCR实验证实以上结果，并进一步发现较OP_WF组，OP_F组中miR-92a-3p表达明显升高（t=3.01，P=0.004），但miR-1304-5p在两组间无明显差异（t=0.71，P=0.480）。OP患者组与健康对照组相比，BMI（t=2.71，P=0.008）、骨密度评分（t=29.02，P<0.001）、钙（t=61.20，P<0.001）、磷（t=2.54，P=0.013）、25-羟基维生素D（t=3.01，P=0.004）、骨碱性磷酸酶（t=12.56，P<0.001）、血清c末端肽（t=7.52，P<0.001）水平差异有统计学意义。OP_F组与OP_WF组相比，骨密度评分（t=2.08，P=0.042）、钙（t=15.75，P<0.001）、骨碱性磷酸酶（t=2.02，P=0.049）、血清c末端肽（t=3.39，P=0.001）的水平差异有统计学意义。骨密度评分、骨碱性磷酸酶浓度与miR-92a-3p的表达有关且分别呈负相关（r=-0.403，P=0.027）与正相关（r=0.416，P=0.022）。ROC曲线下面积为0.723，miR-92a-3p水平对诊断髋部脆性骨折具有潜在意义（P=0.006）。结论miR-92a-3p在OP中高表达，对诊断髋部脆性骨折具有生物学意义。

简介：摘要目的探讨长链非编码RNA(lncRNA) SNHG12靶向微小RNA(miRNA，miR)-199a对肿瘤细胞增殖、侵袭和转移的影响。方法选取新乡医学院第一附属医院2017年9月到2021年9月手术摘除的123例宫颈癌组织和癌旁组织作为研究对象。荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析宫颈癌组织和癌旁组织lncRNA SNHG12和miR-199a表达水平；宫颈癌Hela细胞随机分为lncRNA对照组、SNHG12 KD组，miRNA对照组和miR-199a。细胞计数试剂盒(CCK-8)和体外移植瘤实验分析两组细胞增殖能力；Transwell分析细胞侵袭能力；体内实验分析细胞淋巴结转移数量；荧光素酶基因报告实验检测lncRNA SNHG12和miR-199a的关系。计量资料比较采用t检验。结果癌旁组织lncRNA SNHG12表达水平(1.25±0.19)明显低于宫颈癌组织lncRNA SNHG12表达水平(2.98±0.23)，癌旁组织miR-199a表达水平(1.49±021)明显高于宫颈癌组织miR-199a表达水平(0.46±0.14)，差异有统计学意义(t＝4.001、3.891，P<0.05)。lncRNA对照组细胞48 h吸光度(A)值(1.95±0.24)明显高于SNHG12 KD组细胞48 h A值(1.33±0.17)，miRNA对照组细胞48 h A值(2.18±0.25)明显高于miR-199a组细胞A值(1.44±0.27)，差异有统计学意义(t＝3.891、4.019，P<0.05)。lncRNA对照组细胞成瘤体积[(794.54±88.09) mm3]明显高于SNHG12 KD组细胞成瘤体积[(372.43±34.76) mm3]，差异有统计学意义(t＝5.309，P<0.05)。lncRNA对照组细胞侵袭数量[(109.43±16.98)个]明显高于SNHG12 KD组细胞侵袭数量[(69.44±7.09)个]，差异有统计学意义(t＝8.129，P<0.05)。lncRNA对照组细胞淋巴结转移数量[(12.43±3.09)个]明显高于SNHG12 KD组细胞成瘤体积[(5.09±2.98)个]，差异有统计学意义(t＝2.891，P<0.05)。miR-199a是lncRNA SNHG12是靶点。lncRNA对照组细胞miR-199a表达水平(1.67±0.23)明显低于SNHG12 KD组细胞miR-199a表达水平(3.91±0.31)，差异有统计学意义(t＝4.190，P<0.05)。结论lncRNA SNHG12在宫颈癌组织中呈高表达，通过与miR-199a吸附结合，参与宫颈癌细胞的增殖、侵袭和转移等过程。

简介：摘要目的探讨miR-424对脓毒症并急性呼吸窘迫综合征(ARDS)风险的预测价值及其与ARDS预后的相关性。方法前瞻性研究。收集2020年2月至2021年2月河南省人民医院(郑州大学人民医院)收治的脓毒症患儿(含ARDS)资料，记录患儿ARDS发生情况和ARDS患儿病死率，ARDS患儿根据是否死亡分为存活组和死亡组。采用定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测患儿外周血单个核细胞miR-424的表达。采用Pearson相关分析探讨ARDS患儿miR-424表达与儿童危重症评分(PCIS)、序贯器官衰竭(SOFA)评分、氧合指数(P/F值)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、炎症因子白细胞介素(IL)-6和IL-8等之间的关系。采用多因素Logistic回归分析影响ARDS患儿预后的因素。采用受试者工作特征曲线(ROC)评估miR-424对脓毒症并ARDS早期诊断的准确性，评估miR-424对脓毒症并ARDS组患儿死亡的风险。结果共纳入脓毒症患儿121例，其中并ARDS组36例。脓毒症并ARDS组患儿miR-424表达(0.56±0.17)明显低于脓毒症不并ARDS组(0.98±0.26)(t＝8.776，P<0.001)。脓毒症并ARDS组患儿miR-424表达与IL-6(r＝－0.627，P<0.01)、IL-8(r＝－0.651，P<0.01)及CRP(r＝－0.472，P<0.05)水平均呈负相关；与PCIS评分(r＝0.330，P<0.05)、P/F值(r＝0.592，P<0.001)、白蛋白(r＝0.496，P<0.05)均呈正相关。ROC显示，miR-424[曲线下面积(AUC)＝0.908，95%CI：0.856~0.960]能够区分脓毒症并ARDS患儿和脓毒症不并ARDS患儿。与ARDS存活组相比，ARDS死亡组miR-424明显下降(0.42±0.14比0.63±0.15)(t＝3.890，P<0.05)；miR-424(AUC＝0.845，95%CI：0.696~0.995)降低预示ARDS患儿死亡风险增加。多因素Logistic回归分析显示，miR-424表达(OR＝0.001，P＝0.033 )、白蛋白(OR＝0.553，P＝0.040)为ARDS患儿死亡的独立危险因素。结论miR-424对脓毒症并ARDS患儿的早期诊断和ARDS预后判定有预测价值。

简介：摘要目的观察miR-217对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的肝星状细胞（HSC）活化的影响，观察四氯化碳（CCl4）诱导小鼠中miR-217过表达产生的效果，阐明miR-217在肝纤维化中的作用。方法使用AngⅡ刺激HSC并检测miR-217表达水平的变化情况。将HSC分为对照组、AngⅡ处理组和AngⅡ+miR-217处理组，检测各组中α-平滑肌肌动蛋白，成纤维细胞特异蛋白1和Ⅰ型胶原蛋白（Collagen I）的表达水平。采用TargetScan和双荧光素酶报告基因实验对miR-217的靶基因进行筛选及验证。荧光实时定量PCR和Western blot检测miR-217对转化生长因子β受体Ⅱ（TGFBR2）表达水平的影响。构建CCl4诱导的小鼠肝纤维化模型，Masson染色和天狼星红染色检测过表达miR-217对CCl4小鼠肝纤维化进程的影响。2组数据间的比较采用t检验，多组数据比较采用One-Way ANOVA进行统计分析。结果AngⅡ刺激HSC细胞能下调miR-217的表达水平，转染miR-217 mimics能抑制AngⅡ诱导的α-平滑肌肌动蛋白，成纤维细胞特异蛋白1和Collagen I的表达水平。miR-217能特异性结合TGFBR2的3’-UTR，转染miR-217 mimic能抑制HSC中TGFBR2的mRNA和蛋白表达水平。CCl4小鼠中过表达miR-217能抑制Collagen I和Collagen Ⅲ的表达水平，缓解肝纤维化进程。结论miR-217通过靶向调控TGFBR2调节肝纤维化，抑制AngⅡ诱导的HSC活化，减缓CCl4小鼠的肝纤维化进程，表明miR-217可能具有抑制肝纤维化的功能。

简介：摘要目的探讨环状RNA(circRNA）＿0128846对人非小细胞肺癌（NSCLC）细胞放射抵抗的影响及机制。方法应用GEO数据库筛选、采用荧光实时定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测在人NSCLC细胞A549及其放射抵抗细胞（A549R）中差异表达最显著的circRNA作为目标circRNA，qRT-PCR检测其在人支气管上皮细胞Beas-2B及人NSCLC细胞A549、H460、H1299、H1975中的表达水平。在A549细胞中转染目标circRNA过表达载体，在A549R细胞中转染目标circRNA沉默载体，并检测以上细胞经8 Gy X射线照射后的克隆形成能力。应用人类环状RNA数据库和circinteractome数据库预测目标circRNA下游的miRNA，qRT-PCR检测A549R细胞中目标circRNA沉默后表达水平上升最显著的miRNA作为目标miRNA。qRT-PCR检测A549细胞中过表达目标circRNA后目标miRNA的表达情况；通过双荧光素酶报告基因分析人胚肾细胞293T中过表达目标miRNA后目标circRNA的表达情况；qRT-PCR检测目标miRNA在A549、A549R细胞中的表达水平。在A549细胞中转染目标miRNA抑制剂以沉默目标miRNA，在A549R细胞中转染目标miRNA模拟物以过表达目标miRNA，并检测以上细胞经8 Gy X射线照射后的克隆形成能力；将过表达目标circRNA的A549细胞进行8 Gy X射线照射并在该细胞中过表达目标miRNA，检测细胞的克隆形成能力。组间数据的比较采用独立样本t检验。结果qRT-PCR检测结果显示，circRNA_0128846为目标circRNA，且其在人NSCLC细胞A549、H460、H1299、H1975中的相对表达水平均高于人支气管上皮细胞Beas-2B（t=6.200、7.903、6.010、6.132，均P<0.01）。过表达circRNA_0128846的A549细胞经照射后的克隆形成能力增强（0.22%对0.45%，t=4.427，P<0.05）；沉默circRNA_0128846后A549R细胞经照射后的克隆形成能力降低（0.23%对0.10%，t=3.780，P<0.05）。qRT-PCR检测结果显示，miR-1183为目标miRNA，在A549细胞中过表达circRNA_0128846显著下调miR-1183的表达（t=6.002，P<0.01）；双荧光素酶报告基因分析证实过表达miR-1183可显著下调circRNA_0128846的表达（t=4.562，P<0.05）；miR-1183在A549R细胞中的相对表达水平显著低于亲本A549细胞（t=6.025，P<0.01）。过表达miR-1183显著降低A549R细胞经照射后的克隆形成能力，沉默miR-1183显著增强A549细胞经照射后的克隆形成能力（0.26%对0.15%、0.21%对0.31%，t=3.671、3.293，均P<0.05），且过表达miR-1183显著降低了过表达circRNA_0128846对A549细胞克隆形成能力的促进作用（1.90%对1.20%，t=6.325，P<0.01）。结论circRNA_0128846作为miR-1183的吸附海绵，可抑制miR-1183的表达进而抑制其放疗增敏作用，从而促进人NSCLC细胞的放射抵抗。

简介：摘要目的探讨微小核糖核酸876-5p(micro ribonucleic acid-876-5p, miR-876-5p）通过靶向叉头盒蛋白M1(forkhead box M1，FOXM1）对儿童髓母细胞瘤（medulloblastoma ，MB）细胞增殖的影响。方法收集2018年1月至2020年10月在湖南省儿童医院进行手术治疗的30例MB患儿临床资料，其中男21例，女9例，年龄为（10.42±2.17）岁，范围为5~14岁。通过qPCR检测肿瘤组织和癌旁组织标本中miR-876-5p和FOXM1、TAp73、Beclin1、Livin、Cyclin D1在mRNA水平的表达情况；通过CCK8和Transwell实验观察过表达miR-876-5p后对MB细胞的增殖和侵袭能力的影响；通过qPCR和WB实验检测过表达miR-876-5p前后，FOXM1、TAp73、Beclin1、Livin、Cyclin D1在蛋白或mRNA水平表达的变化。结果miR-876-5p在MB中表达显著降低（P<0.001），过表达miR-876-5p能够显著抑制MB细胞的增殖和侵袭能力（P<0.01）。FOXM1在MB中表达上调，其表达与miR-876-5p呈负相关（r=-0.527，P=0.013 ）。在MB细胞中过表达miR-876-5p能够抑制FOXM1的表达。此外，在MB中，miR-876-5p的表达与TAp73和Beclin1呈正相关（r=0.506，P=0.008；r=0.535，P=0.003），与Livin和Cyclin D1 mRNA呈负相关（r=-0.496，P= 0.011；r=-0.574 ，P=0.005 ）。与之相反，FOXM1的表达与TAp73和Beclin1呈负相关（r=-0.554 ，P=0.007 ；r=-0.497，P=0.016 ），与Livin和Cyclin D1呈正相关（r=0.502，P=0.009 ；r=0.476，P=0. =0.015 ）。此外，miR-876-5p在MB细胞中可以下调Livin和Cyclin D1的表达，上调TAp73在Beclin1的表达。结论miR-876-5p具有抑制MB增殖和侵袭的作用，而FOXM1可能促进MB增殖和侵袭。miR-876-5p可能通过靶向调控FOXM1促进机体内抑癌基因的表达并抑制致癌基因表达，最终抑制MB细胞增殖和侵袭。

简介：摘要目的探讨淫羊藿次苷Ⅱ(ICA Ⅱ)通过调节miR-20b及其下游靶基因的表达，从而改善糖尿病性内皮细胞功能的研究。方法利用人脐静脉内皮细胞(HUVECs)建立高糖联合晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导的糖尿病性内皮细胞功能障碍模型，分为对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)和ICA Ⅱ处理组(DM+ICA Ⅱ组)，检测各组细胞中内皮功能标志蛋白表达和细胞迁移能力的变化，预测miR-20b的潜在靶基因并观察ICA Ⅱ对miR-20b及下游靶基因表达的影响。结果与NC组相比，DM组HUVECs中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、细胞迁移能力和miR-20b表达水平明显下降(P<0.05)，而晚期糖基化终末产物受体(RAGE)、硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)表达水平明显升高(P<0.05)，经ICA Ⅱ处理后，DM+ICA Ⅱ组的上述指标较DM组均得到显著改善(均P<0.05)。与DM组相比，DM+miR-20b激动剂类似物(miR-20b agomir)组中TXNIP基因的表达水平受到抑制(P<0.05)；miR-20b拮抗剂类似物(miR-20b antagomir)组的TXNIP的基因表达较NC组显著升高(P<0.05)，而与miR-20b antagomir组相比，miR-20b antagomir+ICA Ⅱ组中miR-20b的表达显著升高而TXNIP的表达显著下降(P<0.05)。结论ICA Ⅱ可通过miR-20b/TXNIP通路来改善糖尿病性内皮细胞的功能。

简介：摘要目的探讨miR-20b对重型创伤性脑损伤（TBI）小鼠运动功能障碍的影响及其可能机制。方法将60只C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为假手术组、TBI组和TBI+miR-20b激动剂（Agomir-20b）组，每组20只。采用控制性脑皮质损伤法构建重型TBI模型。伤后TBI组尾静脉立刻注射50 μmol/L Agomir阴性对照溶液200 μl，TBI+Agomir-20b组尾静脉立刻注射50 μmol/L Agomir-20b溶液200 μl。伤后3，7 d，采用TUNEL法检测神经元凋亡比例；Western blot检测损伤周围区皮层凋亡相关蛋白［活化的半胱氨酸蛋白酶-3（caspase-3）、活化的多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）及Bcl-2相关X蛋白（Bax）］的表达水平；爬杆试验评估小鼠神经行为学变化；实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测损伤周围区皮层炎症因子［白细胞介素（IL）-1β、IL-6、IL-10、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）、精氨酸酶（Arg）及巨噬细胞甘露糖受体-1（CD206）］mRNA表达水平。结果TUNEL法显示，伤后3，7 d，假手术组小鼠损伤周围区皮层神经元凋亡比例较TBI组及TBI+Agomir-20b组显著减少（P均<0.01）。伤后3，7 d，TBI+Agomir-20b组小鼠损伤周围区皮层神经元凋亡比例较TBI组显著减少（P均<0.01）。Western blot显示，与假手术组相比，TBI组活化的 caspase-3、活化的 PARP及Bax蛋白表达水平在伤后3，7 d显著升高（P均<0.01），Bcl-2蛋白表达水平在伤后3，7 d显著降低（P均<0.01）；而TBI+Agomir-20b组活化的caspase-3、活化的PARP及Bax蛋白表达水平在伤后3，7 d无显著改变（P均>0.05），Bcl-2蛋白表达水平在伤后3 d显著降低（P<0.01），伤后7 d无显著改变（P>0.05）。与TBI+Agomir-20b组相比，TBI组活化的caspase-3、活化的PARP及Bax蛋白在伤后3，7 d显著升高，Bcl-2蛋白表达水平显著降低（P均<0.05或0.01）。爬杆试验显示，伤后3，7 d，TBI组上台时间及步滑比例大于假手术组和TBI+Agomir-20b组（P均<0.01）。RT-qPCR显示，与TBI+Agomir-20b组相比，TBI组IL-1β、IL-6及iNOS mRNA表达水平在伤后3，7 d显著升高（P均<0.01），IL-10、Arg及CD206 mRNA表达水平无显著改变（P均>0.05）。与假手术组相比，TBI+Agomir-20b组IL-1β、IL-6、iNOS及IL-10 mRNA表达水平在伤后3，7 d无显著改变（P均>0.05），Arg mRNA表达水平显著升高（P<0.01），CD206 mRNA表达水平在伤后3 d无显著改变（P>0.05），在伤后7 d显著升高（P<0.01）。结论miR-20b可显著抑制TBI小鼠神经元凋亡，进而改善其运动功能障碍，其机制可能与Agomir-20b抑制TBI后小胶质细胞向促炎的M1型转化有关。

简介：AbstractBackground:Long non-coding RNA (lncRNA) actin filament-associated protein 1 antisense RNA 1 (AFAP1-AS1) functions as a competing endogenous RNA to regulate target genes expression by sponging microRNAs (miRs) to play cancer-promoting roles in cancer stem cells. However, the regulatory mechanism of AFAP1-AS1 in cervical cancer (CC) stem cells is unknown. The present study aimed to provide a new therapeutic target for the clinical treatment of CC.Methods:Hyaluronic acid receptor cluster of differentiation 44 variant exon 6 (CD44v6)(+) CC cells were isolated by flow cytometry (FCM). Small interfering RNAs of AFAP1-AS1 (siAFAP1-AS1) were transfected into the (CD44v6)(+) cells. The levels of AFAP1-AS1 were measured by quantitative real-time PCR (qRT-PCR). Sphere formation assay, cell cycle analysis, and Western blotting were used to detect the effect of siAFAP1-AS1. RNA pull-down and luciferase reporter assay were used to verify the relationship between miR-27b-3p and AFAP1-AS1 or vascular endothelial growth factor (VEGF)-C.Results:CD44v6(+) CC cells had remarkable stemness and a high level of AFAP1-AS1. However, AFAP1-AS1 knockdown with siAFAP1-AS1 suppressed the cell cycle transition of G(1)/S phase and inhibited self-renewal of CD44v6(+) CC cells, the levels of the stemness markers octamer-binding transcription factor 4 (OCT4), osteopontin (OPN), and cluster of differentiation 133 (CD133), and the epithelial-mesenchymal transition (EMT)-related proteins Twist1, matrix metalloprotease (MMP)-9, and VEGF-C. In the mechanism study, miR-27b-3p/VEGF-C signaling was demonstrated to be a key downstream of AFAP1-AS1 in the CD44v6(+) CC cells.Conclusions:LncRNA AFAP1-AS1 knockdown inhibits the CC cell stemness by upregulating miR-27b-3p to suppress VEGF-C.

简介：摘要目的研究miR-451对膀胱癌细胞迁移、侵袭及E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)基因表达的调控作用。方法培养人膀胱癌细胞株T24、5637、SW790并采用荧光定量PCR检测miR-451的表达量；T24细胞随机分为不转染模拟物的对照组、转染NC模拟物的NC组、转染miR-451模拟物的miR-451组，采用荧光定量PCR检测miR-451的相对表达量，采用Western blot检测E-cadherin和Vimentin的相对表达量，采用Transwell检测细胞的迁移、侵袭能力。结果T24细胞中miR-451的相对表达量均低于5637细胞、SW790细胞；在T24细胞中，miR-451组的miR-451相对表达量、E-cadherin相对表达量明显高于对照组、NC组，迁移能力、侵袭能力均明显弱于对照组、NC组，Vimentin相对表达量明显低于对照组、NC组。结论miR-451能够抑制膀胱癌细胞的迁移、侵袭且该抑制作用与增加E-cadherin表达、减少Vimentin表达有关。

简介：摘要目的分析hsa-miR-378a-5p在血府逐瘀胶囊调节内皮细胞血管新生中的表达及作用机制。方法应用Q-PCR方法分析药物对人微血管内皮细胞（HMEC-1）对hsa-miR-378a-5p表达的影响；进而利用4个miR数据库预测其靶基因并取交集，从OMIM数据库中获取血管新生相关基因；利用Cytoscape软件构建“hsa-miR-378a-5p靶点-人类蛋白数据库”、“血管新生相关基因-人类蛋白数据库”蛋白质相互作用网络，分析上述网络的拓扑结构及重合度；对hsa-miR-378a-5p可能影响的血管新生相关基因进行GO功能和KEGG通路注释分析。结果血府逐瘀胶囊可促进HMEC-1中hsa-miR378-5p的表达，该miR可能通过GNAQ、CREB1等靶基因调节VEGF等信号途径参与这一过程。

简介：目的探究微小RNA-29a(miR-29a)靶向调控干扰素诱导跨膜蛋白3(IFITM3)表达对肝癌HepG2细胞生长、增殖和凋亡的影响。方法采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测肝癌细胞HepG2和正常肝细胞株LO2中miR-29a的表达水平;采用脂质体法将miR-29aminmic及阴性对照转染至HepG2细胞,并分为过表达组和对照组,转染48h后用QRCR法检测两组miR-29a水平;采用MTT法和流式细胞术检测各组细胞增殖及凋亡情况;Westernblotting检测各组Bax、caspase-3凋亡相关基因及IFITM3的表达;采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-29a对IFITM3的靶向调控作用。结果肝癌HepG2细胞miR-29a水平低于正常LO2细胞(P﹤0.05);过表达组HepG2细胞miR-29a表达低于对照组(P﹤0.05);过表达组HepG2细胞增殖率低于对照组(P﹤0.05),凋亡率及Bax、caspase-3、IFITM3表达高于对照组(P﹤0.05);miR-29a可显著抑制野生型FITM3-3'UTR质粒转染细胞的荧光素酶活性(P﹤0.05),但其对突变型FITM3-3'UTR质粒转染细胞的荧光素酶活性无显著影响(P﹥0.05)。结论miR-29a在肝癌中表达降低,可靶向调控IFITM3表达,抑制肝癌细胞生长、增殖,并促进其凋亡,可作为肝癌的潜在治疗靶点。

简介：目的探讨miR-185与Apba-1在脑缺血再灌注损伤的表达差异及调控关系。方法将雄性SD大鼠60只随机选择10只为假手术组,其余大鼠给予线栓法构建大脑中动脉梗死再灌注模型,将存活并且按Garcia评分法进行神经功能评分差值≤3分的30只大鼠随机分成3个实验组（术后1d组、3d组、7d组）,每组10只。定量反转录酶-聚合酶链反应检测各组大鼠脑组织miR-185和Apba-1mRNA的表达。蛋白免疫印迹法检测Apba-1蛋白的表达水平。双荧光素酶报告基因实验检测miR-185与Apba-1的调控关系。结果与假手术组比较,miR-185mRNA在各实验组脑组织的表达量明显升高（P〈0.05）,且表达量随再灌注时间延长在各实验组间呈逐渐上升的趋势（P〈0.05）;Apba-1mRNA在各实验组脑组织表达量明显降低（P〈0.05,P〈0.01）;且表达量随再灌注时间延长在各实验组间呈逐渐下降的趋势（P〈0.05）。并且miR-185能直接作用于Apba-1的3＇非翻译区预计靶位点从而调控Apba-1的表达。结论miR-185和Apba-1在脑缺血再灌注损伤后均存在表达差异,且miR-185可负性调控Apba-1的表达。

简介：摘要目的探讨miR－513a－3p靶向鼠双微体基因2(MDM2)对胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法采用脂质体法将miR－NC、miR－513a－3p、anti－miR－NC、anti－miR－513a－3p、si－NC、si－MDM2、miR－513a－3p＋pcDNA3.1和miR－513a－3p＋pcDNA3.1－MDM2转染至BGC－823细胞中，采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT－PCR)检测miR－513a－3p的表达水平，采用Western blot检测cyclin D1、MMP－2、p21、E－cadherin和MDM2蛋白的表达水平，四甲基偶氮唑蓝法检测各组胃癌细胞BGC－823的活性，Transwell法检测各组胃癌细胞BGC－823的迁移和侵袭能力，双荧光素酶报告基因检测实验检测miR－513a－3p与MDM2的靶向关系。结果胃癌细胞BGC－823、MGC－803中miR－513a－3p的表达水平分别为0.21±0.02和0.34±0.03，与胃上皮细胞GES－1(0.76±0.08)比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。培养24、48和72 h后，miR－NC组细胞的吸光度(A)值分别为0.57±0.05、1.03±0.10和1.43±0.14，miR－513a－3p组细胞的A值分别为0.36±0.03、0.48±0.05和0.63±0.06，差异均有统计学意义(均P<0.05)；miR－NC组细胞的迁移和侵袭数分别为(130±11.80)个和(117±10.60)个，miR－513a－3p组细胞分别为(58±5.64)个和(50±5.13)个，差异均有统计学意义(均P<0.05)。培养24、48和72 h后，si－NC组细胞的A值分别为0.53±0.05、0.95±0.10和1.36±0.14，si－MDM2组细胞的A值分别为0.39±0.04、0.57±0.06和0.80±0.08；si－NC组细胞的迁移和侵袭数分别为(141±12.02)个和(109±10.60)个，si－MDM2组的迁移和侵袭数分别为(66±6.67)个和(61±6.18)个，差异均有统计学意义(均P<0.05)。培养24、48和72 h后，miR－513a－3p＋pcDNA3.1组细胞的A值分别为0.34±0.03、0.46±0.05和0.61±0.06，miR－513a－3p＋pcDNA3.1－MDM2组细胞的A值分别为0.48±0.05、0.82±0.08和1.17±0.12，差异均有统计学意义(均P<0.05)；miR－513a－3p＋pcDNA3.1组细胞的迁移和侵袭数分别为(56±5.71)个和(51±5.16)个，miR－513a－3p＋pcDNA3.1－MDM2组分别为(113±10.28)个和(104±10.02)个，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR－513a－3p可抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力，其机制可能与靶向调控MDM2的表达有关，可为胃癌的预防和治疗提供新靶点。

简介：目的探讨miR-1224-5p在胶质瘤中的表达及其对人脑胶质瘤细胞增殖的影响。方法分析中国脑胶质瘤基因组计划（CGGA）数据库中miR-1224-5p在不同级别的胶质瘤组织中的表达数据,并采用原位杂交技术进行组织验证,运用CGGA数据分析miR-1224-5p的表达水平与胶质母细胞瘤患者临床预后的相关性。采用miR-1229-5p寡聚核苷酸转染胶质瘤U251及U87细胞,通过CCK8实验观察上调miR-1224-5p表达后对胶质瘤细胞增殖的影响。结果miR-1224-5p在人脑胶质瘤组织中的表达随着病理分级的升高而降低。胶质母细胞瘤患者中低表达miR-1224-5p提示预后不良。上调miR-1224-5p表达可以抑制胶质瘤细胞的增殖。结论miR-1224-5p与胶质瘤的级别和临床预后相关,miR-1224-5p可以抑制胶质瘤细胞的增殖能力。

简介：摘要目的探讨乳腺浸润性导管癌中CXC趋化因子配体10(CXCL10)与miR-34c-5p的靶向调控关系。方法收集2016年3月至2017年3月在中山大学附属第三医院行手术切除且经病理确诊的乳腺浸润性导管癌组织(n＝56)和乳腺良性组织(n＝14)，采用HTA2.0和miRNA4.0芯片检测CXCL10和miR-34c-5p在两组中的表达并用反转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)进行验证；采用Pearson相关分析两者表达的相关性并用IPA软件预测靶向关系；采用双荧光素酶报告基因系统验证二者的作用靶点，最后在乳腺癌细胞株MCF-7、ZR-75-30中进一步验证。结果基因芯片检测结果显示，CXCL10 mRNA在乳腺浸润性导管癌组织和乳腺良性组织中的表达量分别为7.135±1.350和4.348±0.722，miR-34c-5p mRNA在两组中的表达量分别为1.309(1.001，2.055)和3.948(3.278，4.371)，差异均有统计学意义(t＝7.628，P<0.001；Z＝－4.405，P<0.001)；Pearson相关分析显示，CXCL10 mRNA和miR-34c-5p mRNA的表达呈负相关(r＝－0.327，P＝0.004)。CXCL10 mRNA的表达与乳腺浸润性导管癌患者人表皮生长因子受体-2(t＝2.415，P＝0.019)和Ki-67(t＝2.483，P＝0.016)的表达有关；miR-34c-5p mRNA的表达与乳腺浸润性导管癌患者组织学分级(χ2＝8.626，P＝0.013)和雌激素受体/孕激素受体(Z＝－2.195, P＝0.028)的表达有关。RT-qPCR结果显示，CXCL10 mRNA在乳腺浸润性导管癌组织和乳腺良性组织中的相对表达水平分别为6.059±1.714和1.000±0.232，miR-34c-5p的相对表达水平分别为0.093±0.004和1.000±0.244，差异均有统计学意义(t＝3.484，P＝0.002；t＝5.112，P<0.001)，该结果与芯片检测结果一致。双荧光素酶报告基因结果表明，过表达miR-34c-5p后，在MCF-7细胞中WT-CXCL10和MUT-CXCL10报告载体的荧光素酶活性分别为1.117±0.040和1.647±0.031；在HeLa细胞中，两者的荧光素酶活性分别为0.885±0.051和1.430±0.020，差异均有统计学意义(t＝18.120，P<0.001；t＝24.040，P<0.001)。分别转染miR-34c-5p和miR-NC后，ZR-75-30细胞中CXCL10的相对表达水平分别为0.008±0.000和0.012±0.000；MCF-7细胞中CXCL10的相对表达水平分别为0.315±0.000和0.386±0.004，差异均有统计学意义(t＝20.384，P<0.001；t＝3.473，P＝0.026)。结论miR-34c-5p在乳腺浸润性导管癌中表达下调，而CXCL10表达上调；CXCL10是miR-34c-5p的靶基因。

简介：摘要目的探讨miR-148b-3p对胶质瘤细胞侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法体外培养人胶质瘤U251细胞株，采用Lipofectamine 2000转染试剂将miR-148b-3p模拟物或阴性对照转染至U251细胞，分别记为miR-148b-3p组和阴性对照组，同时设置空白对照组。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测转染效果，Transwell实验检测各组U251细胞的侵袭能力，划痕实验检测各组U251细胞的迁移能力，酶联免疫吸附试验检测细胞上清液中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9的水平，Western blot法检测细胞中Wnt信号通路相关蛋白的表达。结果qRT-PCR显示，miR-148b-3p组U251细胞中miR-148b-3p的表达水平为2.45±0.25，高于阴性对照组(0.97±0.10)和空白对照组(1.00±0.11)，差异均有统计学意义(均P<0.05)。Transwell实验显示，miR-148b-3p组侵袭细胞数为(50.62±5.36)个，与阴性对照组[(108.84±10.14)个]和空白对照组[(113.40±10.06)个]比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。划痕实验结果显示，miR-148b-3p组细胞的迁移率为(23.19±2.50)%，与阴性对照组[(51.81±5.25)%]和空白对照组[(52.06±5.33)%]比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。过表达miR-148b-3p能够抑制MMP-2和MMP-9的表达，下调Wnt1和GSK-3β蛋白的表达。结论miR-148b-3p能够通过抑制Wnt信号通路的激活抑制人胶质瘤U251细胞的侵袭和迁移能力。

简介：摘要目的探讨miR-200c-3p对肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞株增殖与凋亡的调控作用。方法收集2015年1月至2019年8月深圳市儿童医院收治肾母细胞瘤患儿新鲜的瘤组织和瘤旁肾组织30例。实验分为模拟物阴性对照组、miR-200c-3p组及miR-200c-3p抑制剂组。采用实时荧光定量PCR法检测30例配对的肾母细胞瘤肿瘤组织、瘤旁肾组织及肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞和人胚肾293FT细胞系中miR-200c-3p的表达情况。采用细胞计数盒8(CCK-8)细胞增殖实验测定miR-200c-3p抑制SK-NEP-1细胞增殖的效果，流式细胞术检测miR-200c-3p对SK-NEP-1细胞周期及凋亡的影响。裸鼠原位移植实验检测miR-200c-3p过表达对体内成瘤的影响，对瘤体组织进行HE染色并病理形态的观察、免疫组织化学染色检测移植瘤组织中核增殖指数Ki-67的增殖情况；Western blot法检测3组裸鼠移植瘤组织中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)及活性半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)的表达水平。结果30例患儿miR-200c-3p的表达水平在肾母细胞瘤组织(0.420±0.587)中明显低于配对的瘤旁肾组织(1.500±0.504)(t＝8.613，P<0.001)。miR-200c-3p的表达水平在SK-NEP-1细胞中(0.363±0.006)与人胚肾293FT细胞(0.807±0.186)比较也显著下降(t＝4.136，P<0.05)。CCK-8法表明按照组间和时间交互效应miR-200c-3p可抑制SK-NEP-1细胞体外增殖(F＝16.81，P<0.001)。流式细胞术检测肾母细胞瘤细胞周期与凋亡显示，miR-200c-3p能使SK-NEP-1细胞阻滞在G0/G1期及S期(t＝-7.770，P<0.01；t＝11.501，P<0.001)，且促进早期凋亡率增加，晚期凋亡率降低(t＝-22.270，P<0.001；t＝4.612，P<0.01)。裸鼠原位移植实验显示与模拟物阴性对照组比较，miR-200c-3p组肿瘤体积[(2.469±0.914) cm3比(0.419±0.16) cm3]明显缩小(t＝5.407，P<0.001)，而miR-200c-3p抑制剂组[(1.627±0.189) cm3]差异不明显(t＝2.209，P＝0.052)。Western blot实验示miR-200c-3p上调了凋亡蛋白cleaved Caspase-3和Bax的表达水平(t＝-47.000、-82.730，均P<0.001)，但下调了抗凋亡蛋白Bcl-2的表达水平(t＝53.740，P<0.001)。结论miR-200c-3p能抑制SK-NEP-1细胞增殖及促进细胞凋亡，抑制裸鼠移植瘤的生长并起到抑癌基因的作用。

简介：摘要目的研究微RNA-873-5p(miR-873-5p)靶向调控电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)对大鼠癫痫样神经细胞的影响及作用机制。方法通过无镁培养基诱导构建大鼠癫痫样海马神经细胞模型，将大鼠神经细胞分为对照组、模型组、miR-con组及miR-873-5p组。对照组采用正常培养大鼠神经细胞；模型组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞；miR-con组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞并转染miR-con；miR-873-5p组采用低镁细胞外液培养大鼠神经细胞并转染miR-873-5p。采用荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测各组神经细胞miR-873-5p及VDAC1 mRNA表达；采用Western blot技术检测神经细胞中VDAC1、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved caspase-3)含量；采用DCFH-DA荧光探针检测神经细胞活性氧(ROS)水平；采用硫代巴比妥酸法检测神经细胞丙二醛(MDA)含量；采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测神经细胞谷胱甘肽(GSH)含量；采用流式细胞术检测各组神经细胞凋亡情况；采用双荧光素酶报告基因法验证miR-873-5p对VDAC1的靶向调控作用。结果与对照组比较，模型组神经细胞中miR-873-5p表达显著降低(P<0.05)，VDAC1表达显著升高(P<0.05)，Bcl-2表达下调(P<0.05)，Bax及Cleaved caspase-3表达上调(P<0.05)，GSH及MDA含量显著降低(P<0.05)，而ROS水平显著升高(P<0.05)，细胞凋亡率显著升高(P<0.05)；与miR-con组比较，miR-873-5p组神经细胞中Bcl-2表达明显上调(P<0.05)，Bax及Cleaved caspase-3表达明显下调(P<0.05)，GSH及MDA含量显著升高(P<0.05)，ROS水平显著降低(P<0.05)，细胞凋亡率明显降低(P<0.05)；双荧光素酶报告基因实验表明miR-873-5p能抑制VDAC1表达(P<0.05)。结论miR-873-5p能通过负向调控靶基因VDAC1表达而减少神经细胞凋亡，同时还能抑制神经细胞氧化应激反应，对受损神经细胞具有保护作用。