简介:目的:构建具有前列腺癌靶向作用纳米基因载体聚酰氨胺-聚乙二醇-适配体(PAMAM-PEG-A10-3.2),考察靶向载体合成效果,携载基因能力,入细胞机制,体内外靶向等特性。方法:用核磁共振(NMR)鉴定PAMAM-PEG-A10-3.2结构;激光粒度仪测定复合物粒径和zeta电位;透射电镜(TEM)观察纳米复合物形态;竞争性抑制实验用于考察纳米复合物入细胞机制;pEGFP-N2-luc质粒(pDNA)考察纳米复合物体外靶向性;LNCaP裸鼠移植肿瘤小鼠,考察纳米复合物体内靶向性。结果:结果显示,PAMAM-PEG-A10-3.2合成成功,可以包裹NC-miRNA,形成稳定的纳米复合物。TEM见纳米复合物成球形。靶向载体主要通过受体介导内吞入胞。体外基因转染实验显示,靶向纳米复合物可以增加对前列腺癌细胞表面特异性膜抗原(PSMA)高表达细胞(LNCaP)的转染效率,LNCaP裸鼠移植肿瘤小鼠活体成像显示,靶向载体具有良好的前列腺癌靶向性。结论:PAMAM-PEG-A10-3.2对PSMA高表达的前列腺癌细胞具有良好的体内外靶向性。
简介:摘要:核酸适配体(Aptamer)是经由指数富集的配体系统进化技术(SELEX)筛选得到的寡核苷酸单链,其化学本质为ssDNA或RNA。适配体可通过自身独特的空间结构特异性识别靶标分子,且具有高亲和力。与传统蛋白抗体相比,适配体具有免疫原性低、亲和力高、特异性强、易于合成与修饰等优势,因此在生物传感、环境监测、食品安全、临床诊断及分析检测等领域均有广泛应用。随着对适配体的研究逐步深入以及生物传感器的不断优化发展,使得二者的结合有了更广泛的实际应用,特别是在检测分析领域。本文简单介绍了基于核酸适配体的生物传感器用于生物大分子、金属离子和小分子等分析领域的应用现状,着重讲述了比色法、荧光法、拉曼光谱法(SERS)、电化学法等主要检测方法。