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  • 简介:目的:利用TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ—RT—PCR)检测强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞白细胞介素-2受体α(IL-2Rα)mRNA的表达水平,并进行疾病的活动性相关分析。方法:用PrimerExpressv2.0软件,根据GenBank提供的序列,在人IL-2RαmRNA的第2和第3外显子之间设计一对引物和一条TaqMan探针。提取总RNA,加入已优化的一步法FQ—RT—PCR反应体系,扩增产物经凝胶电泳后切胶回收,并与pUCm—T载体连接。制备好的重组质粒转化感受态细胞进行克隆。经测序分析确定为特异性片段后,用T7RNA聚合酶转录为cRNA,作为FQ—RT—PCR系列浓度标准品。评价FQ—RT—PCR检测IL-2RαmRNA的特异性、线性、精密度和探针稳定性等。定量测定HLA—B27阳性活动组与阴性非活动组强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞IL-2RαmRNA基因的表达水平,结合血浆可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)浓度,探讨与炎症活动的相互关系。结果:成功构建了cRNA标准品。该方法的线性范围为7~107cells/ml,其批内CV8.4%,批间CV9.6%;扩增产物克隆的双向测序结果经BLAST比较、分析,证实为IL-2RαmRNA特异性片段。对各30例HLA—B27阳性与阴性的强直性脊柱炎的测定表明:与正常人对照组结果比较,HLA—B27阳性组与HLA—B27阴性组IL-2RαmRNA和sIL-2R都有明显增加(P<0.01)。IL-2RαmRNA对炎症活动评价的灵敏度为96.7%。结论:FQ—RT—PCR具有灵敏、特异、结果重复性好等优点;IL-2RαmRNA与sIL-2R比较更能反映强直性脊柱炎患者的免疫状态,可能为免疫药物的疗效评价和药物筛选提供基因表达水平上的信息。

  • 标签: 实时荧光定量逆转录聚合酶链反应 IL-2RΑ 强直性脊柱炎 TaqMan mRNA检测 应用价值
  • 简介:作为我们早期发表的文章的继续,本文介绍了在不同的实验条件下,将磷酸钠转化成磷酸和氢氧化钠的实验结果。本研究证实,将工业废水中存在的磷酸钠转化成磷酸和氢氧化钠的技术可行性。

  • 标签: 双极性隔膜 磷酸钠 氢氧化钠 工业废水 废水处理方法
  • 简介:当前,我国科研院所改制后的研究与发展(R&D)及产业化能力是社会各方面比较关注的问题。科技部等设立的“科研院所技术开发研究专项资金”则是为继续保持和提高院所R&D持续创新能力的政策措施之一,本文将以该专项科技计划项目的评估分析数据为基础,从院所R&D产业化项目的管理能力、技术支持价值、研发条件、预期成果市场前景及其综合投资价值等方面,对院所R&D及产业化能力进行分析评价。

  • 标签: 项目申报质量 科研院所 R&D 产业化能力 技术开发专项资金 中国