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  • 简介:基因差异表达分析是研究许多生物学过程分子基础一条直接、有效途径。自DDRT-PCR技术建立以来,一系列基于PCR基因差异表达分析技术,如SAGE、SSH、RDA和DNA微阵列等相继发展起来,为分析和克隆差异表达基因提供了更为快速、灵敏工具。本文对这几种方法进行了简要综述,比较了不同方法优缺点,并展望了今后基因差异表达研究技术发展方向。

  • 标签: PCR 基因差异表达 抑制消减杂交 代表性差异分析 DNA微阵列
  • 简介:在维持机体内环境稳态中,循环血液起着关键作用。血液成份变化在疾病诊断与疗效判断中十分重要。因此,采用血清、血浆或全血,是一个涉及临床医疗与科研质量重要问题。WHO于2002年邀请41位专家进行专题研讨,并发表了一个报告,比较详尽地评述了血清、不同抗凝剂制备血浆和全血在常用临床检验中应用,并介绍了各种血标本相关指标的稳定条件。近20年来,许多学者在这一领域已进行了大量工作。虽然我国也有人开始注意这一问题,但还不够重视。例如,血糖测定,WHO推荐使用EDTA抗凝全血,肝素抗凝全血需谨慎应用;但明确指出不宜使用血清,否则测定值偏低。北美与欧洲很少采用血清测定血糖。但我国不少检验医学书籍仍然推荐使用血清,甚至在高等医学院校教材中推荐使用血清(浆)标本,将两者视同相等。产生这些不妥原因,主要与生理学和生物化学教学中长期强调血清是缺乏纤维蛋白原血浆所致。因此,明确血清与血浆重要差别是非常必要

  • 标签: 血液 血浆 血清 临床检验 医学科研
  • 简介:由于原核细胞mRNA3'端不存在ploy(A)结构,因而原核细胞DDRT-PCR引物设计不同于真核细胞。尽管不能根据oligo(dT)设计引物,但利用全基因中高度分散重复短序列或回文序列却能有效克服mRNA分子结构影响,最大限度地扩增全长cDNA;并且这2种引物设计方法还可以提高RNA指纹图谱重复性,降低反应假阳性,从而为原核细胞DDRT-PCR引物设计提供新思路。

  • 标签: 原核细胞 MRNA差异显示技术 引物设计
  • 简介:目的研究肠道组织CFTR基因表达与分泌性腹泻发生关系。方法选取KM小鼠24只,雌雄各半,随机分为3组(每组8只):对照组经小鼠腹腔注射0.2mL生理盐水,实验组小鼠经腹腔注射LPS[6mg/(kg·bw)]分别作用1h、8h,于注射后通过小鼠精神状态、肠道组织形态学判定分泌性腹泻模型建立,利用荧光定量PCR法检测各段肠道组织CFTR基因表达。结果LPS成功诱导小鼠发生了分泌性腹泻;CFTR基因在小鼠十二指肠、空肠、回肠和结肠组织中均有不同表达丰度,以结肠最高,但各段肠道间差异不显著;与对照组相比,LPS上调了十二指肠、空肠和回肠CFTR基因转录,下调了结肠CFTR基因转录。结论提示肠道组织CFTR基因转录水平上调与LPS诱导分泌性腹泻发生密切相关,且在各肠段发挥作用不同,其中空肠在氯离子(Cl-)分泌中发挥主要作用,结肠作用最弱。

  • 标签: CFTR基因 小鼠 肠道 表达 荧光定量PCR
  • 简介:以抗黑星病黄瓜材料HX1为试材,接种黑星病菌(Cladosporiumcucumerinum)2h、8h、20h、32h和72h叶片作为试验方(Tester),相应未接种叶片作为对照方(Driver),利用SSH技术,构建了黑星病菌侵染初期正向和反向cDNA-SSH文库。用巢式引物PCR检测插入片段,获得了200个阳性克隆,通过测序,除去重复序列,共得到105个UniqueESTs,其中50个为singleton,55个为contings。与非冗余蛋白数据库进行BLASTx比对,结果显示,17条ESTs未找到同源序列,88条非重复序列和已知基因同源性较高,占全部ESTs序列83.8%,其中86条ESTs与非冗余蛋白数据库已知功能蛋白具有高度相似性。结合高密度点阵膜杂交差异筛选,阳性率为75.0%。经初步分析这些序列功能,差异表达ESTs功能涉及能量和基础代谢、信号转导、蛋白和核酸代谢、光合作用及逆境中特异表达基因等方面,为研究黄瓜抗黑星病基因提供了依据。

  • 标签: 黄瓜 黑星病 抑制性消减杂交 差异表达
  • 简介:目的:观察出生后小鼠不同部位皮肤毛囊早期发育生长差异及细胞色素C表达分布。方法对新生1~9日龄KM小鼠背部、尾部和触须部皮肤取材,进行HE染色,用二步法免疫组织化学对组织进行细胞色素C进行表达分布检测。结果新生小鼠不同部位皮肤毛囊发育差异很大,这种差异不仅体现在形态差异上,而发育时间差异也十分明显。小鼠出生后背部皮肤和尾部皮肤毛囊发育都经过了一个非线性发育和生长期,过了非线性发育和生长期才开始快速生长,相比较尾部发育略迟于背部。触须部毛囊发育特征和背部尾部差异很大,一出生便可看到较成熟触毛,没有经过稳定期便开始发育。结论通过形态学比较,结合CytC表达分布水平,发现新生小鼠不同部位皮肤毛囊早期发育存在形态和时间上差异

  • 标签: 毛囊 细胞色素C 毛囊发育差异
  • 简介:分离和鉴定不同生物基因差异序列,有助于功能基因分离,揭开物种间进化规律,阐明某些疾病相关基因作用机理。本文简述了几种近年来常用筛选差异基因方法,特别是最新发表杂交监控差异分析法(HMDA)原理、适用范围及其特点,重点探讨了HMDA法在真核基因组差异序列筛选中技术性突破及其研究前景。

  • 标签: 基因组 差异序列 杂交监控差异分析法
  • 简介:目的:中老年冠心病(CHD)患者阻塞性睡眠呼吸暂停综合征(OSAS)发病相关因素分析.方法:将我院2012年4月至2015年5月收治50例CHD患者作为对照组,并同期选取我院收治50例CHD合并OSAS患者作为观察组,对两组患者临床指标情况进行观察分析.结果:观察组患者胆固醇、三酰甘油及空腹血糖值明显高于对照组,并且其SPO2水平明显低于对照组,两组数据差异显著,P值小于0.05.结论:老年冠心病合并阻塞性睡眠呼吸暂停综合发病率较高,临床接诊冠心病患者时应注意观察患者SPO2、胆固醇、三酰甘油、空腹血糖等临床指标,出现异常时,应尽早干预,降低OSAS发生率.

  • 标签: 中老年冠心病 阻塞性睡眠呼吸暂停综合征 发病相关因素
  • 简介:运用AHP分析法分析高职学生顶岗实习综合表现,是目前各个学校力争完善学生综合评价方法。本文就AHP层次分析法最核心点——指标体系建立进行了讨论,提出在运用AHP层次分析法评价高职院校顶岗实习综合效果过程中,由学校、学生、实习单位、指导教师构成综合评价指标体系,完善考评系统

  • 标签: AHP 顶岗实习 校企合作 考核指标体系
  • 简介:以239份大豆品种资源为试材,研究其子粒中全磷和无机磷含量差异表现,分析大豆子粒中磷含量水平,并筛选高全磷、高无机磷资源材料。研究结果表明,供试239份大豆品种子粒中全磷、无机磷含量存在极显著差异;其分布范围分别为全磷6.24~9.56g/kg,无机磷0.12~0.37g/kg;平均含量分别为7.78g/kg,0.20g/kg;无机磷与全磷含量比值为1.39%~4.94%,平均为2.56%。同时,筛选出子粒中高全磷、高无机磷含量大豆品种各5个,其中品种洋黄豆、高家营黑豆、绿75、郭柳条青、大毛角为高全磷材料;品种8012混-1、黄豆、白露快、平顶黄、黑大粒为高无机磷材料;

  • 标签: 大豆 子粒 全磷含量 无机磷
  • 简介:探讨了傅立叶变换近红外光谱技术(FT-NIRS)检测豌豆蛋白质、淀粉、脂肪和总多酚含量可行性。用化学方法测定190份豌豆种质蛋白质、淀粉、脂肪以及总多酚含量,采集其子粒与粉末近红外光谱,采用偏最小二乘法(PLS)分别建立两种光谱与成份含量预测模型。豌豆粉末模型结果优于子粒模型,其中蛋白质和淀粉粉末模型预测残差(RPD)为5.88、5.82,相关系数r2达到0.99、0.99,具有很好预测性能。对其中产地信息详细明确150份豌豆种质品质性状与产地进行两步聚类分析,明确得到3种类型,其特点分别为:类群1低蛋白质含量,类群2高总多酚含量,类群3高蛋白质、高淀粉和高脂肪含量。进一步分析了豌豆品质性状随播种期、经度、纬度、海拔高度变化情况。结果表明,近红外光谱技术可对豌豆种质资源部分品质性状进行快速筛选鉴定,聚类分析结论、地理坐标与播期对豌豆种质主要品质性状影响规律,都可为收集高品质性状豌豆种质资源提供可靠依据。

  • 标签: 豌豆 种质资源 品质性状 傅立叶变换近红外光谱 聚类分析 地理坐标
  • 简介:为了解小麦大面积种植品种和育种骨干亲本遗传差异特点,利用分布于小麦全基因组428个SSR标记对4个大面积种植品种和4个骨干亲本进行了比较分析。结果表明,8个材料间遗传距离变异范围为0.460~1.126,平均0.876,其中骨干亲本间平均遗传距离(0.955)高于大面积种植品种(0.718)。骨干亲本中检测到等位变异数较大面积种植品种高16.4%,前者平均等位变异(2.90)也略高于后者(2.43)。从不同基因组和染色体来看,骨干亲本在A、B和D基因组上及19对染色体(除了2D和6D)平均等位变异均高于大面积种植品种。以上分析表明骨干亲本遗传异质性高于大面积种植品种。进一步比较二者分子差异,发现骨干亲本中有518个特有等位变异(在大面积品种中没有出现),其中Xwmc513和Xbarc59为骨干亲本共有位点,大面积品种中也检测到315个特有等位变异,其中Xp3029、Xwmc235、Xgwm518、Xgdm43、Xbarc146和Xcfd80为共有位点。前人研究表明骨干亲本一些染色体区段传递给了大面积种植品种,在它们形成中发挥了重要作用。本研究发现特异位点可能是遗传研究中除了骨干亲本重要位点之外一些需要重点关注基因组区域,进一步研究有助于解析一个品种是被大面积推广利用或成为骨干亲本形成原因。

  • 标签: 小麦 大面积种植品种 骨干亲本 遗传差异 SSR
  • 简介:目的:探讨老年代谢综合征(MS)患者颈动脉内膜中层厚度(IMT)与血管内皮功能及血管粘附因子-1(VCAM-1)相关性。方法:选取2013年1月~2014年10月我院收治50例MS患者分为老年组(n=25)和中青年组(n=25),又根据IMT分为正常组和增厚组两个亚组。比较老年组和中青年组患者临床资料,采用放射免疫分析法检测所有患者内皮素-1(ET-1)水平,采用分光光度计间接比色法检测一氧化氮(NO)水平,采用ELISA法检测VCAM-1水平,采用超声诊断仪检测IMT。结果:老年MS组和中青年MS组临床资料比较,差异均无统计学意义(均P〉0.05);MS患者IMT增厚组NO水平均低于IMT正常组,而ET-1和VCAM-1水平均高于IMT正常组,比较差异有统计学意义(均P〈0.05)。IMT增厚组间比较,老年MS组NO水平低于中青年MS组,VCAM-1水平高于中青年MS组,比较差异均有统计学意义(P〈0.05);老年MS组和中青年MS组IMT与NO水平呈负相关(r=-0.415,-0.411;P=0.043,0.049),与ET-1和VCAM-1水平呈正相关(r=0.585,0.576;P=0.030,0.036;r=0.547,0.552;P=0.033,0.031)。结论:血管内皮功能障碍和动脉粥样硬化等多重因素促进了MS患者IMT增厚中病理过程发生和发展。

  • 标签: 代谢综合征 颈动脉内膜中层厚度 血管内皮功能 血管粘附因子-1 相关性
  • 简介:目的比较Wistar大鼠及SD大鼠培养星形胶质细胞(AST)对谷氨酸所致细胞肿胀差异。方法利用新生1dWistar大鼠和SD大鼠进行AST原代及传代培养,传代培养10d分别给予1、10mmol/L谷氨酸孵育48h,通过乳酸脱氢酶释放率检测细胞活性,通过胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色、ImageProPlus软件测量细胞周长表示细胞体积变化,通过逆转录实时荧光定量PCR法检测水通道蛋白4(AQP4)mRNA表达变化。结果谷氨酸对不同品种大鼠AST活性影响没有差异(P〉0.05)。在正常情况下,Wistar大鼠AST周长小于SD大鼠,在给予谷氨酸处理后,均明显大于SD大鼠(P〈0.05)。在给予1mmol/L谷氨酸后,Wistar大鼠ASTAQP4mRNA表达明显高于SD大鼠(P〈0.05)。结论Wistar大鼠AST对谷氨酸所致细胞肿胀较SD大鼠明显,且谷氨酸对两品种大鼠AST上AQP4表达变化影响存在差异

  • 标签: 谷氨酸 星形胶质细胞 水通道蛋白4 大鼠
  • 简介:采用营养液培养,对5个不同玉米自交系5种供锌处理营养特性进行研究。结果表明,不同玉米自交系对不同浓度辞反应敏感性不同,最适宜锌浓度为10^-7mol/L,最不适辞浓度是10^-9moL/L;不同浓度锌对玉米自交系生长效应不同,对茎叶生长影响较大,对根生长影响相对较小;SN-11为锌敏感玉米自交系。178、邢K36、昌7—2为锌中度敏感基因型,鲁原92接近锌高效基因型。

  • 标签: 玉米自交系 基因型 锌营养 敏感性
  • 简介:对111份云南改良稻种和77份元阳地方稻种采用程氏指数法进行籼粳分类,比色法测定抗性淀粉、γ-氨基丁酸和总黄酮含量,并用SPSS软件对数据进行统计分析,结果表明:(1)总体抗性淀粉含量籼型〉偏籼〉偏粳〉粳型,γ-氨基丁酸含量则相反,黄酮含量与籼粳分化关系不明显;(2)抗性淀粉、总黄酮含量有色米〉无色米,γ-氨基丁酸含量无色米〉有色米。总体功能性成分含量有色米〉无色米,籼稻〉粳稻,糙米〉精米,地方种〉改良种,有色、籼型糙米功能性成分最高,揭示了籼粳分化和米色与抗性淀粉、γ-氨基丁酸与总黄酮含量关系。

  • 标签: 抗性淀粉 Γ-氨基丁酸 总黄酮 程氏指数 籼粳亚种
  • 简介:以290份遗传多样性丰富玉米自交系为研究材料,探究子粒容重和营养品质关系,对不同杂种优势群玉米子粒容重进行多重比较,筛选各杂种优势群中容重较高自交系。研究结果表明:不同自交系容重差异达到极显著水平,子粒容重与脂肪含量、淀粉含量分别呈极显著、显著正相关关系,与水分含量和赖氨酸含量呈极显著负相关关系,与蛋白质含量呈显著负相关关系。通径分析表明,脂肪含量、淀粉含量、蛋白质含量、赖氨酸含量和水分含量对容重直接作用系数分别为0.2821、0.1289、-0.0558、-0.1825和-0.3376。P群、旅大红骨、唐四平头群与兰卡斯特子粒容重在0.05显著性水平上有统计学意义。另外。瑞德群中高容重自交系包括W222、掖8112等,兰卡斯特中高容重自交系包括w64a、P167、吉63等,P群中高容重自交系包括黄昌b、R136、陕89等。旅大红骨中高容重自交系包括农系5678、L0415、B100等,唐四平头中高容重自交系包括黄昌a、D33A、浚926等。

  • 标签: 玉米 子粒容重 营养品质性状 杂种优势类群
  • 简介:以水稻单株谷重及其氮素反应指数作为耐低氮能力指标,分析不同施氮水平下水稻种质资源耐低氮能力以及单株谷重及其氮素反应指数与其他农艺性状相关关系。结果表明,水稻种质资源耐低氮能力在不同施氮水平间均有较大差异,多数农艺性状表型差异顺序为未施氮〉施低氮〉普通施氮;不同施氮水平间单株谷重、单株草重和穗数差异大于其他农艺性状。在不同施氮水平下,单株谷重与单株草重均呈极显著正相关;单株谷重氮素反应指数与单株谷重、单株草重和谷草比均呈极显著正相关。在未施氮水平下,单株谷重与株高、穗数、穗粒数和单株草重相关性以及单株谷重氮素反应指数与穗数、单株谷重、单株草重和谷草比相关性比施低氮或普通施氮水平更为密切。花峰稻、中作9059、旱稻9号、旱稻502和IRAT359等种质资源表现较迟钝氮素反应,具有较强耐低氮能力。

  • 标签: 水稻 农艺性状 单株谷重 氮素反应指数 耐低氮能力
  • 简介:瘢痕疙瘩是指皮肤损伤后愈合过程中胶原纤维过度增生而形成超出原损害范围皮肤良性肿瘤.耳垂做为好发部位.其治疗目的是消除瘢痕疙瘩,恢复耳垂正常解剖结构,防止复发.目前有效策略为多种治疗方法联合应用,本文对其治疗现状综述如下.

  • 标签: 耳垂 瘢痕疙瘩 联合 治疗