简介：目的：合成新型蛋白转导域PTD4,研究其细胞内穿膜效应及在体组织分布。方法：设计并采用固相合成法合成新型蛋白转导域PTD4,用FAM（羧基荧光素）进行标记,采用高效液相色谱仪（HPLC）和质谱仪测定其纯度与相对分子质量;采用荧光倒置显微镜和激光扫描共聚焦显微镜观察其在细胞内的穿膜情况;采用裸鼠活体成像观察穿膜肽在体内的组织分布及代谢特性,并切片观察各组织器官的分布情况。结果：合成了新型蛋白转导域PTD4,纯度为95.76%,相对分子质量为1776.5;PTD4在体外的穿膜效应有时间与浓度依赖性,约24h代谢完毕,且共聚焦显微镜细胞层扫证实穿膜肽进入胞内;尾静脉注射的PTD4在裸鼠体内可迅速分布于各组织器官,但组织分布不均一,且有时间与浓度依赖性,6h后荧光强度下降了大半,且腹腔注射方法不如尾静脉注射的穿膜效率高。结论：采用Fmoc固相肽合成法可成功合成蛋白转导域PTD4;PTD4能高效穿透细胞膜,穿膜效应呈时间与浓度依赖性;PTD4在体内能迅速分布于各组织细胞。

简介：利用重叠延伸PCR法对扩展青霉碱性脂肪酶(PEL)基因进行体外定点突变,并构建了含突变基因的重组质粒pPIC3.5K-lip-D92P.将该质粒在毕赤酵母GS115菌株中表达.与野生型表达产物PEL-GS相比较,突变体表达产物PEL-D92P-GS最适作用温度为45℃,比野生型提高了5℃;其热稳定性与野生型相当;突变体在40℃下的表达量为109U/mL,约为野生型的29%.结果分析表明,Pro替代Asp92后,可能是由于Pro一级结构的特点,使酶结构更加稳定,在高温下更适于与底物结合.

简介：目的：为进一步的临床试验提供重组人ω-干扰素（rhIFN-ω）的分布和排泄试验数据。方法：用^125I同位素示踪法结合三氯醋酸（TCA）沉淀法测定各主要器官组织的总放射性浓度和酸沉淀部分放射性浓度，获得rhIFN-ω的尿粪排泄和胆汁排泄数据。结果：各主要器官组织的总放射性浓度AUC0-dh排序由大到小依次为：尿、胸腺、胆囊、膀胱、肾、肾上腺、肠内容物、肠淋巴结、空肠、肺脏、血清、卵巢、脾、肝、肌肉、心脏、骨髓／股骨、睾丸、脂肪、脑。皮下注射^125I-rhIFN-ω后48h尿和粪的累计排出量分别达到注入放射量的87．9％±2.8％和4．0％±1．6％，尿粪合计排出量占注入放射性量的91．9％±2．1％，而皮下注射^125I-rhIFN-ω后20h内胆汁排泄放射性量占注入放射性量的3．34％。结论：rhIFN-ω在泌尿系统分布比较高，与血清蛋白结合比较少，在脑、脂肪和肌肉等组织的药物浓度最低。rhIFN-ω主要以尿的形式排泄。

简介：目的：构建GFE-1多吠与重组人肿瘤坏死因子d（rmhTNF一仅）融合蛋白（GFE-1-rmhTNF），研究该融合蛋白的体外活性和体内分布。方法：利用基因工程方法，将人工合成的编码GFE—l的寡核苷酸片段连接在rmhTNF—d序列的3’端，转入大肠杆菌中诱导表达，采用Q—SepharoseFF阴离子层析柱和SP—SepharoseFF阳离子层析柱纯化蛋白，SDS—PAGE和Western印迹鉴定，测定该融合蛋白的体外活性，观察其在小鼠体内的分布情况。结果：构建了融合蛋白GFE-1-rmhTNF，并在大肠杆菌中获得高效表达。体外活性实验显示，GFE-1-rⅢhTNF对L929细胞有明显的杀伤活性；体内分布实验证实，GFE-I-rmhTNF在小鼠肺组织的富集远高于肝肾组织。结论：构建了融合蛋白GFE-1-rmhTNF．，可显著杀伤L929细胞并特异性富集于小鼠肺组织。

简介：在真核生物的基因中，mRNA选择性剪接现象十分普遍。mRNA选择性剪接导致一个基因多转录本的产生，被认为是高等生物增加蛋白质多样性的主要机制，且已发现与许多人类疾病密切相关。发现这些转录本的选择性剪接位点、新的外显子和外显子组合，乃至获得这些剪接变异体的完整克隆，对于基因功能的深入研究十分必要。简要介绍了几种在mRNA水平探索选择性剪接的方法。

简介：急性闭合性跟腱损伤是临床上一种较常见的运动创伤,据文献统计,跟腱损伤的发病率为0.18‰,而且在逐渐上升。然而在运动过程中,特别是剧烈弹跳的一瞬间,跟腱容易发生断裂。跟腱损伤后病人需长周期的治疗,以此给社会带来了巨大的经济损失和自身健康并发症。因此,跟腱损伤的治疗和康复显得尤为重要。很多学者已经做出了有益的探索,也取得了显著的成果,但总的来说方法很多,问题却没有得到解决,对闭合性跟腱断裂尚未形成一套明确有效的治疗方案。本文就急性闭合性跟腱断裂治疗的有关研究进展作以下综述,以期待对临床实践有所帮助。

简介：作为一种具有靶向性的生物大分子,单克隆抗体始终是人们关注的热点之一,被广泛用于治疗肿瘤、病毒感染和抗移植排斥等.但鼠源单克隆抗体的临床应用受限于诱导产生人抗鼠抗体、肿瘤渗入量低、亲和力低和半衰期短等.随着分子生物学技术的发展及其向各学科的渗透,通过基因操作技术对抗体进行改造,可使其适用于多种疾病的治疗.抗体人源化已经成为治疗性抗体的发展趋势,同时各种抗体衍生物也不断涌现,它们从不同角度克服了抗体本身的应用局限,也为治疗人类疾病提供了利器.本文简要介绍上述技术的基本原理、特点和治疗性抗体的研究进展.

简介：随着时代的进步,社会的发展,人们的生活水平越来越高,近几年来,我国的科学技术水平在不断提升,国家的经济状况有了新貌,人们的生活水平也在不断提高,同时,对身心健康的要求标准也在改变,在家庭中,每一个家庭成员都是一个家庭的核心,家人也都非常重视他们的健康.因此,医护研究人员要更加深入地研究医学护理,目前,酒精性肝病的临床护理的过程中产生的安全问题逐渐增多,这些问题由很多的因素造成,也给医院以及患者和患者家属带来许多难题.所以,在酒精性肝病的临床护理工作中,我们一定要找出影响护理安全的因素,采取一切有效措施来解决这些问题,也能有效地避免许多不必要的护理纠纷,提高医院的社会信誉度,加快患者的恢复进程.本文就影响酒精性肝病的临床护理安全的因素进行了简要的阐述,并且对此提出了相应的解决措施,希望对有效防护酒精性肝病的护理工作中安全问题能够有所帮助.

简介：在总结对流性天气特征的基础上,针对对流性天气的影响因子进行了分析,其中主要有对流不稳定,水汽条件,垂直抬升运动,500hPa高度槽,切变线,地面锋,地形抬升作用等等,而对流性天气的发生必须满足的一般条件就是:水汽条件,不稳定条件,抬升运动条件。在前人对对流性天气的研究中,都各自用了不用的分析方法(包括合成分析,统计分析,趋势分析),从不同的角度,不同层面解释了对流性天气促发机制。文章描述了对流性天气发生的背景、对流性天气的诊断、雷达资料在对流性天气监测与预报方面的应用及对流性天气预报的发展。

简介：目的:分析探讨超声造影在肝脏局灶性结节中的应用价值,为以后的临床诊断提供可靠性参考。方法:回顾性分析2011.10-2013.9期间来我院门诊以及住院的40例经病理证实为肝脏局灶性结节患者的超声造影表现,通过二维灰阶超声检查,40名患者共发现50个结节。患者先后进行肝脏超声造影检查及超声引导下经皮肝穿刺活检术。总结病例之间的相关关系以及造影表现的特殊性与一般性。结果:超声造影对肝脏良恶性病灶的诊断能力很好,对结节的敏感性85.8%,特异性99%、阳性预测值95%,阴性预测值96%,准确率95%。结论:肝脏局灶性结节的超声造影诊断有助于临床上判定局灶性结节良恶性,可以为临床提供更好的诊断依据,但是,由于许多假阳性的原因,故对于某些缺乏特异性的超声造影表现,需要其他方法或是穿刺活检进行辅助检查。

简介：运动产生的应力刺激在经过力学偶联、生化偶联、信号的传递后到达骨效应细胞,引发骨重建对骨骼的调控,而这种调控的结果依据运动的方式、强度和部位的不同表现出不同骨密度的变化.骨重建是骨吸收作用和成骨作用相互协同的结果,其主要受成骨细胞和破骨细胞的调控.

简介：随着食品安全事故的接连出现,食品的安全检测越来越受到社会的关注。本文则以食品检验准确性的控制因素为研究课题,分别从检验过程、仪器、环境、人员等方面对食品检验准确性的控制因素进行了重点分析,旨在为食品检验提供一定的参考。

简介：外温动物俗称冷血动物,一般情况而言是指鱼类、两栖类和爬行类动物的统称。通过对其活动节律的研究能起到更好的认识、保护和利用的作用。本文通过简单介绍各种情况和不同种类的研究方法,以及国内外相关研究的举例举,对以后的相关研究的实验方法提供相关选择和帮助。

简介：新的课程标准当中明确提出了'生物课程最重要的不是让学生多记住一个细胞结构,而是知道科学家如何解决现实生活中的问题,这将是学生终身受益的。'显然,按照过去'以教学为主,学生被动学习'的教学方法,是无法根本实现这样的教学目标的。随着新课程改革的推进,'科学探究'一词出现的频率几乎是最高的,倡导探究性学习,培养科学思维的品质对人的终身发展至关重要。因此,改变学生的学习方式,探究性学习是实现学习方式突破的主要途径。

简介：抑制性消减杂交(SSH)是抑制PCR与消减杂交技术相结合，能对未知序列差异表达基因克隆的一种方法。该方法具有速度快、效率高、假阳性率低、目的序列富集程度高、实验结果复杂程度低等特点。本文主要介绍其基本原理、操作过程、优缺点、在生物基因克隆中的应用，并对其应用前景进行了分析。

简介：目的：选择发酵系统中各可控因素的最佳水平组合，从而减少各种干扰的影响，以获得稳健的赖氨酸产量。方法：利用田口法的内外表与Box性能规则优化赖氨酸发酵条件。结果：通过实验得知，转速、硫酸铵和葡萄糖浓度对发酵影响较大；结果稳定的最优发酵条件为初始葡萄糖浓度为80g/L、硫酸铵浓度为42g/L、转速为225r/min、初始pH值为6.7、接种量为8%。经实验验证，最优化发酵条件是低灵敏度的，最优目标值比较稳健。在10L自动发酵罐上培养65h，L-赖氨酸盐酸盐的产量为165.68g/L，比优化前提高了12.4%。结论：基于稳健性设计所得的最优发酵条件参数，可使目的产物产量稳定，便于生产操作。

简介：新一轮国家基础教育课程改革犹如春风扑面而来,在课堂上教师指导学生进行的各种探究活动,使课堂气氛显得面貌一新,这对学生能力的提升是否有效？如何提高课堂探究活动的有效性？笔者在此谈一下个人的看法.

简介：虽然临床和实验研究已经证实阻塞性黄疸与败血症密切相关,但至今其机制尚未完全阐明。阻塞性黄疸最重要的病理基础是肠黏膜屏障损伤导致的内毒素血症。近年来研究表明,主要影响因素与细胞紧密连接蛋白及其磷酸化有密切相关。

简介：肿瘤转移抑制因子是只能抑制自发以及大体上可见的肿瘤转移,而对原发肿瘤无影响的一类基因.目前研究发现肿瘤转移抑制因子1（metastasissuppressor1,MTSS1）基因在乳腺癌的发生与发展过程中发挥重要作用.但MTSS1在乳腺癌的发生发展中的作用机制研究还不是十分清楚,还需继续深入的研究.

简介：肠道微生态作为机体最重要的微生态系统，与糖尿病、肥胖症、肿瘤、肠易激综合征等疾病密切相关，但肠息肉的发生与肠道微生态的相关性研究较少。我们通过对年龄、饮食、肥胖等因素的分析，揭示肠道微生态与肠息肉发生的相关性，冀望有助于提高肠息肉的早期诊断率，降低肠癌的发生率。