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  • 简介:目的探讨miR-134、CREB、pCREB癫痫大鼠海马及难治性癫痫患者颞叶脑组织表达及意义。方法难治性癫痫患者及非癫痫对照组颞叶组织、氯化锂-匹罗卡品癫痫大鼠及空白对照组海马组织,应用实时荧光定量PCR技术检测microRNA-134(miR-134)表达,用Westernblot方法检测CREB及pCREB表达,用免疫组织化学方法检测人脑颞叶皮质及大鼠海马区CREB、pCREB表达。结果与对照组相比miR-134表达难治性癫痫患者明显降低(P〈0.05),癫痫模型组中点燃后3、7、14、60d明显降低(P〈0.05),1d与30d表达降低较对照组差异无显著性(P〉0.05);癫痫模型组CREB3、7、14、60d时间点明显升高(P〈0.05)、pCREB各时间点表达均高于空白对照组(P〈0.05)。结论难治性癫痫患者颞叶皮质及癫痫动物海马miR-134表达下降,CREB、pCREB表达升高,提示可能在癫痫发生发展机制起重要作用。

  • 标签: miR-134 CREB PCREB 难治性癫痫 突触重塑
  • 简介:实蝇类害虫严重危害多种水果蔬菜,世界果蔬产业最重要害虫类群之,严重影响了发生地果蔬生产出口贸易活动。昆虫不育技术(SIT)种物种特异环境友好型防治措施,多种实蝇类害虫防治、阻截根除到了不可替代重要作用。通过分子生物学技术昆虫基因组进行遗传修饰,可对SIT进行改进,提高防控效果并扩大应用物种范围,近年来相关方面的研究已取得重要进展,成为害虫遗传控制研究热点。本文阐述了通过受四环素调控tet—off基因表达系统来实现昆虫“不育”基本原理和在果蝇及其他几种主要实蝇类害虫建立不同类型遗传控制体系,以及类似体系在其他农业昆虫应用情况。简要介绍了橘小实蝇遗传控制技术体系构建方面的工作进展,并该技术害虫综合治理(IPM)尤其实蝇类害虫防治应用前景进行了讨论展望。

  • 标签: 遗传控制 实蝇 昆虫不育技术 tet—off基因表达系统 致死品系
  • 简介:为探讨肿瘤转移发生分子生物学机制奠定基础,通过使用抑制消减杂交技术从新本、转移表型不同的人肺巨细胞癌细胞株中分离转移抑制相关基因可核苷酸片段。结果获得5个低转移肺巨细胞癌中高表达、均与已知的人类基因片段有很高同源性核苷酸片段,它们可能在维持肿瘤细胞自身稳定防止转移起重要作用。

  • 标签: 抑制消减杂交技术 肿瘤转移抑制基因 差异表达
  • 简介:目的研究Müller细胞大鼠视网膜绿光损伤模型激活反应。方法72出生后8周(约230~280g)成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分9组。组作为正常对照,另8组暗适应24h后置于波长为(530±10)nmLED灯光箱照射3h,并分别暗恢复3、6、12h及1、2、3、7、15d取眼球,光学显微镜下观察同定位处视网膜组织形态、检测(TUNEL)凋亡细胞、免疫组织化学染色及蛋白免疫印迹分析。结果光损伤后光感受器内外节变短,外核层变薄,细胞排列紊乱;细胞凋亡出现在外核层,暗恢复3h出现,3d达到高峰,7d消失;胶质细胞纤维酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein,GFAP)表达量暗恢复12h开始升高,随暗恢复时间延长逐渐升高;谷氨酰胺合成酶(glutaminesynthetase,GS)总表达量未见明显改变,但可见蛋白过性重分布,表达部位由内核层移至外核层。pSTAT3蛋白表达量损伤后12h出现过性升高。结论绿光损伤视网膜激活Müller细胞,pSTAT3可能参与了此激活过程。

  • 标签: 视网膜 光损伤 MÜLLER细胞 磷酸化信号转导激活子-3
  • 简介:目的(1)建立RT-PCR方法,定性测定SIV感染猴血浆病毒RNA,比较传统血浆病毒分离方法敏感性;(2)建立DNA-PCR方法,检测SIV感染猴外周血淋巴细胞(PBMCs)前病毒DNA.(3)检验DNA-PCRRNA-PCR方法猴SAIDS模型应用实用性可操作性.方法用SIVmac251静脉感染恒河猴,定期采血,血浆中提取病毒RNA,以RNA为模板通过RT-PCR法扩增,凝胶电泳定性;感染猴PBMC中提取带有整合SIV前病毒DNA细胞基因组DNA,巢式PCR扩增,凝胶电泳定性.结果DNA-PCRRNA-PCR经两轮扩增后均得到长度为477bp特异条带,测序鉴定确为目的片段.9实验猴感染SIV后7d,RNA-PCR结果为7/9阳性,DNA-PCR结果为100%阳性,而血浆病毒分离只有5/9阳性;此后直到感染后42d,RNA-PCRDNA-PCR结果直为100%阳性,而血浆病毒分离阳性率感染后35d下降到4/9,到42d时下降为零.结论PCR方法比病毒分离方法敏感性高.尤其DNA-PCR,既可检测具有活跃病毒复制受感染细胞,又可检测那些携带病毒处于转录休眠期细胞,所以感染早期中后期--血浆病毒水平较低情况下或病毒处于潜伏感染阶段,它作为猴艾滋病(SAIDS)模型病毒学指标之必要性重要性.这个指标的检测方法应该是较血浆病毒RNA检测更为敏感.

  • 标签: 猴免疫缺陷病毒(SIV) RT-PCR 巢式PCR 外周血淋巴细胞(PBMCs) 病毒分离
  • 简介:【背景】我国,苹果绵蚜苹果寄主危害日益严重,发生面积不断扩大,而品种抗性害虫治理种重要手段。【方法12007—2009年山东莱阳地区系统调查了苹果绵蚜不同寄主果园发生动态规律,比较了不同寄主苹果绵蚜抗性差异。【结果】苹果绵蚜红富士、乔纳金、新红星苹果园西府海棠果园1a有2个发生高峰,5月底到7月下旬第1个高峰,也是全年发生最高峰,9月初到10月底全年发生第2个高峰,而7月底到8月底苹果绵蚜发生低谷期。苹果绵蚜红富士苹果上发生数量显著高于乔纳金、新红星苹果西府海棠上发生数量。3a调查时间内,苹果绵蚜红富士、乔纳金、新红星苹果上每次平均发生量分别为153.2、31.6、30.3头·株^-1。越冬前调查表明,苹果绵蚜对红富士为害率显著高于青香蕉、乔纳金、新红星小国光,小国光被害率以及虫落数量最低。【结论与意义】红富士苹果绵蚜感虫品种,而小国光、乔纳金和新红星相对抗虫。文中讨论了苹果绵蚜抗性品种筛选方法,为掌握不同寄主苹果绵蚜抗性差异以及制定苹果绵蚜抗性治理策略提供了依据。

  • 标签: 苹果绵蚜 种群动态 品种抗性
  • 简介:目的:探讨PICC重度颅脑损伤患者临床应用及护理.方法:回顾性总结2012年9月至2014年3月我科46例重症患者应用PICC临床护理方法.结果:46例患者,穿刺部位渗血1例,穿刺点感染2例,导管部分脱出1例,导管堵塞1例.并发症总计11%.结论:PICC很好地避免了常规操作造成了反复穿刺,极大地减轻了患者穿刺痛苦,神经外科重症患者理想静脉通路,值得推广应用.

  • 标签: PICC 重度颅脑损伤 临床应用
  • 简介:目的:研究高压氧在心脑复苏早期应用,主要是使已恢复心跳、呼吸、血压生命体征稳定,提高治疗效果,挽救生命。方法:采用空气加压舱加压,戴面罩吸纯氧,治疗压力为2.5ATA,稳压吸纯氧30分钟,改吸舱内空气10分钟,再吸纯氧30分钟,减压20分钟,每日次,10次为疗程。结果:高压氧治疗心脑复苏种有效方法,疗效效果理想,安全可靠,值得推广。结论:心脑复苏患者应用高压氧治疗可以改善脑缺氧,甚至可以降低致残率,提高生活质量,为心脑复苏治疗开辟了新有效途径。

  • 标签: 高压氧 复苏术 脑缺氧
  • 简介:培养造就高素质创造性人才,实施'科教兴国'战略项重大举措。随着现代教育飞速发展,'应试教育'弊端已为社会所深刻认识,加强素质教育已成为教育领域共识。中学各门课程,物理学提高学生科学素质方面起着无可替代作用。本文就'物理学素质教育地位与作用'问题谈点粗浅看法。

  • 标签: 素质教育 科学素质 创新 物理教育
  • 简介:肿瘤坏死因子(TNF)种应用广泛及疗效肯定抗肿瘤细胞因子。目前基因重组TNF主要以大肠杆菌为宿主进行发酵生产,由于大肠杆菌自身含有毒蛋白,表达重组TNF如不经严格分离纯化,临床应用毒副反应明显。此外,大肠杆菌生长需要较贵重有机物生化制剂,从而使大肠杆菌表达重组TNF纯化工艺复杂、成本较高。蓝藻光合自养生物,结合简单、生长迅速、适应性强、易于进行遗传操作,且多数不含毒蛋白。利用蓝藻为宿主,进行重组TNF生产,具有减低生产成

  • 标签: 鱼腥藻7120 肿瘤坏死因子 穿梭表达载体 医学实验中心 人肿瘤 大肠杆菌表达
  • 简介:目的(1)建立RT-PCR方法,定性测定SIV感染猴血浆病毒RNA,比较传统血浆病毒分离方法敏感性;(2)建立DNA-PCR方法,检测SIV感染猴外周血淋巴细胞(PBMCs)前病毒DNA。(3)检验DNA.PCRRNA-PCR方法猴SAIDS模型应用实用性可操作性。方法用SIVmac251静脉感染恒河猴,定期采血,血浆中提取病毒RNA,以RNA为模板通过RT-PCR法扩增,凝胶电泳定性;感染猴PBMC中提取带有整合SIC前病毒DNA细胞基因组DNA,巢式PCR扩增,凝胶电泳定性。结果DNA-PCRRNA-PCR经两轮扩增后均得到长度为477bp特异条带,测序鉴定确为目的片段。9实验猴感染SIV后7d,RNA-PCR结果为7/9阳性,DNA-PCR结果为100%阳性,而血浆病毒分离只有5/9阳性;此后直到感染后42d,RNA-PCRDNA-PCR结果直为100%阳性,而血浆病毒分离阳性率感染后35d下降到4/9,到42d时下降为零。结论PCR方法比病毒分离方法敏感性高。尤其DNA-PCR,既可检测具有活跃病毒复制受感染细胞,又可检测那些携带病毒处于转录休眠期细胞,所以感染早期中后期——血浆病毒水平较低情况下或病毒处于潜伏感染阶段。它作为猴艾滋病(SAIDS)模型病毒学指标之必要性重要性。这个指标的检测方法应该是较血浆病毒RNA检测更为敏感。

  • 标签: 猴免疫缺陷病毒 PCR技术 RT-PCR方法 外周血淋巴细胞 RT-PCR法 病毒DNA
  • 简介:目的:分析同源异型盒基因B7(HomeoboxB7,HOXB7)人胃癌组织表达情况,并探讨HOXB7表达与胃癌患者临床病理特征预后关系。方法:收集行手术切除胃癌组织及对应癌旁组织共120例,采用实时定量PCR(qRT—PCR)技术、蛋白印迹(Westernblot)免疫组化染色分别检测HOXB7mRNA水平及蛋白水平胃癌及对应癌旁组织表达,通过卡方检验分析HOXB7表达水平与胃癌患者临床病理因素间相关性,采用单因素及多因素Cox回归模型评估HOXB7胃癌风险评估作用,Kaplan-Meier生存曲线分析HOXB7表达水平与胃癌患者无瘤生存期总生存期关系。结果:胃癌组织HOXB7mRNA蛋白表达水平均显著高于对应癌旁组织(P〈0.05);HOXB7蛋白表达与肿瘤临床分期、浸润深度及淋巴结转移均具有显著相关性(P〈0.05),而与患者性别、年龄、分化程度及远处转移均无显著相关性(P〉0.05)。单因素多因素Cox分析提示HOXB7可以作为评估胃癌患者预后独立风险因素。Kaplan-Meier生存分析结果显示高表达HOXB7胃癌患者无瘤生存时间总生存时间均显著低于HOXB7低表达患者组(P〈0.01)。结论:HOXB7蛋白胃癌组织中高表达,并与胃癌恶性表型有关,可能参与胃癌发生及恶性进展过程,可作为判断胃癌患预后重要参考指标。

  • 标签: 胃癌 HOXB7 临床意义 预后
  • 简介:锌指核酸酶、类转录激活因子式核酸酶CRISPR/Cas技术近几年发展起来3种主要基因组编辑技术,原理都是通过在生物基因组特定位点制造DNA双链断裂损伤,从而激活机体自身DNA损伤修复机制,在此过程引发各种变异。基因组编辑技术已在研究基因功能基因修复成功应用,基于基因组编辑技术诸多优点,CRISPR/Cas技术能对基因组多个特定位点进行编辑。有望成为昆虫遗传转化主要策略。本文就锌指核酸酶、类转录激活因子式核酸酶CRISPR/Cas技术基本原理及其昆虫应用做简介,为今后利用基因组编辑技术进行昆虫遗传转化提供些许参考。

  • 标签: CRISPR/Cas技术 遗传转化技术 基因组编辑 类转录激活因子式核酸酶技术 锌指核酸酶技术
  • 简介:目的初步探讨TOLL样受体下游重要信号因子TRIF与肝纤维化发生发展病理机制关系。方法以四氯化碳皮下注射+低蛋白高脂饮食+酒精饮料方法复制大鼠肝纤维化模型。将SD大鼠随机分成正常对照组模型组,完成制备模型实验后进行取材。部分实验鼠进行心脏生理盐水多聚甲醛灌注后,取肝脏组织制备石蜡切片,进行常规HE染色免疫组化实验;另部分实验鼠脱颈安乐死后,取新鲜肝组织进行电镜标本制备WesternBlot实验检测。结果HE染色结果显示与而正常对照组大鼠相比,模型组大鼠肝小叶结构明显破坏,肝细胞数量明显减少肝纤维化程度特点明显;电镜结果显示,肝纤维化组可见大量胶原纤维沉积现象,胞质可见明显溶解现象,狄氏腔内,肝星状细胞细胞核溶解,血窦内皮细胞胞质、胞核皆溶解;免疫组化模型组大鼠肝组织均显示内皮细胞、星形细胞TRIF都有强烈高表达,并且以胞核表达为主,亦见胞质表达,而正常组呈现弱阳性表达;与正常对照组相比,模型组大鼠肝组织TRIF蛋白表达都明显升高,呈显著性差异(P〈0.01),与形态学表达特点相致。结论TRIF肝纤维化中表达显著增强,说明肝纤维化过程,TOLL样受体明显激活,并且通过下游信号转导途径,机体内产生系列免疫应答反应。通过该现象观察,我们初步证实了TOLL样受体固有免疫信号因子TRIF纤维化形成起着重要作用。

  • 标签: 肝纤维化 固有免疫 TOLL-LIKE RECEPTORS TRIF
  • 简介:随着时代发展,科技进步,各种高科技产品层出不穷。现代社会,教育越来越信息化,信息技术逐步在教学得到广泛应用。现代信息技术又具有形象性,主观性,直观性这些特点,而高中地理教学课堂充满了丰富时空变化与各种各样的人文风光,运用信息技术,给高中地理课堂带来了趣味与活力。而如何有效运用信息技术个需要深入探讨的话题。本文就信息技术高中地理教学应有作简要探究。

  • 标签: 信息技术 地理 教学 应有
  • 简介:中国药用植物研究运用到很多技术,但其中生物技术发挥了主要功能,中药现代发展过程提供了重要机遇。因此结合生物技术中国药用植物研究应用,提出该领域研究重点,并结合分析了应用前景。

  • 标签: 生物技术 药用植物
  • 简介:目的寻找最短时间内能为假丝酵母菌鉴定提供最多信息简易培养方法。方法个平板内用分区划线法、多点接种法及小培养标本进行培养,分离假丝酵母菌。结果个平板内同时使用三种方法接种培养。可从分区划线法、多点接种法观察到菌落全貌(颜色、质地、形态)、种类、数量及生长特性。可用显微镜从小培养中看到假丝酵母菌孢子菌丝结构。结论由于假丝酵母菌种类繁多导致假丝酵母菌临床感染表现不同,临床诊断治疗很大程度上依赖于实验室检查结果,因此寻找快速有效鉴定方法至关重要。个平板内同时用三种方法接种标本进行培养,可大大提高假丝酵母菌检出率及鉴定效率,并能判定分离出假丝酵母菌目的菌株还是污染菌。

  • 标签: 假丝酵母菌 分区划线法 多点接种法 小培养 鉴定效率
  • 简介:废水、废气、固体废弃物处理及环境监测环境修复几个方面介绍了生物技术环境污染治理环境保护应用与研究进展,分析了生物处理工艺特点及优势,预言了环境生物技术今后发展方向前景。

  • 标签: 生物技术 环境保护 应用 研究 概况
  • 简介:颗粒剂灌装制药生产中关键环内容,设计采取科学合理灌装方式可以更好地提高制药生产水平和效率.本文就对于制药生产中颗粒剂灌装相关问题进行了分析与探讨.

  • 标签: 制药生产 颗粒剂 灌装方式
  • 简介:目的:研究右美托咪定对开胸手术单肺通气患者术血流动力学炎性因子影响。方法:选取我院收治行开胸手术单肺通气患者50例,通过随机数表法,平均分为对照组(n=25)实验组(n=25),对照组采取常规麻醉,实验组常规麻醉增加Dex静脉注射。记录2组平均动脉压血流动力学指标心率,对比进入手术时刻(T1),注射右美托咪定15分钟时刻(T2)、气管插管后时刻(T3)、切皮时刻(T4)、单肺通气时刻(T5)术毕时刻(T6)生命体征,对比T1、T5、T6、T7外周血TNF-α、IL-6表达水平。结果:对照组血流动力学指标T1T6刻与实验组相近,差异无统计学意义(p〉0.05);对照组T2、T3、T4、T5四个时刻显著高于实验组,差异有统计学意义(p〈0.05);对照组TNF-α水平T1刻为(33.6±0.7),而实验组为(33.4±0.8),差异无统计学意义(t=0.941,P=0.352);实验组T5、T6T7TNF-α水平均低于对照组,差异有统计学意义(p〈0.05);对照组IL-6水平T1刻为(8.7±0.6),而实验组为(8.8±0.6),差异无统计学意义(t=0.589,P=0.558);实验组IL-6水T5刻、T6刻、T7刻显著高于实验组,差异有统计学意义(p〈0.05)。结论:右美托咪定不仅可以改善术中和术后血流状况,同时还可以抑制炎症因子,机体产生保护作用。

  • 标签: 右美托咪定 开胸手术 单肺通气 炎症因子