简介:目的探讨肺癌细胞核的有关体视学参数在肺癌诊断分型方面的意义.方法收集肺癌外科手术切除标本70例及肺癌患者自身正常组织8例,分为鳞癌组(a)、腺癌组(b)、腺鳞癌组(c)、小细胞癌组(d)、大细胞癌组(e)及正常组(f)6组.每例随机切3个蜡块,HE染色,每张切片随机取3~4个视野,用Image-Pro图像分析软件对细胞核及细胞进行测试,按体视学公式计算以细胞为参照空间时细胞核的下列8项参数:体积密度(Vvn)、表面积密度(Svn)、表面积与体积比(Rsvn)、数密度(Nvn)、核浆比(Rnp)、平均体积(vn)、平均表面积(sn)及平均自由程(λn).用SPSS11.5行方差分析和组间两两比较,并行逐步判别分析.结果Vvn、Svn、Nvn、vn、sn、λn、Rsvn及Rnp8项参数在肺鳞癌、肺腺癌、肺腺鳞癌、肺大细胞癌、肺小细胞癌及正常对照组6组之间的方差分析中均有显著性差异.由Vvn、Svn、Nvn、vn、sn、λn、Rsvn及Rnp8项参数所建立的肺癌组与正常组的判别函数,肺癌组70例及正常组8例判别均正确;由Vvn、Svn、Rsvn、vn、sn及λn六项参数所建立的不同类型肺癌及正常组的判别函数和由Vvn、Svn、sn及λn四项参数所建立的不同类型肺癌的判别函数,肺鳞癌和肺腺癌的准确度均为90%,判别6例肺小细胞癌均正确.结论1.在肺癌的判别方面,Vvn、Svn、Rsvn、Nvn、Rnp及λn6项参数对肺小细胞癌均是有判别能力的参数;Vvn、Nvn、vn、sn及Rsvn5项参数对肺鳞癌、肺腺癌、肺腺鳞癌及肺大细胞癌4组非小细胞肺癌均是有判别能力的参数;Rnp对肺鳞癌和肺腺癌是有判别能力的参数;2.在肺癌分型方面,Vvn、Svn、Nvn、λn及Vn均可做为区分肺小细胞癌与非小细胞肺癌的有意义参数;但仅依据肺癌细胞核的有关体视学参数很难对非小细胞肺癌组织学亚型进行满意分类;3.用Vvn、Svn、Nvn、vn、sn、λn、Rsvn及Rnp8项参�
简介:目的克隆精子表面蛋白P34H基因的编码区,为进一步体外表达P34H蛋白做难备。方法提取人附睾体部总RNA,并以此为模板,进行反转录PCR获得编码P34H蛋白的基因片段。应用T/A克隆策略,将扩增的P34H基因编码区克隆入T载体,并通过双酶切和DNA测序进行鉴定。同时,以β-actin为内参,进行反转录PCR半定量分析,比较P34H在附睾头部、体部和尾部及睾丸组织中的表达量大小。结果成功地克隆了P34H基因。将P34H的cDNA序列登录GenBank,登录号为AF515625。反转录PCR半定量分析表明P34H主要在附睾体部表达。结论克隆的P34H基因可用于构建表达载体,为进一步表达P34H重组蛋白进行有关P34H的基础和应用研究打下了基础。
简介:为控制由沙门氏菌污染鸡蛋引起的食物中毒,对我国带壳鲜鸡蛋的沙门氏菌污染引起人群感染的危险性进行定量评估.带壳鲜蛋沙门氏菌定量危险性评估模型模拟了从农场到餐桌(即从生产到消费)由于消费带壳鲜鸡蛋引起沙门氏菌病的危险性.模型计算每年因食用被沙门氏菌污染的带壳鲜蛋而引起沙门氏菌病的人数平均为5.3×107人(5th~95th百分位点值:4.0×105~2.2×108).与全国疾病监测点的监测数据预测的沙门氏菌病例数据吻合,表明该模型可以合理地预测危险性.通过改变该模型的重要参数,评估了几种降低危险性措施的效果,发现控制鲜蛋贮存的温度与时间是影响危险性结果的最重要因素.该评估方法的框架为我国今后进行其它类似的定量危险性评估提供了参考.
简介:目的:利用TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ—RT—PCR)检测强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞白细胞介素-2受体α(IL-2Rα)mRNA的表达水平,并进行疾病的活动性相关分析。方法:用PrimerExpressv2.0软件,根据GenBank提供的序列,在人IL-2RαmRNA的第2和第3外显子之间设计一对引物和一条TaqMan探针。提取总RNA,加入已优化的一步法FQ—RT—PCR反应体系,扩增产物经凝胶电泳后切胶回收,并与pUCm—T载体连接。制备好的重组质粒转化感受态细胞进行克隆。经测序分析确定为特异性片段后,用T7RNA聚合酶转录为cRNA,作为FQ—RT—PCR系列浓度标准品。评价FQ—RT—PCR检测IL-2RαmRNA的特异性、线性、精密度和探针稳定性等。定量测定HLA—B27阳性活动组与阴性非活动组强直性脊柱炎患者外周血单个核细胞IL-2RαmRNA基因的表达水平,结合血浆可溶性白细胞介素-2受体(sIL-2R)浓度,探讨与炎症活动的相互关系。结果:成功构建了cRNA标准品。该方法的线性范围为7~107cells/ml,其批内CV8.4%,批间CV9.6%;扩增产物克隆的双向测序结果经BLAST比较、分析,证实为IL-2RαmRNA特异性片段。对各30例HLA—B27阳性与阴性的强直性脊柱炎的测定表明:与正常人对照组结果比较,HLA—B27阳性组与HLA—B27阴性组IL-2RαmRNA和sIL-2R都有明显增加(P<0.01)。IL-2RαmRNA对炎症活动评价的灵敏度为96.7%。结论:FQ—RT—PCR具有灵敏、特异、结果重复性好等优点;IL-2RαmRNA与sIL-2R比较更能反映强直性脊柱炎患者的免疫状态,可能为免疫药物的疗效评价和药物筛选提供基因表达水平上的信息。
简介:本文研究了双波长差示一阶导数分光光度法运用于作为对照品的一氧化碳(CO)饱和水浓度标定及定性与定量测定微粒体代谢中生成的一氧化碳的方法。本法的优点在于能显著消除试样本底干扰,大大提高了定量准确性及灵敏度,在CO浓度2-10umol.L^-1范围内与导数光谱峰(415nm)和谷(426nm)之间距离(D)呈良好线性关系,r=0.999(n=5),回归方程C(mmol.L^-1)=17.6D-0.4.最低检测浓度低于0.1umol.L^-1CO。系统回收率和加样回收率(x±RSD)分别为102.1±2.9%(n=7)和79.7±6.8%(n=12);日内,日间精密度(RSD)分别为4.4%(n=18)和6.1%(n=16),将本法用于4个三卤苯胺和一个三卤苯的体外代谢测定,结果表明,仅2,4,5-三氟苯胺和体外能被大鼠肝微粒体,NADPH和分子氧代谢生成一氧化碳,苯巴比妥和地塞米松等肝药酶诱导剂能显著提高一氧化碳的代谢转化速率,它们分别为空白对照组的3或8倍。