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  • 简介:细胞信号转导异常往往与人类疾病发生、发展密切相关。些病毒致病和感染机制即为病毒抗原蛋白作用宿主细胞信号转导途径,导致宿主细胞内信号转导发生紊乱。丙型肝炎病毒(HCV)引发慢性丙型肝炎,导致肝硬化和肝细胞癌发生主要病原体,但目前HCV致病机制与宿主内持续感染机制尚不清楚。HCV致病机制可能与HCV表达蛋白质干扰宿主细胞信号转导途径而导致异常细胞信号转导有关。研究HCV蛋白宿主细胞信号转导途径影响不仅有助于阐明其致病机制,还能为新药设计和寻找新治疗方法提供新思路和新靶点。本文主要综述了近年来国内外有关HCV蛋白作用细胞信号转导途径研究进展。

  • 标签: 丙型肝炎病毒 细胞信号转导 核心蛋白 包膜蛋白E2 非结构蛋白NS3 非结构蛋白NS5A
  • 简介:以油菜细胞质雄性不育系1193A和恢复系1193R2为亲本构建F2分离群体,并运用BSA法构建了可育和不育基因池。利用1521SSR引物进行了多态性分析,结果表明有36引物在亲本和基因池间都表现多态性,用F2单株验证表明有11引物与恢复基因连锁,离恢复基因较近2个标记CB10316和BnGMS171分布在恢复基因Rf两侧,遗传距离分别为3.9cM和5.7cM,可作为恢复系标记辅助育种候选标记。

  • 标签: 油菜 雄性不育系1193A 恢复基因 SSR标记
  • 简介:蛋白质组学新技术为我们研究细胞信号转导过程提供了更广泛和崭新思路,它克服了传统技术局限性,实现了蛋白高通量分析。简要综述了蛋白质组学技术在信号转导过程中信号分子的确定、定量,磷酸化等翻译后修饰识别,以及蛋白质之间相互作用研究等方面的应用。

  • 标签: 蛋白质组学 信号转导
  • 简介:目的:研究miR-1290在宫颈癌Hela细胞上皮间质转化中作用。方法:模拟肿瘤放射治疗分割疗法,单次2Gyγ射线连续照射宫颈癌Hela、Siha细胞诱导辐射抗性细胞株;采用microRNA芯片技术比较辐射抗性细胞与亲本细胞中miRNA表达谱差异;经不同条件乏氧和辐射处理宫颈癌Hela细胞后检测miR-1290表达水平;借助miR-1290及miR-1290-inhibition慢病毒表达载体,调变miR-1290在Hela细胞表达;调变miR-1290后,划痕实验及Transwell侵袭实验比较Hela细胞侵袭和转移能力;蛋白质印迹法检测细胞中E钙黏素(E-cadherin)和N钙黏素(N-cadherin)表达。结果:在宫颈癌辐射抗性细胞中miR-1290表达水平显著升高(P〈0.05);乏氧和辐射可诱导miR-1290在宫颈癌Hela细胞中表达(P〈0.05);上调表达miR-1290,Hela细胞出现了明显间质细胞形态改变,细胞侵袭和转移能力明显增强(P〈0.05)。在Hela细胞中上调表达miR-1290,降低了细胞中E-cadherin表达,同时升高了N-cadherin表达(P〈0.05)。结论:乏氧和辐射可诱导miR-1290在宫颈癌Hela细胞中表达,miR-1290通过调控E-cadherin和N-cadherin表达促进宫颈癌Hela细胞发生EMT。

  • 标签: 辐射 乏氧 MI R-1290 宫颈癌 上皮间质转化
  • 简介:目的:报道1例马尔尼菲青霉败血。方法患者男性,39岁,主因“发热伴淋巴结肿大1个月”就诊。进行骨髓瑞士染色、血液接种于有氧及厌氧培养瓶、沙氏培养基培养等检查,并培养物进行形态学及rDNA序列鉴定。结果骨髓涂片见细胞内分隔孢子,3种培养方法均见真菌生长。沙氏培养基上菌落为丝状菌,表面为黄绿色粉末状,背面为红色;脑心浸汁培养基为酵母样菌落,37℃培养受限制。经DNA序列分析,与马尔尼菲青霉相似性在100℅,鉴定为马尔尼菲青霉。患者诊断为艾滋病并马尔尼菲青霉败血,立即给予氟康唑治疗,转入传染病医院后因极度衰弱死亡。结论败血可作为马尔尼菲青霉病首发症状,临床应予以重视;患者血液极具传染性,应注意隔离;对于有冶游史不明原因发热患者,注意考虑本病可能,必要时行血液培养及HIV检测。

  • 标签: 马尔尼菲青霉 败血症 AIDS
  • 简介:目的:了解北京地区Merkel细胞多瘤病毒(MCPyV)在呼吸道感染住院儿童中流行情况和临床特点。方法:采集北京友谊医院儿科呼吸道感染住院患儿鼻咽抽吸物样本200份,并收集相应患儿临床资料,采用Taq.Manreal—timePCR方法检测MCPyVLTAg基因,并经测序确认;MCPyV阳性样本同时检测常见的人呼吸道病毒混合感染情况。结果:200份标本中共检出MCPyV阳性6例,检出率3%;感染儿童年龄从6月到5岁,其中年龄≤3岁占83.3%(5/6)。诊断包括支气管肺炎和急性支气管炎,临床表现包括发热、咳嗽、喘息。6例阳性样本均与其他呼吸道病毒混合感染,A型流感病毒和呼吸道合胞病毒混合感染最常见,6例阳性样本MCPyV载量均低于10拷贝/μL。结论:real—timePCR方法检测呼吸道感染住院患儿中MCPyV感染率为3%,6例MCPyV阳性样本均与其他呼吸道病毒混合感染且MCPyV载量较低,不能认为MCPyV儿童呼吸道感染病因。

  • 标签: Merkel细胞多瘤病毒 TaqMan探针实时荧光定量PCR 呼吸道感染
  • 简介:为了研究通过功能筛选得到个新细胞分化相关全长cDNA(命名为EDRFI)功能,选择K562细胞作为模型细胞来观察反义EDRFI表达细胞功能影响.通过快速构建,同时得到了正向和反向插入片段真核表达载体pcDNA3-EDRFI-S(sense)及peDNA3-AS(antisense),并通过改进LipofectAMINE细胞转染和G418筛选,得到了稳定表达细胞株,进行基因组PCR鉴定,证明了转染高效性.NorrhemB10t试验结果表明,反义载体转染K562细胞中,EDRF1在mRNA表达水平上受到下调,提示EDRF1反义DNA表达可能抑制了EDRF1mRNA正常转录.进步,γ-珠蛋白和PKC-α表达在反义构建质粒转染K562细胞表达均受到下调,这可能传递了红细胞分化负反馈信号,从而抑制了珠蛋白合成.

  • 标签: 反义RNA 红细胞分化 蛋白激酶C-Α 信号转导 γ- 珠蛋白
  • 简介:目的:构建趋化因子CXCL12重组腺病毒表达载体,观察其间充质干细胞(MSC)中成骨特异性转录因子Runx2表达影响。方法:将目的基因CXCL12全长cDNA模板进行PCR扩增、酶切后与pHBAd-MCMV-GFP载体结合,获得pHBAd-MCMV-CXCL12-GFP重组载体;将重组载体和包装质粒共转染HEK293细胞进行包装、扩增;利用所携带绿色荧光蛋白基因测定病毒滴度,观察基因转染效率,QPCR和Western印迹检测CXCL12重组腺病毒转染后MSC中CXCL12和Runx2表达。结果:酶切、PCR及测序结果证实CXCL12重组腺病毒载体构建成功,转染MSC后CXCL12和Runx2表达明显升高,AMD3100可以降低CXCL12基因转染后MSC中Runx2表达。结论:趋化因子CXCL12和MSC表面的CXCR4结合MSC中成骨特异性转录因子Runx2表达具有促进作用。

  • 标签: 趋化因子CXCL12 腺病毒表达载体 基因转染 间充质干细胞 转录因子Runx2
  • 简介:随着时代发展,以及些严重病例出现,人们对于肿瘤及放疗恐惧和担忧,使得肿瘤病人在生活中受到比较到影响.本文实验为基础进而分析患者心理状态、及其细菌免疫能力和测定患者在心理干预情况下研究.来达到更好保证患者在手术后更好恢复,促进其心理健康生活,从而有利于病人更好康复.

  • 标签: 肿瘤放疗 心理健康 措施
  • 简介:SDS-PAGE将SDS所带大量阴性电荷和聚丙烯酰胺凝胶高分辨率相结合,使蛋白自身电荷被大量阴性电荷所淹没,这样蛋白在电泳时迁移率仅与其分子大小有关。蛋白电泳时凝胶孔径大小和电泳介质对不同大小分子分辨率有不同影响,特别对相对分子量小于10000低分子量蛋白,常规电泳方法完全不能分辨,国外报道尿素、缓冲液浓度及聚丙烯酰胺中单体和双体比例蛋白分辨率有较大影响,但将几种不同因素进行综合研究,未见报道。

  • 标签: 聚丙烯酰胺 凝胶电泳 分离胶 小分子物质 低分子量 蛋白分子
  • 简介:通过黄褐筛菌(Cribrariaaurantiaca)和筛菌(Cribrariamicrocarpa)孢囊及囊被进行显微结构观察,为筛菌属黏菌分类提供了图鉴资料。

  • 标签: 黄褐筛菌 小筛菌 子实体 囊被网
  • 简介:目的:观察骨髓间充质干细胞在氨气致大鼠吸入性肺损伤疗效。方法:随机选取69只普通SD大鼠,随机将这些大鼠分为正常组(n=23)、地塞米松治疗组(n=23)、干细胞治疗组三组(n=23),正常组给予尾静脉注射生理盐水,地塞米松治疗组给予注射地塞米松,干细胞治疗组给予干细胞注射。结果:干细胞治疗组大鼠治疗后1d、3d肺组织病理学评分及肺W/D、BALF白细胞数量及蛋白浓度、TNF-α、IL-8水平均显著低于地塞米松治疗组(P〈0.05),均显著高于正常组(P〈0.05)。结论:骨髓间充质干细胞在氨气致大鼠吸入性肺损伤疗效较地塞米松显著。

  • 标签: 骨髓间充质干细胞 氨气致大鼠吸入型肺损伤 疗效
  • 简介:目的:探讨灵芝多糖成分(GLP)抑制肿瘤作用机制。方法:在小鼠右腋皮下接种1×106TC-1细胞后7天后,用100mg/kg、200mg/kg和400mg/kg3种剂量给小鼠口服灌胃给药20天,然后观察肿瘤重量,并用ELISA检测小鼠血清中IL-2、IL-6和TNF-alpha,用流式细胞仪检测其外周血中CD4+和CD8+。结果:100mg/kg、200mg/kg和400mg/kg3种剂量给小鼠口服灌胃给药20天,与对照组比较,抑瘤率分别可以达到53%、59%和58%,P〈0.05;小鼠外周血血清中IL-2从1.27ng/mL提高到了2.88ng/mL,P〈0.05;TNF-α从1.05ng/mL提高到了1.82ng/mL,P〈0.05;而IL-6则没有明显变化。CD4+细胞水平升高(从54.80%提高到了58.27%),但差异无统计学意义(P〉0.05);CD8+细胞明显增多(从24.15%提高到了45.36%),差异有统计学意义(P〈0.05)。结论:GLP有明显抑瘤作用,但抑瘤作用与GLP剂量不存在依赖关系。GLP肿瘤细胞生长抑制通过提高小鼠细胞免疫能力来实现,而并非直接杀伤肿瘤细胞

  • 标签: 灵芝多糖 抑制肿瘤 作用机制
  • 简介:黄酮类化合物类低分子天然植物成分,这类化合物具有共同母核C6-C3-C6.黄酮类化合物具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、改善心血管功能等生物活性.国内、外大量研究表明,促进肿瘤细胞凋亡其抗肿瘤机理之一.随着分子生物学技术发展,黄酮类化合物诱导肿瘤细胞凋亡分子机理也逐渐被阐明.本文简要综述国内外黄酮类化合物诱导癌细胞凋亡分子机理研究进展.

  • 标签: 癌细胞 细胞凋亡 黄酮类化合物
  • 简介:结核病仍然困扰着人类健康,我国是22个结核病高负担国家之一,早期正确诊断以及及时有效治疗对于控制我国结核病流行必不可少。传统结核病实验室诊断方法都存在着许多不足,新诊断方法由于没有良好生物标志物而受到了限制。国内外许多研究表明,白细胞介素6(IL-6)在结核病中具有潜在诊断价值。在此就IL-6与结核分枝杆菌感染和诊断研究进展做综述。

  • 标签: 结核分枝杆菌 白细胞介素6 感染 诊断
  • 简介:目的:研究三种神经源性细胞中,缺氧条件下Apobec-1表达与COX-2表达水平及细胞缺血损伤程度之间关系。方法:SH-SY5Y细胞,NG108-15细胞和PC12细胞分别施以无氧-无糖刺激,进而检测刺激前后细胞活力,乳酸脱氢酶(LDH)释放量,以及Apobec-1表达量,以研究缺氧Apobec-1表达影响。在这三种细胞中分别过表达Apobec-1,检测细胞中COX-2蛋白及mRNA水平。结果:1在三种神经源性细胞中,随着无氧-无糖刺激时间延长,细胞损伤程度加重,同时Apobec-1和ACF表达量升高。2过表达Apobec-1可加重无氧-无糖刺激导致神经细胞损伤,具体表现为细胞活力降低及LDH释放量增加。3Apobec-1可在此三种神经源性细胞中提高COX-2蛋白及mRNA水平。结论:Apobec-1在神经源性细胞中与细胞缺氧损伤程度及COX-2表达密切相关。

  • 标签: Apobec-1 COX-2 神经源性细胞 缺氧 脑缺血
  • 简介:骨髓间充质干细胞(MSCs)有来源广泛、易于分离培养、不易引起免疫排斥等特点,使其成为细胞治疗和基因治疗种子细胞,具有广泛科研和临床应用价值。骨髓MSCs具有多向分化潜能,在特定条件下能诱导分化成神经元甚至更为特异多巴胺能神经元,为帕金森病进行细胞移植疗法提供了理想细胞来源。本文就近年来体外诱导MSCs向多巴胺能神经元定向分化所涉及到常用诱导因素和诱导方法及途径予以综述。

  • 标签: 间充质干细胞 多巴胺 分化
  • 简介:项新研究证实乳腺癌细胞在变成恶性肿瘤细胞之前经历种硬化过程。这发现是由来自葡萄牙古尔班基安科学研究所(InstitutoGulbenkiandeCiencia,IGC)FlorenceJanody领导个研究团队取得

  • 标签: 乳腺癌细胞 硬化过程 NAT 浸润性 FLORENCE 恶性肿瘤细胞
  • 简介:以pBRTM/HCV-3011模板,通过PCR法扩增ns5a、LISDR(左端序列)和RISDR(右端序列),分别经XhoⅠ/EcoRⅠ、XhoⅠ/HindⅢ和EcoRⅠ/HindⅢ双酶切,连入穿梭质粒pEGFP-N3中,构建重组质粒pEGFP-N3-ns5a和pEGFP-N3-ns5a-△ISDR.对重组质粒进行酶切分析和序列测定.将这2种重组质粒通过电穿孔法转染HeLa细胞,然后在G418选择压力下进行有限稀释法筛选,用RT-PCR和荧光显微镜鉴定.经酶切鉴定和基因测序证实,重组穿梭质粒已插入目的片段ns5a、LISDR和RISDR.RT-PCR和荧光显微镜检测到目的基因表达.以上结果说明成功构建了真核表达载体pEGFP-N3-ns5a和pEGFP-N3-ns5a-△ISDR,目的基因在HeLa细胞中得到表达,为研究HCVNS5A中是否存在抗干扰素治疗功能蛋白提供了实验材料.

  • 标签: 丙型肝炎病毒 干扰素敏感决定区 HELA细胞系 增强型绿色荧光蛋白 丙型肝炎 真核表达载体