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  • 简介:抗病品种培育防治青枯病、根结线虫、番茄黄化曲叶病毒病最经济、有效手段。‘浙杂301’是以自育兼抗青枯病根结线虫株系‘T5678161—1—1—2—2’为母本,AVRDC引进兼抗青枯病番茄黄化曲叶病毒病‘T07-018’为父本,杂交选育而成有限生长类型杂交代番茄新品种。母本‘T5678161-1—2—2’系从‘HAWAII7996’与‘T9178’‘斯特番茄’杂交分离后代中经10代单株选择而成。‘浙杂301’于2011年通过浙江省非主要农作物品种认定委员会认定。‘浙杂301’进行农艺性状特征、生产力、抗病性、品质特征性状等研究,结果表明‘浙杂301’高产,品质优良,耐贮运,高抗根结线虫番茄黄化曲叶病毒病,抗青枯病番茄花叶病毒病,平均产量可达8.627x10^4kg/hm^4。该品种适合中国长江流域、华南等青枯病、根结线虫番茄黄化曲叶病毒病高发地区种植。

  • 标签: 番茄 抗病 杂交 黄化曲叶病毒 品种
  • 简介:构建能够通过农杆菌介导转化植物的人工染色体文库可以加快突变基因精细定位克隆速度.为了克隆水稻突变基因需要,我们利用pYLTAC7载体构建了籼稻品种H359基因组TAC文库.该文库包含41088克隆,保存在107块384孔板中.插入片段大小在50-100kb之间,平均插入大小为77kb,推测该库覆盖水稻基因组接近7.4倍.

  • 标签: 籼稻 H359品种 可转化人工染色体 基因组文库 TAC文库
  • 简介:霜霉菌种在十字花科作物中寄主范围很广专性寄生菌。本研究综合运用病菌形态学观察、病菌致病性测试rDNA-ITS序列分析三种方法北京地区大白菜甘蓝寄生霜霉菌进行比较,以期发现二者进化关系。结果显示:两种病原菌在形态学上没有明显区别;但是大白菜致病力具有显著差异:大白菜霜霉菌大多数参试大白菜材料具有致病性,而甘蓝霜霉菌只是诱导大多数大白菜材料产生过敏反应,个别易感大白菜材料具有较弱致病力;将rDNA—ITS序列提交至NCBI,大白菜甘蓝霜霉菌rDNA—ITS序列登录号分别为JF975613JF975614,序列比对发现二者序列致性高达99.59%;利用19十字花科霜霉病菌ITS序列构建系统进化树,结果表明二者与寄生在甘蓝甘蓝型油菜上霜霉菌以100%支持率聚在同分支。

  • 标签: 大白菜 甘蓝 霜霉菌 致病性 RDNA-ITS
  • 简介:二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol4-reductase,DFR)花青素代谢后期重要酶,决定花青素从无色到有色关键调控点。本研究以‘贵妃’芒果果实为材料,采用同源克隆方法克隆得到了二氢黄酮醇4-还原酶DFR基因。该基因cDNA全长为1260bp,开放阅读框为987bp,编码328氨基酸。进步扩增得到基因组DNA,全长为3022bp,分析发现含有五内含子,在已报道植物中表现保守。系统发育分析发现芒果DFR蛋白与火鹤花、小麦大麦等植物具有较近亲缘关系。不同着色果皮中DFR基因表达进行分析发现,绿色果皮中表达量较高,而黄色果皮中表达量较低,暗示DFR调控花色苷合成功能待深入研究。

  • 标签: 芒果 花色苷 基因克隆 表达分析
  • 简介:西红花总苷栀子果实中次生代谢产物,具有重要药理作用,也是国际流行天然色素"栀子黄"主要成分。番茄红素β-环化酶b(lycopeneβ-cyclase,LCYb)催化合成了西红花总苷代谢途径前体化合物-β-胡萝卜素。本研究利用RACE技术,从栀子果实中克隆了条长1672bp序列,含有1500bp开放阅读框,编码499氨基酸组成蛋白质。该蛋白具有番茄红素β-环化酶结构域,分子量为56.39kD,N端有40氨基酸组成质体定位信号肽,属于LCYb亚家族,因此命名为GjLCYb2。进行密码子优化后,利用两种原核表达系统诱导GjLCYb2融合蛋白表达,pSYNO-1系统可以在大肠杆菌中表达出可溶蛋白,pET-28a(+)系统表达蛋白以包涵体形式存在。荧光绝对定量qPCR检测结果表明,在栀子果实发育成熟过程中,GjLCYb2基因表达量变化与西红花总苷合成量变化趋势致,表明GjLCYb2基因可以作为遗传操作靶点,进行栀子果实中西红花总苷生物合成途径调控。

  • 标签: 栀子 西红花总苷 番茄红素Β-环化酶
  • 简介:在植物体胚发生过程中愈伤组织里存在着复杂生化反应,不同愈伤组织有着不同生理生化特性。用MS培养基楸树幼嫩种子进行培养,诱导产生出三种类型胚性愈伤组织种非胚性愈伤组织,以此作为实验材料。可溶性蛋白、可溶性糖游离脯氨酸含量进行测定分析,研究楸树胚状体形成过程中三种类型胚性愈伤组织之间以及胚性愈伤组织非胚性愈伤组织之间生理生化差异。结果表明,可溶性蛋白游离脯氨酸在楸树胚性愈伤组织中含量远远高于非胚性愈伤组织;而楸树胚性愈伤组织可溶性糖含量均显著低于非胚性愈伤组织。并且可溶性蛋白、可溶性糖游离脯氨酸含量在楸树不同类型胚性愈伤组织之间存在差异。

  • 标签: 楸树 胚性愈伤组织 非胚性愈伤组织 生理生化差异
  • 简介:本研究利用Wx基因微卫星特异性分子标记"484/485"13份国内常用保持系进行PCR检测,筛选出具有中等AC含量、Ⅰ型带型优质保持系"宜香1B"作为优质供体。配制"协青早B/宜香1B",F1、F2代单株用"484/485"PCR分子检测,证明带型符合基因分离模式。在此基础上,"协青早B/宜香1B"杂交、回交自交低世代群体(BC1F1、BC1F2)进行"484/485"分子标记辅助选择,再结合优质不育系其它性状选择,快速育成了中等AC含量、垩白率低、透明度高、不育特性农艺性状稳定籼型优质三系不育系"浙农3A",并于2009年9月顺利通过了浙江省品种审定委员会组织专家现场鉴定。本文还就利用"484/485"分子标记有效改良稻米AC含量等问题进行了讨论。

  • 标签: 水稻 优质不育系 直链淀粉含量“ 484/485”分子标记
  • 简介:UXS基因参与植物细胞壁合成过程,在植物生长发育中起着重要作用。本研究采用生物信息学方法鉴定了玉米全基因组中全部UXS结构基因,命名检测相关属性,并玉米中UXS结构基因家族进行构建进化树染色体定位。通过进化树分析可清晰地看出基因相似程度基因之间亲缘进化关系,染色体定位图分析可看出基因在染色体上位置,为进步了解UXS结构域基因家族在玉米植株中作用及功能分析提供了重要依据。

  • 标签: 玉米 UXS基因 木糖 生物信息学 进化树
  • 简介:白粉病威胁我国小麦生产最主要病害之。筛选培育抗病品种防治小麦白粉病条安全有效途径。Pm21目前最有效抗白粉病主效基因之,加快在小麦育种中应用,我国小麦生产具有重要意义。本研究目的在于将普通小麦——簇毛麦易位系92R137中抗白粉病基因Pm21导入农艺性状好、产量较高、较易感白粉病农大系列小麦品种中。在92R137与农大系列小麦品种回交代利用Pm21SCAR1265标记进行检测,筛选山含有抗白粉病基因Pm21单株,进行辅助育种应用研究,经两次回交两次标记辅助选择,从农大3291/92R137//农大3291:组合后代中选出具有Pm21基冈且产量性状好品系13,从农大3214/92R137H农大3214^2组合选出9,从农大3213/92R137//农大3213。组合选出35,从农大3197/92R137//农大3197^2组合选出8,从农大3383/92R137//农大3383^2组合选出15,从农大3308/92R137//农大3308^2组合选出2共计82进入初步产量鉴定,根据初步产量结果农艺性状表现选出9优系参加2005年秋播产量试验。

  • 标签: 标记辅助选择 普通小麦 白粉病抗性 Pm21基因
  • 简介:本研究以芥菜型油菜(BrassicajunceaL.)核不育系1161A温敏雄性不育系K121SBCF1为作图群体,采用混合群体分组分析法(bulkedsegregantanalysis,BSA)定位油菜温敏雄性不育系K121S育性转换基因(Fc)。研究结果表明,从86多态性SSR引物中获得了5连锁标记:Ol11-G11a、Na10-F06、Na14-G10、CN48BrGMS961,其中Ol11-G11a、Na14-G10Na10-F06等3SSR标记与K121S育性转换基因遗传距离较近,分别为1.6cM、11.0cM19.7cM。本研究结果可为油菜温敏雄性不育系K121S育性转换基因图位克隆及其利用提供依据。

  • 标签: 油菜 温敏雄性不育 育性转换基因(Fc) 基因定位 分子标记
  • 简介:蓖麻花序生长发育状态影响蓖麻单产因素之,PLC基因调节花粉管极性生长。通过RT-qPCRLm型蓖麻花序中PLC基因家族表达量进行分析,并利用生物信息学工具进行生物信息学分析。结果表明:PLC基因表达量与蓖麻花序轴发育时期相关。蓖麻基因组中共有6PLC基因,编码蛋白无跨膜结构域、无信号肽/导肽亲水性蛋白,α-螺旋散布于整个蛋白质中,具有PLCXc、PLCYcC2三特征结构域。此外,蓖麻PLC2、PLC2M、PLC4、PLC4X2、PLC6蛋白定位在其他细胞器;PLC2N定位在线粒体,预测剪切位点序列长度为23氨基酸。本研究为进步研究PLC基因家族蓖麻花序发育过程影响提供了理论依据。

  • 标签: 蓖麻 PLC基因 RT-QPCR 生物信息学分析
  • 简介:依赖焦磷酸磷酸果糖激酶(PFK)糖酵解途径关键酶。本研究首先构建带有种子特异性napin启动子Nos终止子植物表达载体2300-nap及带有组成型35S启动子Nos终止子植物表达载体2300-35S;然后用PCR法从甘蓝型油菜(BrassicanapusL.)中油119总基因组中扩增出依赖焦磷酸磷酸果糖激酶(PFK)基因片段,再以扩增出PFK基因片段作模板设计引物扩增出相应小片段。将两PFK基因片段反向连接,插入到植物表达载体2300-napnapin启动子nos终止子之间,植物表达载体2300-35S35S启动子nos终止子之间,分别构建成可转录表达出发夹RNA(hairpinRNA,hpRNA)结构种子特异型组成型油菜RNA干扰载体,为今后油菜利用RNA干扰(RNAi)提高含油量基因工程研究奠定了基础

  • 标签: 甘蓝型油菜 依赖焦磷酸的磷酸果糖激酶(PFK) 发夹RNA(hpRNA) 载体构建
  • 简介:本研究以丝苗型籼稻优质品种七丝占与抗稻瘟病品种外选35为亲本杂交,从F2代开始采用单粒传法构建了含543株系重组近交系(RILs)群体,并分析了群体中各株系包括整精米率、垩白粒率、垩白大小、垩白度、透明度、直链淀粉含量胶稠度共7稻米品质性状基因分布频率性状相关性。根据实验数据分析结果,我们推测RILs群体中7性状符合2基因控制遗传模式,并存在4类遗传频率分布:(Ⅰ)两亲本间有极端差异2等位基因分离,其中亲本含2增效等位基因,另1亲本为2减效等位基因杂交类型,直链淀粉含量性状属于该分布类型;(Ⅱ)2亲本各有1增效等位基因,表现为2中等值材料杂交类型,包括性状类型为透明度垩白大小;(Ⅲ)两较低值亲本杂交类型,实际上2亲本共同有1减效等位基因,另有1等位基因差异,相应性状为垩白度垩白粒率;(Ⅳ)2较高值亲本杂交,2亲本各有1增效等位基因,另有1等位基因差异,包含性状为整精米率胶稠度。各性状间相关系数分析表明,垩白粒率、垩白度、透明度直链淀粉含量这4性状存在2等位基因高度连锁(75%);垩白度与垩白粒率/垩白大小之间呈极显著正相关;直链淀粉含量与垩白粒率/垩白度之间呈极显著正相关;整精米率与垩白粒率/垩白度之间呈显著负相关;直链淀粉含量与胶稠度之间呈显著负相关;其它性状之间无显著相关性。

  • 标签: 水稻 品质 遗传特点 频率分布
  • 简介:CRISPR/Cas9(Clusteredregulatoryinterspacedshortpalindromicrepeat/Cas9)基因编辑技术在生命科学领域掀起了场重大技术革命,它比锌指核酸酶(ZFNs)转录激活因子效应物核酸酶(TALENs)技术更易于操作,而且更高效。CRISPR/Cas9系统已经被广泛应用到植物科学研究领域中。本实验选取拟南芥MS2为目的基因,构建植物基因编辑系统表达载体,并通过农杆菌介导方法转化拟南芥,从而利用CRISPR/Cas9系统靶向敲除拟南芥MS2基因。对转基因后代MS2测序结果分析表明,在获得12阳性转化植株中,发现了5阳性植株存在基因序列上碱基插入,由此形成CRISPR/Cas9介导拟南芥MS2突变体。这工作为后续分析其他物种中MS2同源基因功能研究提供参考依据。

  • 标签: 拟南芥 CRISPR/Cas9 MS2 基因敲除
  • 简介:长链酰基辅酶A合成酶(longchainacyl-CoAsynthetase,LACS)油脂代谢重要催化酶。本研究采用RT-PCR技术,从花生(ArachishypogaeaL.)克隆到LACS1(GenBank登录号:KT932703),分析了该基因结构组成,预测编码氨基酸与其他植物同源性,采用实时Real-TimePCR技术LACS1组织表达进行研究。结果显示,花生LACS1基因全长2219bp,包含1992bpORF,编码663氨基酸,有22外显子21内含子。氨基酸序列比对显示花生LACS1有真核生物酰基辅酶A合成酶保守结构域,并含有保守激活位点绑定位点。同源性分析发现花生LACS1与大豆、野生大豆、鹰嘴豆、绿豆、甜橙等15种物种氨基酸序列同源性在68%~86%之间,进化树分析显示,花生LACS1与鹰嘴豆等豆科植物亲缘较近。实时荧光PCR分析表明,花生LACS1在花生根、茎、叶、针、仁和花等组织均有表达,但差异明显,其中花表达量最高,表达量大小顺序为花>针>叶>茎>根>仁,地上组织表达量高于地下组织。花生LACS1可能参与花生角质层脂质合成。本研究结果为揭示植物脂肪酸代谢提供理论依据。

  • 标签: 花生 长链酰基辅酶A合成酶 组织表达 油脂
  • 简介:丙二烯氧化合酶(alleneoxidesynthase,AOS)基因茉莉酸(JA)合成途径中第特异性酶,具有调控植物体内JA合成积累重要作用。本研究通过RACE技术克隆得到了‘西伯利亚’百合Lilium‘Siberia’中AOS基因,并将其命名为LsAOS。该基因全长1542bp,编码513氨基酸,蛋白序列与小果野芭蕉同源性最高,属于不稳定亲水蛋白。通过‘西伯利亚’百合4不同花期,9不同组织器官进行实时荧光定量PCR(q-PCR)后发现,LsAOS在花蕾期中表达量最高,随着花朵逐渐开放表达量逐渐下降;LsAOS在叶片中表达水平最高,其次内瓣、根、茎等。JA参与植物生长发育全过程,与植物抗逆性次生代谢反应有着密不可分联系。AOS基因JA途径中关键基因之,JA合成有着重要调控作用。

  • 标签: '西伯利亚’百合 LsAOS 基因克隆 表达分析
  • 简介:高干率、高胡萝卜素甘薯新品种福薯604是以广薯87为母本计划集团杂交选育而来,2016年通过国家甘薯新品种鉴定委员会鉴定,鉴定编号为国品鉴甘薯2016008。通过福薯604形态特征、生产力、生长动态、品质特性及抗病性等生理特点进行多年多点研究,结果表明:福薯604鲜薯产量薯干产量分别比对照广薯87分别增产17.15%21.69%,薯块干物质含量达到30.43%,食味、外观品质优,同时富含多种营养物质,其中胡萝卜素含量达到7.6mg/100g,中抗蔓割病I型薯瘟病,适于在中国南方甘薯种植区域种植。

  • 标签: 甘薯 高淀粉 高胡萝卜素 福薯604
  • 简介:为研究距瓣尾囊草种质资源遗传背景系统进化提供理论依据技术支持,本研究利用L16(45)正交设计,研究Mg2+等5因素PCR扩增结果影响。研究结果表明,在距瓣尾囊草SCoT-PCR最优反应体系(20μL)中,Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物以及模板DNA等5因素最优浓度分别是2.188mmol/L、0.113mmol/L、1.0U、0.625μmol/L30ng。在此基础之上,从18条引物中初步筛选出12条扩增结果稳定、条带清晰SCoT引物。建立了距瓣尾囊草SCoT-PCR反应体系,经过18条引物13份种质资源验证,证明体系稳定性好、可靠性高,能满足距瓣尾囊草分子水平上研究。

  • 标签: 距瓣尾囊草 SCoT标记 正交设计 遗传背景
  • 简介:紫外线B(UV-B)对于植物生长发育具有重要调节作用,其中UVRESISTANCELOCUS8蛋白作为UV-B光受体在植物响应UV-B过程中起关键作用。草莓种重要经济果树,目前关于草莓UV-B光受体报道较少。为研究草莓中UV-B受体蛋白,本研究采用同源克隆方法获得‘丰香’草莓中编码UV-B光受体蛋白cDNA序列,进行了生物信息学分析并构建了原核生物表达载体pET32a-UVR8,利用中心点响应面法优化了重组蛋白诱导条件(包括诱导温度,IPTG浓度,菌液浓度诱导时间)。结果表明:克隆得到了编码草莓UVR8蛋白全长cDNA序列,命名为FaUVR8,生物信息学分析表明该序列长1317bp,编码438氨基酸,预测分子量为47.28kD,等电点pI为5.85,重建蛋白质三维结构表明该蛋白包含7β-片状螺旋结构;原核表达得到69.7kD融合蛋白,诱导条件优化表明将工程菌培养至菌液OD600=0.7,加入浓度为0.55mmol/LIPTG,在27.72℃下诱导9h,可获得最大量重组蛋白79μg/mL。研究结果可为后期寻找与FaUVR8蛋白互作下游蛋白,以及步开展功能研究提供参考。

  • 标签: 草莓 FaUVR8 生物信息学 原核表达