简介:随着现代分子生物学技术的发展,反转录聚合酶链式反应技术在甘薯病毒检测上的应用越来越广泛。采用该技术可检测出甘薯组织中含量极低的病毒RNA,具有灵敏度高、特异性强等优点。在本研究中根据NCBIGenBank中收录的SPCSV病毒外壳蛋白(CP)基因核苷酸序列的保守区域设计了3对特异性引物,使用天根生化科技(北京)有限公司生产的QuantOneStepRT-PCRkit试剂盒,针对影响扩增产物的影响因素退火温度进行优化,建立了甘薯退绿矮化病毒的RT-PCR检测方法。该方法使RT-PCR在一管内完成,大大降低了外源物质的污染及RNA降解的几率,可作为甘薯SPCSV病毒的快速检测方法。
简介:近年来,随着小龙虾价格持续走高,养殖周期短,效益好,养殖面积不断扩大,很多养殖朋友为了追求高产,密度放养也越来越大,养殖遇到的问题也越来越多;这其中,尤其以小龙虾白斑症病毒病最为发病严重,死亡大,发病周期长,难治疗,很多养殖朋友部是病急乱投医,导致最后死亡是越来越大。白斑症病毒属秆状病毒属C杆状病毒亚群中新病毒,当水温达到17-30℃的时候,即可产生毒力,也就是5、6月份,尤其是在25-28℃的水温条件下,毒力最强,当水温低于17摄氏度的时候,处于潜伏期,毒力最弱,养殖品种不受影响,当水温达到30℃以上的时候,病毒可被高温灭活,失去毒力;当池塘的pH低于5以下或高于12以上时,病毒可在一定时间内丧失活性。
简介:犬细小病毒病感染是由犬细小病毒(cPv)引起犬只死亡的最重要传染病之一,目前诊断该病的方法主要是胶体金快速检测试板法,虽然检测方法较简便快速,但其敏感性较差。通过对NCBI网站GenBank发表的CPV-2基因组序列的分析,选择该病毒VP2基因保守序列设计引物,通过对阳性病料扩增及扩增产物测序,与NCBI发表的相关基因对比,同源性在99.8%-100%,成功建立了特异性、灵敏度高的PCR方法,最低只需2.5PgDNA模板。在对28例可疑CPV病例检测中,本方法检出25例阳性、3例阴性,阳性率为89.28%;胶体金检测板检测出20例阳性、8例阴性,阳性率为71.42%,证实PCR方法比胶体金检测更敏感。