简介:为获得快速生长的泥鳅(Misgurnusanguillicaudatus),研究了泥鳅β-actin基因启动子介导的革胡子鲶(Clariasgariepinus)生长激素(growthhormone,GH)重组基因。采用PCR和RT-PCR技术克隆泥鳅β-actin基因近端启动子、3′-UTR及革胡子鲶GH基因编码区,构建一个长为2418bp的GH重组基因DPRK。首先,构建了以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因作为报告基因的重组表达载体pAF(pβ-actinpromoter-EGFP),然后转染DF1真核细胞,同时经酶切线性化后显微注射到斑马鱼(Daniorerio)和泥鳅的受精卵中,以评价泥鳅β-actin启动子的启动活性。其次,将重组基因DPRK显微注射到泥鳅受精卵中。结果显示:泥鳅β-actin启动子能在DF1细胞、斑马鱼和泥鳅的受精卵中启动绿色荧光蛋白的表达;泥鳅的荧光表达率(78.44%)显著高于斑马鱼(29.62%);泥鳅受精卵显微注射DPRK20d后,在mRNA水平检测到GH基因的表达。这表明泥鳅β-actin基因近端启动子具有显著的启动活性,且重组基因DPRK能在泥鳅体内表达,为下一步泥鳅的基因工程育种奠定了理论基础。
简介:是水产养殖专业一门重要的专业基础课程,它不仅要使学生掌握必要的基本理论知识,而且要使学生具备常规渔业水质分析技术和水质评价管理的能力,使学生到工作岗位之后,能够独立进行渔业水质分析,正确进行建场渔业水源选择、鱼池水质监测、水污染控制等,指导渔业生产,保证养殖对象能生活在一个好的环境中.所以教师在实验教学过程中,应特别重视学生养成良好的实验品质和实验习惯,只有这样学生才能熟练掌握水质分析技术,具有扎实的生产实践技能.为此,教师应注意培养学生养成如下良好的实验习惯: