简介：目的建立-种灵敏、可靠、快速对水中大肠埃希菌富集和DNA提取的最佳方法组合，以便应用TaqMan探针实时荧光PCR技术进行定量检测。方法膜过滤洗脱环节，采用3种不同的方法进行富集洗脱，通过平板计数法比较各方法富集洗脱效果；DNA提取环节，采用4种方法进行DNA提取。所得DNA进行实时荧光PCR扩增，定量检测DNA拷贝数，比较各方法的DNA提取效率；并采用最优的方法组合，对模拟水样进行膜过滤和DNA提取，考察全过程的回收率和灵敏度。结果采用加表皮葡萄球菌过滤＋漩涡混合器＋玻璃棒刮擦洗脱方法（C法），洗脱效率能达到75％-93％；TritonX-100法和磁珠法的线性范围达到6个数量级稀释度（10^0-10^-5），r2分别为0．998和0．999，然而，TritonX—100法更省时，更简便，经济性更好。采用该最优的方法组合，其全过程的回收率为79．7％～104．0％且灵敏度达到1cfu／ml。结论c法＋Triton-100法组合可以快速、准确、经济地对饮用水中大肠埃希菌进行富集和DNA提取。

简介：以枯草芽孢杆菌为抑菌试验指示菌,采用从凤凰单丛茶中分离到的内生细菌FH01的无菌发酵液进行抑菌试验,对内生细菌FH01的发酵条件进行研究。通过单因素实验得出,对抑菌活性影响较大的因素为碳源、氮源、初始pH、发酵温度、摇床转速、发酵时间。根据Box-Benhnken中心组合方法对FH01的发酵条件进行六因素三水平试验。结果表明：FH01最佳发酵条件为麦芽提取物用量1.43%（m/v）,大豆蛋白胨用量1.67%（m/v）,初始pH5.0,发酵温度36.78℃,摇床转速129.52r/min,发酵时间67.36h。在此条件下,FH01发酵液对枯草芽孢杆菌的抑菌圈直径为22.10mm,与预测值24.10mm相比,相差仅为2mm,比优化前抑菌圈直径的平均值14.50mm（n=3）提高了34.39%。

简介：研究了碳源、氮源、乙酸盐、碳酸氢钠、温度、氧气等诸多因素和条件变化,对于谷氨酸棒杆菌工程菌株M5（C.glutamicumATCC13032M5）发酵产生L-苹果酸产量的影响。L-苹果酸的检测采用高效液相色谱法。实验结果显示,以5%葡萄糖、0.5%NaAce、0.5%（NH_4）_2SO_4、0.15%KH_2PO_4、0.05%MgSO_4·7H_2O、0.02%CaCl_2为发酵培养基,NaHCO_3调节pH7.0,接种量2.5%,30℃自控摇床好氧发酵36h后,转换成限氧发酵72h,L-苹果酸产量可达到25.2g/L,糖酸转化率为72%。实验结果验证了工程菌M5的基因工程改造是成功的,有希望成为发酵生产L-苹果酸的新菌种。

简介：玉米浆是玉米粒用亚硫酸浸泡提取玉米淀粉后的副产物，主要成分为玉米可溶性蛋白及其降解物（如肽类、各种氨基酸等），另外还含有乳酸、可溶性糖类等营养成分，可作为发酵工业的原料。由于未处理玉米浆中含有多种金属离子，某些金属离子可能会对微生物的发酵过程产生不利影响，一定程度上限制了其在发酵生产上的应用。本研究采用Na2CO3对玉米浆进行预处理，离心去除沉淀后作为三孢布拉氏霉（Blakesleatrispora）的发酵原料。研究发现当100mL玉米浆中添加1．17gNa2CO3时，β-胡萝卜素产量达到最大，比未处理玉米浆提高20．67％。采用响应面法对三孢布拉氏霉液体发酵培养基进行了优化，经分析得到β-胡萝卜素产量最大时培养基中显著性因素含量为：葡萄糖8．70％、KH：P0。0．51％，β-胡萝卜素产量可达到84．76mg／L，比优化前提高了29．93％。