简介：目的了解6种编码16SrRNA甲基化酶的基因在氨基糖苷类抗生素耐药革兰阴性菌中的流行情况。方法收集本院2007年10～12月分离的211株阿米卡星和庆大霉素耐药革兰阴性菌，采用PCR检测其中6种甲基化酶基因（armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD和npmA）的分布。对16SrRNA甲基化酶基因阳性的菌株，用ERIC-PCR进行同源性分析。结果211株阿米卡星和庆大霉素耐药革兰阴性菌中，91．5％（193／211）被检出16SrRNA甲基化酶基因，其中133株含armA（133／211，63．0％），60株含rmtB（60／211，28．4%）。阿米卡星MIC≥512mg／L、庆大霉素MIC≥128mg／L的104株肠杆菌科细菌中，甲基化酶基因检出达100％，且armA和rmtB的检出相仿（分别为49与55株）。阿米卡星MIC≥512mg／L、庆大霉素MIC≥128mg／L的94株铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌中，甲基化酶检出94．7％（89株），以armA（84株）为主。未检测到rmtA，rmtC，rmtD和npmA基因。ERIC-PCR结果显示该类基因并非单克隆传播。结论几乎所有临床分离的阿米卡星MIC〉512mg／L的革兰阴性菌中都能检出armA或rmtB基因。

简介：目的了解我院2007年1月—2008年6月临床分离119株奇异变形杆菌产ESBLs检出率,并分析研究其耐药性和耐药基因分型。方法用药敏纸片法（K-B法）对119株奇异变形杆菌进行抗菌药敏试验,并作ESBLs初筛和确证试验。对其中产ESBLs菌用PCR方法检测TEM、CTX-M-1组、CTX-M-2组、CTX-M-9组和SHV5种基因并对其进行测序。结果119株奇异变形杆菌ESBLs确证试验阳性率为20.2%,产ESBLs菌株对头孢呋辛、头孢唑林、头孢克洛和哌拉西林等耐药率均为100%,对头孢噻肟、庆大霉素和环丙沙星耐药率分别为95.5%、95.2%和86.4%。24株表型确证试验产ESBLs菌中,TEM基因检出率为70.8%,CTX-M-1组基因检出率为54.2%,CTX-M-2组基因检出率为33.3%,未检测到CTX-M-9组和SHV基因。经DNA测序,17株产TEM型ESBLs奇异变形杆菌均属于TEM-1型基因,13株CTX-M-1组和8株CTX-M-2组奇异变形杆菌分别为CTX-M-3型和CTX-M-2型基因,未检测到TEM型ESBLs菌株。结论奇异变形杆菌中产ESBLs菌株检出率较高,产ESBLs菌对头孢菌素类、喹诺酮类、磺胺类和氨基糖苷类等抗菌药物呈多重耐药性。

简介：目的分析比较两种流感病毒抗原检测试剂盒（胶体金免疫层析法）检测的一致性，评价新型的基于银盐扩增技术的流感病毒抗原检测试剂盒在临床中的应用。方法选择2015年1月1日-2月28日在复旦大学附属华山医院就诊的体温〉37．5℃，且具有流感样症状的患者，同时采集双份鼻拭子标本。采用IMMUNOAGCartridgeFluAB试剂盒（简称AGl法）与甲型／乙型流感病毒抗原检测试剂盒（简称CV法）同时检测，并作PCR检测以确证。结果共检测患者91例，AGl法测定甲型流感病毒阳性7例，乙型流感病毒阳性53例；CV法测定甲型流感病毒阳性7例，其中弱阳性3例，乙型流感病毒阳性50例，其中弱阳性4例；PCR法检测甲型流感病毒阳性8例，乙型流感病毒阳性60例。AGl法检测甲型流感病毒灵敏度87．5％，特异度100％，乙型流感病毒灵敏度88.3％，特异度100％。CV法检测甲型流感病毒灵敏度87．5％，特异度100％，乙型流感病毒灵敏度83．3％，特异度100％。AGl法与CV法两种抗原快速检测甲型流感病毒检测的阳性符合率100％，乙型流感病毒的阳性符合率94．3％。结论两种流感病毒快速抗原检测方法一致性较好，AGl检测法可以减少针对弱阳性标本的人为判读误差，可应用于流感早期诊断。

简介：目的比较欧洲抗菌药物敏感试验委员会（EuropeanCommitteeonAntimicrobialSusceptibilityTesting，EUCAST）和美国临床实验室标准化协会（ClinicalandLaboratoryStandardsInstitute，CLSI）微量稀释法检测曲霉体外药物敏感性的差异。方法分别用EUCAST方法和CLSI方法检测116株曲霉对两性霉素B、伏立康唑、伊曲康唑、卡？白芬净和米卡芬净的敏感性，比较两种方法的基本符合率、药敏符合率、极重大误差率和重大误差率。结果EUCAST方法和CLSI方法对116株曲霉药敏检测的基本符合率为96．3％～100％。两方法检测烟曲霉对伏立康唑的药敏符合率98．8％，重大误差为1．2％，极重大误差率为0。烟曲霉和黑曲霉对两性霉素B以及烟曲霉和黄曲霉对伊曲康唑的药敏符合率均为100％，重大误差率和极重大误差率均为0。结论EUCAST方法和CLSI方法对检测曲霉体外药物敏感性具有良好的一致性。

简介：目的观察经核苷（酸）类似物（NA）治疗获得病毒学应答，且HBsAg低水平的HBeAg阴性慢性乙型肝炎（CHB）患者序贯q干扰素（IFNα）治疗的疗效，并探讨HBsAg消失的相关因素。方法长期接受NA治疗并获得病毒学应答（HBV-DNA〈1000拷贝／mL，持续时间〉12个月），且HBsAg低水平（HBsAg≤〈2000U／mL）的HBeAg阴性CHB患者，转为IFNα治疗48周。检测患者治疗前和治疗12、24、48周时血清HBV-DNA定量，HBV血清学标志物，肝功能和血常规，停药后随访24周。以HBsAg消失或血清学转换、HBsAg〈10U／mL为疗效评价指标。Logistic回归用于分析相关因素，受试者工作特征曲线（ROC曲线）用于确定HBeAg阴转史及HBsAg变化情况对治疗后HBsAg消失的预测价值。结果83例患者被纳入研究。停药24周时，15例（18．1％）获得HBsAg消失，5例（6．0％）获得HBsAg血清学转换，9例（10．8％）达到HBsAg〈10U／mL。HBsAg消失组中HBeAg自发阴转的患者比例高于HBsAg未消失组，差异有统计学意义（X^2=9．527，P=0．002）。治疗12周时HBsAg水平较基线下降≥0．5logU／mL者治疗后更易实现HBsAg消失（X^2=16．576，P〈0．001），其预测HBsAg消失的曲线下面积（AUC）为0．810（95％CI：0．686-0．935，P〈0．001）。结论经NA治疗获得病毒学应答，且HBsAg低水平的HBeAg阴性CHB患者，序贯IFNα治疗可获得较高HBsAg消失率；HBeAg阴转史及治疗早期HBsAg变化情况可用于预测及指导治疗。

简介：目的探讨非粒细胞缺乏肺曲霉病患者血清Dectin-1检测的临床意义。方法收集非粒细胞缺乏的曲霉病患者22例（肺曲霉病组），健康体检者54例（对照组），留取血清，ELISA方法检测两组血清Dectin-1水平。分析Dectin-1水平与血清1，3-D葡聚糖抗原检测（G试验）、半乳甘露聚糖抗原检测（GM试验）和血白细胞计数的关系。结果肺曲霉病组血清Dectin-1水平为（427．2±42．6）pg／mL，对照组为（280．8±39．4）pg／mL，差异有统计学意义（P〈0．05）；Dectin-1水平与血白细胞计数、G试验、GM试验无相关性。结论在非粒细胞缺乏曲霉病患者血清中，Dectin-1水平明显增高，提示Dectin-1是重要的抗曲霉免疫分子。

简介：目的评价MicroScanWalkAway96Plus（MSW）全自动微生物分析仪在碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌（CRE）鉴定与预警中的指导价值。方法同时用PCR法和MSW系统检测福建医科大学附属协和医院实验室保存的8l株CRE。以纸片扩散法和PCR法为金标准，比较该分析仪器对CRE菌株鉴定及预测是否产碳青霉烯酶的可靠性。结果MSW判定CRE的符合率为69．1％（56／81）.PCR检测有48株细菌携带碳青霉烯类耐药基因；仪器法检测这些菌株时，高级专家系统（AES）预测产碳青霉烯酶的灵敏度为93．8％，特异度为42．4％，阳性预测值为70．3％，阴性预测值为82.4％，准确度为72．8％。结论MSW系统对CRE具有较强的检测能力。

简介：1994年开始,泰国-缅甸边境广泛应用青蒿素联合疗法治疗恶性疟,使得恶性疟的发病率有了显著的降低。近年青蒿素联合疗法的疗效有所下降,作者对疗效下降与恶性疟原虫中K13基因突变（对青蒿素耐药的基因）的关系进行了研究。

简介：目的了解大连2所医院临床分离革兰阴性菌中介导高水平氨基糖苷类抗生素耐药的16SrRNA甲基化酶基因armA、rmtB的流行情况，并研究其耐药机制。方法收集临床分离的耐阿米卡星的革兰阴性杆菌134株。PCR法筛选2种甲基化酶基因armA及rmtB；PCR产物进行测序。质粒提取、接合试验及转化试验确定armA及rmtB基因定位。琼脂稀释法测定阳性菌株、结合子和转化产物对阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素3种氨基糖苷抗生素的MIC值。结果134株耐药菌株中，21株鲍曼不动杆菌检出armA基因，5株大肠埃希菌和5株肺炎克雷伯菌检出rmtB基因。质粒抽提试验及接合试验rmtB阳性菌获得成功。接合子及转化产物DH5a（pMDarmA）均获得高水平耐氨基糖苷类抗生素的特性。结论大连2所医院检测到16SrRNA甲基化酶基因armA和rmtB阳性菌株。armA基因存在于鲍曼不动杆菌中；rmtB基因位于大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌的质粒上。armA和rmtB可以导致细菌对氨基糖苷类抗生素的高水平耐药。

简介：目的评估碳青霉烯酶失活法（carbapeneminactivationmethod，CIM）试验检测耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌产生碳青霉烯酶的能力。方法收集12l株鲍曼不动杆菌，应用全自动细菌鉴定仪进行菌株鉴定和药敏试验，C1M检测鲍曼不动杆菌所含碳青霉烯酶，应用PCR方法检测OXA-23型碳青霉烯酶基因。结果121株鲍曼不动杆菌中68株对业胺培南和美罗培南耐药，其中65株菌PCR显示携带OXA-23基因，66株菌CIM试验为阳性。52株鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南均敏感，其中49株菌OXA-23阴性，52株菌CIM试验全为阴性。1株菌对亚胺培南耐药、对美罗培南敏感，CIM试验阴性，OXA-23阳性。CIM试验的敏感性和特异性分别为94．2％和98．1％。结论与PCR方法相比较CIM试验操作简便，成本小，结果易读，易于在实验室开展。应用CIM试验可以检测鲍曼不动杆菌OXA-23型碳青霉烯酶，

简介：目的检测血液分离肺炎克雷伯菌的高黏液（HM）表型、荚膜血清型及主要毒力基因,并测定其生物膜形成情况。方法收集血源性肺炎克雷伯菌82株,黏液丝试验检测HM表型。PCR筛查6种常见高毒力荚膜血清型（K1、K2、K5、K20、K54、K57）和7种常见毒力基因（rmpA、rmpA2、aerobactin、mrkD、iroN、magA、wcaG）,利用微孔板法检测生物膜的形成。毒力分数（毒力基因个数）组间比较采用秩和检验,率的组间比较采用卡方检验。结果82株血源性肺炎克雷伯菌中,黏液丝试验阳性占31.7%（26/82）,高毒力荚膜血清型菌株的阳性率为40.2%（33/82）,二者均阳性24株,阳性率为29.3%（24/82）,毒力分数的第50百分位数P50为2。HM表型与非HM表型菌株中高毒力荚膜血清型的检出率分别为92.3%（24/26）和16.1%（9/56）,毒力分数P50分别为5和1,差异均有统计学意义（P〈0.05）。高毒力荚膜血清型菌株的毒力分数P50为5.5,高毒力荚膜血清型菌株中,K1/K2/K57型的毒力分数与K5/K20/K54型比较差异有统计学意义（P〈0.01）。HM表型菌株和非HM菌株形成生物膜的阳性率分别为50.0%（13/26）和73.2%（41/56）,二者差异有统计学意义（P〈0.05）,高毒力荚膜血清型菌株形成生物膜的阳性率为60.6%（20/33）,不同高毒力荚膜血清型肺炎克雷伯菌中,K54菌株形成生物膜的能力最强,阳性率为6/8。结论致血流感染肺炎克雷伯菌存在多种强毒力和（或）生物膜阳性菌株,必须高度重视,避免广泛流行。

简介：目的了解皮肤软组织及创伤感染的金葡菌携带的杀白细胞素（Panton-ValentineLeukocidin，PVL）基因、表皮剥脱性毒素（ETs）基因、中毒性休克综合征毒素-1（TSST-1）的州基因的特点。方法对连续收集的皮肤软组织感染中分离的90株金葡菌，采用多重PCR同时检测金葡菌特异性16SrRNA基因、mecA基因、PVL基因，采用PCR法检测TSST-1及EtsA、B基因。结果金葡菌mecA基因阳性47株（占金葡菌52．2％）为耐甲氧西林金葡菌（MRSA）。有1株MRSA的EtsB基因阳性，1株MRSA的TSST-1阳性，有7株金葡菌携带PVL基因，其中3株为mecA基因阳性株（MRSA）。结论金葡菌可分泌多种毒索，携带PVL毒素的金葡菌常可以引起严重的侵袭性感染，尤其对产毒的MRSA感染引起足够的重视，是防控的重点。

简介：目的了解医院分离的多重耐药鲍曼不动杆菌16SrRNA甲基化酶基因分布情况,为临床合理应用抗菌药物提供依据。方法采用Phoenix100微生物全自动鉴定系统进行菌株鉴定及药敏试验;采用PCR方法检测armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD基因。结果46株鲍曼不动杆菌中armA基因阳性36株,阳性率78.3%,未检出rmtA、rmtB、rmtC、rmtD基因。药敏试验结果显示医院分离的多重耐药鲍曼不动杆菌对多黏菌素全部敏感,对四环素、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素、甲氧苄啶-磺胺甲唑耐药率分别为13.0%、80.4%、91.3%、95.7%、95.7%,对其他测试药物耐药率100%。结论医院分离鲍曼不动杆菌对氨基糖苷类抗菌药物耐药性已非常严重,携带armA基因是导致氨基糖苷类耐药的原因之一,延缓鲍曼不动杆菌多重耐药性已刻不容缓。

简介：目的研究我院临床分离的产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs基因型与耐药表型的关系。方法收集我院2007年1—3月临床分离的92株产ESBLs的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌,用K-B纸片法作药敏试验,酶抑制剂增强法表型确证,应用PCR、产物测序,确定ESBLs基因型。结果我院临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中产ESBLs菌株的检出率分别为50.6%和57.3%;产ESBLs菌株对亚胺培南100%敏感,产ESBLs大肠埃希菌对头孢噻肟、头孢他啶、头孢吡肟和环丙沙星的耐药率分别为88.2%、14.7%、5.9%和29.0%,产ESBLs肺炎克雷伯菌则分别为75.6%、35.6%、28.9%和5.2%。92株产ESBLs菌株中,共检出7种β内酰胺酶基因型,TEM型酶的检出率为70.7%,均为TEM-1广谱酶,CTX型、SHV型ESBLs的检出率分别为66.3%和44.6%,其中CTX-M-14阳性率为48.1%;SHV基因型都在肺炎克雷伯菌中检出。结论我院临床分离产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌耐药情况严重,且其耐药表型也不尽相同。CTX-M型是我院产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中流行的基因型。

简介：目的了解1999-2014年复旦大学附属华山医院血液和脑脊液等无菌体液中分离的金黄色葡萄球菌（金葡菌）对临床常用抗菌药物的敏感性及其毒力基因检测。方法采用琼脂稀释法测定万古霉素等抗菌药物对临床分离金葡菌的最低抑菌浓度（MIC）；采用聚合酶链反应（PCR）法检测MRSA的耐药基因mecA、mecC及其毒力基因PVL和sasX。结果258株金葡菌中MRSA菌株占54．3％（140／258），MSSA占45．7％（118／258），血液、脑脊液和胸腹水等无菌体液中MRSA的检出率由1999-2002年的71．9％逐年下降至2011-2014年的43．7％。药敏试验结果显示：MRSA对多数受试抗菌药物的耐药率均高于MSSA。MSSA对受试抗菌药仍然十分敏感，细菌耐药率除青霉素外，均≤11％。β内酰胺类（除青霉素外）对MSSA的MIC90值均≤1mg／L。未发现对万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。90株临床分离的MRSAmecA基因阳性检出率为100％，未检测到mecC基因；sasX基因的阳性检出率为46．7％，未检测到PVL基因。sasX阳性的MRSA和sasX阴性的MRSA菌株对β内酰胺类抗生素、磷霉素和左氧氟沙星均高度耐药，但sasX阳性MRSA菌株对阿米卡星和甲氧苄啶一磺胺甲噁唑的耐药率均高于sasX阴性的MRSA菌株。结论MRSA对临床多数抗菌药物耐药，为临床合理应用抗菌药物，应重视和加强对金葡菌中MRSA的监测。

简介：侵袭性肺曲霉病（IPA）的快速诊断仍然存在挑战，作者等使用酶免疫方法检测支气管肺泡灌洗液（BALF）中半乳甘露聚糖（GM），以便该试验直接用于靶器官标本的检测。对99例高危血液系统疾病患者（其中58例患者为确诊或拟诊侵袭性肺曲霉病）使用酶免疫方法检测BALF中GM含量并分析其结果。

简介：目的研究细菌性感染患者血液中的降钙素原（PCT）、人中性粒细胞载脂蛋白（HNL）和中性粒细胞CD64（CD64）的表达水平,为临床细菌性感染早期诊疗提供科学依据。方法选取2013年2月—2017年5月就诊治疗确诊的210例感染患者,另选取80例同期健康体检人员为对照组,感染患者分为细菌组105例、病毒组105例,采用热景公司上转发光免疫分析仪检测PCT和HNL、BDFACScalibur流式细胞仪测定并计算CD64百分比、制定工作曲线选取PCT、HNL及CD64截断值,从而分析比较细菌组、病毒组和对照组的PCT、HNL及CD64表达水平和诊断细菌性感染疾病的特异度和灵敏度。结果细菌组与病毒组、对照组的PCT、HNL、CD64和WBC水平分别比较,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。病毒组与对照组的CD64、WBC水平比较,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。病毒组与对照组的PCT和HNL水平差异无统计学意义（P〉0.05）。PCT的受试者操作特征（ROC）曲线下的面积（AUC）为0.855,AUC（HNL）为0.930,AUC（CD64）为0.928,AUC（WBC）为0.729。PCT、HNL和CD64诊断细菌感染性疾病的截断值分别为：〉？0.79ng/mL、〉87.43ng/mL、〉9.01%。结论细菌感染性疾病导致PCT、HNL和CD64表达水平升高,PCT、HNL和CD64可用于细菌感染性疾病的早期诊断,其中HNL的诊断价值最高。

简介：目的应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOFMS）检测产KPC-2、NDM-1、VIM-2、IMP-1与IMP-4型碳青霉烯酶肠杆菌科细菌水解厄他培南的能力。方法收集2009年6月-2013年12月上海交通大学医学院附属新华医院各种临床标本中分离的耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌（CRE）,用改良Hodge试验进行产碳青霉烯酶的表型筛选,用PCR扩增方法检测其碳青霉烯酶基因,并经测序确认。应用MALDI-TOFMS进行厄他培南水解预试验以确定最适厄他培南浓度及孵育时间,随后采用预试验中的最适条件,应用MALDI-TOFMS检测CRE水解厄他培南的能力。结果108株CRE中,有102株改良Hodge试验阳性,其中90株产KPC-2、4株产NDM-1、3株产VIM-2、2株产IMP-1、2株产IMP-4、1株同时产KPC-2和IMP-4型碳青霉烯酶,且在2h内均能水解厄他培南;另外6株CRE改良Hodge试验阴性,未检测出上述碳青霉烯酶基因,且不水解厄他培南。结论临床微生物实验室应用MALDI-TOFMS能够快速准确检测CRE水解厄他培南的能力,筛查产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌,为临床早期合理使用碳青霉烯类抗生素提供依据。