简介:摘要目的利用流式细胞技术建立一种检测胰岛β细胞去分化状态的方法。方法实验研究。常规培养胰岛Min6(小鼠β细胞系)、αTC1-6(小鼠α细胞系)、HepG2(人肝癌细胞)和F9细胞(小鼠畸胎瘤细胞)。白细胞介素1β(IL-1β)合并肿瘤坏死因子α(TNFα)或棕榈酸(PA)过夜处理Min6细胞制备β细胞去分化模型。细胞染色采用抗-嗜铬粒蛋白A(ChgA)、抗-胰岛素(Ins)、抗-胰高血糖素(Gcg)、抗-SRY盒转录因子9(Sox9)和抗-八聚体结合转录因子4(Oct4)抗体进行,流式细胞技术鉴定细胞蛋白表达情况。统计学方法采用独立样本t检验。结果流式细胞实验结果显示Min6细胞高度表达Ins和ChgA,αTC1-6细胞高度表达Gcg,HepG2细胞高度表达Sox9,F9细胞高度表达Oct4,阳性率在90%左右。炎性因子(IL-1β+TNFα)处理Min6细胞导致Ins染色阳性细胞数量明显降低(92.775%±1.702%比97.125%±0.246%,P=0.045),Sox9染色阳性细胞增加(41.675%±0.390%比25.875%±3.348%,P=0.003),但ChgA和Oct4染色无明显变化(P值均>0.05)。PA处理Min6细胞后,Gcg染色阳性细胞数量上升(54.500%±3.597%比41.160%±3.007%,P=0.022)。实时荧光定量PCR检测mRNA结果与流式细胞仪检测结果的趋势一致。结论利用流式细胞技术可检测各去分化模型中不同标志蛋白的表达情况,为判断胰岛β细胞的去分化状态提供了新的手段。
简介:摘要蜀河水力发电厂二号机组为东方电机有限公司生产的灯泡贯流式水轮发电机组。二号机组自安装投产以来,发电机定子和灯泡头地漏预埋排水管就完全堵塞,无法疏通。发电机锥体冷凝水和灯泡头除湿机冷凝水不能正常排入流道内,导致长期积存在发电机定子和灯泡头底部。造成发电机定子和灯泡头内湿度极大,严重影响发电机定子和灯泡头内设备元件的性能和使用寿命,威胁机组的安全稳定运行。因此,在二号机组A修过程中,将定子地漏排水管路进行重新改造铺设,考虑定子基座的承重后,在定子基座中下部位开孔(Φ90-92mm),使用Φ89*3mm的不锈钢管将定子地漏排水管与灯泡头地漏排水管相连穿过定子基座进入168层机组排水管(Φ219*8mm)中,然后排至渗漏集水井。彻底解决二号机组发电机定子和灯泡头底部的积水问题。保障机组的安全稳定运行,对存在类似工程问题的水电站具有一定的设计及技术改造借鉴意义。