简介:摘要目的探讨儿童局灶性皮质发育不良(FCD)Ⅱ型病例的脑病灶中形态异常神经元(dysmorphic neuron)和气球细胞(balloon cell)的阳离子-氯离子共转运体(NKCC1/KCC2)的表达情况,提示可能存在的癫痫发生的形态学基础。方法收集2017年2月至2019年12月在北京市海淀医院(8例)及首都医科大学宣武医院(12例)癫痫手术后石蜡包埋的脑组织,选择患者年龄在14岁以下的诊断为FCDⅡa型10例、FCD Ⅱb型10例。采用免疫组织化学、免疫组织化学双染的方法,检测1型Na-K-2Cl共转运体(NKCC1)、2型K-Cl协同转运体(KCC2)在FCDⅡa型、FCDⅡb型中的表达情况。对NKCC1在FCDⅡa型的形态异常神经元和正常神经元免疫组织化学染色测定平均吸光度(IA)值。结果(1)正常大脑皮质神经元细胞质表达NKCC1,细胞膜表达KCC2;(2)在FCDⅡa型的形态异常神经元中,NKCC1表达量增加,与正常神经元表达比较IA值差异有统计学意义(t′=7.618,P<0.01)。KCC2在形态异常神经元异常表达为细胞质阳性。(3)在FCDⅡb型中NKCC1/KCC2在形态异常神经元的表达与FCDⅡa型相同。气球细胞中NKCC1异常表达为阴性或少许稀疏细胞膜着色,KCC2异常表达为阴性。结论形态异常神经元及气球细胞中NKCC1/KCC2的表达模式与成熟神经元表达模式完全不同,其蛋白表达变化可能影响到神经元跨膜氯离子流,从而影响了抑制性神经递质γ-氨基丁酸的作用,导致神经元兴奋性增加,这个过程可能与临床癫痫症状发生相关。
简介:建立了氯化银比浊法测定镍钴锰三元素氢氧化物中氯离子含量的测定方法。选择了合适的测定波长,并对硝酸用量、沉淀剂用量、稳定时间对测定结果的影响进行了试验,确定了较优的分析条件。样品加标回收率在95%-103.3%,氯离子浓度在0-4μg/mL与浊度值有良好线性关系。方法为控制镍钴锰三元素氢氧化物中氯离子提供了检测依据。
简介:摘要目的探讨CLC-2氯离子通道靶向阻滞对人结膜成纤维细胞(HConF)纤维化过程的抑制作用。方法将HConF分为空白对照组、脂质体2000(Lipo2000)组、无义小干扰RNA(siRNA)组和CLC-2 siRNA转染组,其中空白对照组不做任何处理,其他各组分别采用含有相应转染试剂的培养基培养。采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞中CLC-2 mRNA的表达水平;采用CCK-8试剂盒检测各组HConF的增生能力,即吸光度(A)值;采用流式细胞仪检测各组HConF凋亡比例;采用细胞划痕实验和Transwell迁移实验检测各组HConF迁移能力;采用胶原收缩实验检测各组胶原面积收缩率;采用Western blot法检测各组细胞胶原蛋白(Collagen)Ⅰ、Collagen Ⅲ、PI3K、Akt、p-PI3K和p-Akt的蛋白表达水平。结果空白对照组、Lipo2000组、无义siRNA组和CLC-2 siRNA转染组CLC-2 mRNA相对表达量和细胞A值总体比较差异均有统计学意义(F=90.110、198.680,均P<0.001),其中CLC-2 siRNA转染组CLC-2 mRNA相对表达量和细胞A值明显低于无义siRNA组,差异均有统计学意义(均P<0.001)。空白对照组、Lipo2000组、无义siRNA组和CLC-2 siRNA转染组细胞凋亡率分别为(4.78±1.10)%、(4.54±1.51)%、(4.82±0.88)%和(28.90±0.91)%,总体比较差异有统计学意义(F=363.260,P<0.001),其中CLC-2 siRNA转染组细胞凋亡率明显高于无义siRNA组,差异有统计学意义(P<0.001)。各组细胞迁移率和细胞迁移数量总体比较差异均有统计学意义(F=74.493、1 625.431,均P<0.001),其中CLC-2 siRNA转染组细胞迁移率明显低于无义siRNA组,细胞迁移数量明显少于无义siRNA组,差异均有统计学意义(均P<0.01)。各组细胞胶原面积收缩率总体比较差异有统计学意义(F=104.692,P<0.001),其中CLC-2 siRNA转染组细胞胶原面积收缩率明显低于无义siRNA组,差异有统计学意义(P<0.001)。各组Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ蛋白相对表达量及p-PI3K/PI3K比值和p-Akt/Akt比值总体比较差异均有统计学意义(F=112.073、456.931、340.889、43.021,均P<0.001),其中CLC-2 siRNA转染组Collagen Ⅰ和Collagen Ⅲ蛋白相对表达量及p-PI3K/PI3K比值和p-Akt/Akt比值明显低于无义siRNA组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论靶向抑制CLC-2氯离子通道基因表达可通过PI3K/Akt信号通路促进HConF凋亡,抑制细胞迁移、胶原合成及胶原收缩,抑制纤维化过程。
简介:摘要目的结合应用加权基因共表达网络分析(WGCNA)和差异基因表达分析2种方法筛选结肠癌mRNA表达谱中的差异共表达基因,并分析差异共表达基因与预后的关系。方法基于生物信息学方法从癌症基因组图谱(TCGA)和基因表达综合(GEO)数据库分别下载TCGA结肠腺癌数据集的转录组学数据和GSE68468数据集的芯片表达谱数据,筛选出两者在正常组织与结肠癌组织之间的差异表达基因(DEG)和最显著相关的加权基因模块,通过差异基因和加权基因取交集筛选出结肠癌相关差异共表达基因。构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI )网络,利用最大派系中心度(MCC)计算方法筛选出MCC评分排名前10位的核心差异共表达基因,使用TCGA结肠腺癌数据集验证核心基因在正常组织和结肠癌组织中的表达,采用Kaplan-Meier生存分析探索核心基因与患者总生存期和无病生存期之间的关系。使用人类蛋白质图谱(HPA)数据库,对生存相关的差异共表达基因进行免疫组织化学染色验证。结果TCGA结肠腺癌数据集中DEG共3 481个,GSE68468数据集中DEG共7 275个,共获得237个差异共表达基因。使用PPI网络的MCC计算方法得到10个核心的差异共表达基因,分别为氯离子通道附件1(CLCA1)、MAPK3、胰高血糖素(GCG)、溶质载体家族26成员3(SLC26A3)、核受体亚家族1组H成员4(NR1H4)、脂肪酸结合蛋白1(FABP1)、鸟苷酸环化酶激活因子2A(GUCA2A)、二磷酸尿苷葡糖醛酸糖基转移酶家族2成员A3(UGT2A3)、肉碱棕榈酰转移酶2(CPT2)和跨膜4域A12(MS4A12)。与正常组织相比,TCGA结肠腺癌数据集结肠癌组织的CLCA1、GCG、SLC26A3、NR1H4、FABP1、GUCA2A、UGT2A3、CPT2和MS4A12 9个核心基因均下调(P均<0.05),其中CLCA1高表达结肠癌患者的总生存期和无病生存期均长于低表达组(P均<0.05),免疫组织化学染色结果在蛋白质水平也验证了结果的准确性。结论CLCA1可能在结肠癌的发展中起关键作用,可作为进一步诊断和治疗的潜在生物标志物。
简介:摘要目的探讨药离子渗透疗法治疗寻常型、节段型白癜风的治疗效果及其安全性。方法应用临床分组比较的开放性研究,选择寻常型、节段型白癜风1112例,实施药离子渗透疗法,连续治疗12周,分别于3、7、12周进行临床观察分析,记录数据,评价疗效及其安全性。结果其中1092例患者治疗3、7、12周的显效率超过95%,12例患者中途选择放弃治疗,8例患者未遵医嘱,疗效不佳;通过观察,不良反应发生率低于3%。结论药离子渗透疗法治疗寻常型、节段型白癜风,可以取得非常满意的临床疗效,且不良反应轻微,适应症非常广泛,没有年龄限制,对高龄与低龄患者都非常安全。因此,该技术值得在白癜风治疗领域中推广应用。
简介:摘要目的探讨药离子渗透疗法治疗寻常型、节段型白癜风的治疗效果及其安全性。方法应用临床分组比较的开放性研究,选择寻常型、节段型白癜风1112例,实施药离子渗透疗法,连续治疗12周,分别于3、7、12周进行临床观察分析,记录数据,评价疗效及其安全性。结果其中1092例患者治疗3、7、12周的显效率超过95%,12例患者中途选择放弃治疗,8例患者未遵医嘱,疗效不佳;通过观察,不良反应发生率低于3%。结论药离子渗透疗法治疗寻常型、节段型白癜风,可以取得非常满意的临床疗效,且不良反应轻微,适应症非常广泛,没有年龄限制,对高龄与低龄患者都非常安全。因此,该技术值得在白癜风治疗领域中推广应用。
简介:摘要水处理系统传统的工艺一般为预处理+阴阳床(一级除盐)+混床(二级除盐)+后处理。20世纪70年代以来,随着膜技术的发展与推广,反渗透技术以其优良的技术性能逐渐取代了复床除盐工艺,于是化水处理工艺改进为预处理+反渗透+混床+后处理。但由于反渗透设备出水电阻率较低,对于原水含盐量比较高的系统,为了避免混床离子交换器的频繁再生,在二级除盐系统中采用阴阳床+混床工艺,于是水处理工艺进一步改进为预处理+反渗透十阴阳床+混床+后处理。