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  • 简介:目的利用逆病毒表达载体快速构建梯度过表达人MTA1稳转单克隆细胞系。方法利用噬菌斑原位杂交筛选人肺噬菌体文库,以阳性克隆为模板,RT-PCR获得人MTA1完整CDS序列。以逆病毒表达载体pMX为基础,经过多次酶切连接,构建逆病毒表达载体pMX—MTA1-flag—IRES—EGFP。将构建好的逆病毒载体系统,转染293-gag/pol细胞,包装出含该表达载体的逆病毒颗粒。以含病毒上清多次感染HCT116细胞,获得稳定转染MTA1的HCT116多克隆细胞系。将该多克隆细胞系按合适比例稀释后接种至10cm大皿,获得大量单克隆细胞系,以GFP为筛选标志,筛选不同荧光强度的单细胞克隆进行扩增并分析MTA1与GFP表达水平的线性关系。结果测序结果显示成功克隆出人MTA1表达序列。免疫荧光、WesternBlot结果证实成功构建出梯度过表达MTA1的稳转细胞系。相关性验证结果显示构建的非融合载体MTA1与GFP的表达呈明显的线性相关,相关系数r=0.932,P〈0.01。结论利用逆病毒表达系统,快速成功构建并筛选出MTA1与GFP非融合梯度过表达稳转单克隆细胞系,为MTA1基因功能研究提供了良好模型。该逆转录病毒平台可用于快速建立其他基因的稳转单克隆细胞系。

  • 标签: MTA1 GFP 逆病毒 稳转 梯度过表达 单克隆
  • 简介:锁孔微创神经外科手术经十余年的发展,应用范围不断扩大,技术水平日趋成熟。为规范应用锁孔手术技术,交流和总结经验,树立正确的微创理念,由苏州大学附属第二医院、沈阳军区总医院联合举办的第十一届国家级神经外科锁孔微创手术继续教育学习班(编号:2011-04-04-079)将于2011年11月4日至6日在沈阳举行。形式包括:专题讲座、

  • 标签: 神经外科 锁孔微创手术 继续教育 学习班
  • 简介:2010’广州神经肿瘤学术论坛将于2010年12月24-27日在广州举行。本次论坛由中国抗癌协会神经肿瘤专业委员会主办,中山大学肿瘤防治中心承办。论坛将邀请欧美、日本、韩国及国内神经肿瘤领域的著名专家对神经肿瘤领域的热点问题和研究进展做专题报告:

  • 标签: 神经肿瘤 规范化治疗 论坛 神经系统 广州 学术
  • 简介:中国抗癌协会神经肿瘤学专业委员会第二届学术会议暨神经系统肿瘤基础研究及临床诊治进展学习班(国家继教项目:2005-04-08-009)定于2005年11月11日-14日在天府之国的名城-成都举行。大会由中国抗癌协会神经肿瘤专业委员会主办,四川大学华西医院神经外科承办。内容涵盖神经外

  • 标签: 专业委员会 中国抗癌协会神经 临床诊治