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  • 简介:目的建立东方田鼠生化与分子遗传学标记检测法。方法参考近交系小鼠,大鼠生化遗传标记检测方法,东方田鼠某些同功酶进行活性测定。根据东方田鼠特异序列,合成引物,扩增东方田鼠基因组DNA,将PCR产物回收,序列分析并进行生物信息学分析。结果东方田鼠Trf,Es-3Ce-2三个生化位点呈现遗传多态性,而Id1,Mod-1,Car-2,Gpd-1,Gpi-1,Hbb,Es-1七个生化位点无遗传多态性,用合成特异引物扩增东方田鼠基因组DNA,得到了丰富多态性资料,其中20只东方田鼠扩增产物进行测序并进行多序列比较,发现10个等位基因以及16个单核苷酸多态性(SNP)位点。结论初步建立了东方田鼠生化及分子遗传学标记,分子遗传学标记生化遗传标记相比,具有杂合率,重复性好,易于操作等优点,这些结果为深入研究东方田鼠遗传标记相比,具有杂合率,重复性好,易于操作等优点,这些结果为深入研究东方田鼠遗传背景,生物进化规律积累了基础资料。

  • 标签: 洞庭湖 日本血吸虫疫区 东方田鼠 分子遗传学标记 生化遗传标记 抗感染性
  • 简介:目的研究猴免疫缺陷病毒SIVmac251在中国恒河猴感染传代过程中产生可能神经侵袭性神经嗜性及其分子机制。方法从静脉感染SIVmac251-155p6N8只实验猴中出现严重神经症状1只猴中,监测病毒及免疫指标变化,观察临床症状、猴脑组织病变,单拷贝PCR扩增病毒gp120序列并分析变异及糖基化位点变化情况。结果感染猴晚期出现明显艾滋病脑病症状,病理切片显示脑组织出现多核巨细胞及神经元变性、坏死。脑基底节分离出单一序列病毒,其氨基酸序列与血浆病毒及感染毒株SIVmac251-155p6序列差异主要位于Gp120V1V4区,并且在C1区66位出现一个糖基化位点缺失。结论SIVmac251在猴体长期传代过程中表现出神经嗜性毒株特征,AIDS脑病研究具有重要意义。

  • 标签: 艾滋病脑病 SIVmac251 GP120 变异 神经嗜性 神经侵袭性
  • 作者: 张丹
  • 学科: 生物学 > 动物学
  • 创建时间:2022-06-14
  • 出处:《今日农业》2022年 第1期
  • 机构:铜仁市碧江区滑石乡人民政府,贵州铜仁554300
  • 简介:本文重点分析基层畜牧兽医动物防疫工作,但是由于目前所需要数据不健全、采用技术手段相对比较落后、专业人才也处于严重短缺状态,导致基层畜牧兽医动物防疫工作很难在实践中得到有效推进。针对目前存在诸多问题,要加强动物疫病监测防控力度,保证动物防疫工作效率得到有效提升。同时,还要对动物防疫工作机制进行完善优化,动物防疫工作条件进行完善,以此来保证基层畜牧兽医动物防疫工作全面有序开展。

  • 标签: 基层畜牧;畜牧兽医;动物防疫;防疫工作
  • 简介:目的利用护骨素核因子κB受体活化子核因子κB受体活化子配体(OPGRANKRANKL)系统,探讨饲粮不同钙水平对生长期WHBE兔骨代谢影响。方法选择21只雄性断奶WHBE兔,随机分为3组(I、II、III组),分别饲以钙水平为095%,110%130%,其他营养水平基本一致饲粮。实验期42d。实验结束,测定兔血清钙(Ca)、甲状旁腺素(PTH)骨源性碱性酶(BALP)含量;分别运用荧光定量PCR法免疫组织化学法WHBE兔骨组织进行OPGRANKRANKL基因转录蛋白表达分析。最后以RANKL/OPG比值为指标,评估WHBE兔骨代谢与饲粮钙水平间相关性。结果实验结果表明,I、II、III组在血清Ca、PTH含量BALP活力上差异无显著性(P>0.05)。WHBE兔骨组织RANKLmRNA表达水平和RANKL/OPGmRNA比值均以II组最低,与I、III组差异有显著性(P<0.05)。钙水平WHBE兔骨组织OPGRANKRANKL蛋白表达影响显著(P<0.01),II组III组OPG蛋白表达阳性指数均极显著高于I组(P<0.01);而II组兔骨组织RANK蛋白表达阳性指数则极显著低于I组III组(P<0.01),RANKL/OPG蛋白表达阳性指数比值以II组最低,与I组差异有显著性(P<0.01)。此外,WHBE兔骨组织RANKL/OPGmRNA比值蛋白表达阳性指数比值均与饲粮钙水平间存在显著二次曲线相关(R2=04068,08433,P<0.05,P<0.001)。结论生长期WHBE兔骨代谢与饲粮钙水平间呈显著相关性,当饲粮钙含量为110%时,生长期WHBE兔可获得较理想骨代谢水平。

  • 标签: OPG-RANK-RANKL系统 WHBE兔 骨代谢
  • 简介:目的观察马齿苋及其不同提取部位改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗糖脂代谢紊乱影响。方法应用小剂量链脲佐菌素加高热量饲养方法建立实验性2型糖尿病大鼠模型,随机分为模型组、马齿苋组、马齿苋MH部位组、马齿苋MS部位组及多烯康对照组,并设正常对照组,各组大鼠相应地给与灌胃治疗12周;检测各组糖代谢及脂代谢血生化指标。结果糖代谢方面,马齿苋组能明显改善实验性2型糖尿病大鼠糖耐量异常,FINS明显低于模型组,相应地ISI显著提高;马齿苋MH部位具有改善实验性2型糖尿病大鼠糖耐量异常趋势,FINS水平有所下降,ISI有所增加,与模型组比较接近统计学意义;而马齿苋MS部位2型糖尿病大鼠糖耐量异常影响不大,改善胰岛素作用不明显。脂代谢方面,马齿苋组与模型组比较,显著升高血清HDL-C水平,同时降低血清TC、TGFFA水平。马齿苋MH部位与模型组比较,显著降低血清TG水平,同时降低血清TCFFA水平,但升高血清HDL-C水平不明显。马齿苋MS部位与模型组比较,显著降低血清FFA水平,降低血清TG接近统计学意义,但对血清TCHDL-C水平无明显影响。结论马齿苋能明显改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗糖代谢异常。马齿苋MH部位具有改善糖代谢趋势,而马齿苋MS部位糖代谢影响不明显。马齿苋及其马齿苋MH部位、马齿苋MS部位2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗脂代谢异常均有明显改善作用,但其侧重点各有不同,可能与其作用环节机制不同有关。

  • 标签: 马齿苋 糖尿病 2型 胰岛素 代谢
  • 简介:RobertsA等人为了评价疫苗抗SARS病毒药物有效性,建立了金黄地鼠小动物模型。他们用滴鼻方法用SARS病毒感染了5周龄金黄地鼠。根据检测结果,SARS病毒在肺脏鼻甲骨中以滴度复制。下呼吸道病毒滴度在攻毒第2天达到高峰,第7天后消失。在攻毒后第14天,在部分地鼠鼻甲骨检测出有低滴度病毒复制。病毒在攻毒早期就在上呼吸道复制,病理检查发现呼吸道上皮细胞坏死,随后引起炎症反应,局部硬化,病毒被清除,肺组织最终被修复。

  • 标签: 金黄地鼠 病毒感染 SARS病毒 动物模型 检测结果 病毒滴度
  • 简介:目的探讨自制冷冻载体冷冻保存昆明小鼠体内原核期胚胎可行性。方法首先,比较了两种流行商业化载体:开放式拉长麦管(openpulledstraw,OPS)冷冻帽(cryotop)开展小鼠原核胚玻璃化冷冻保存效果。其次,以cryotop为对照,利用自制简易载体(cryotip)开展小鼠原核期胚胎玻璃化冷冻保存。之后,利用ANOVA各组胚胎在复苏后体外培养卵裂率、囊胚率进行统计分析。结果OPScryotop两组之间,胚胎在玻璃化冷冻/复苏后发育2-细胞率、4-细胞率囊胚率差异均无显著性(P〉0.05),但cryotop冷冻效果更接近对照组;cryotip玻璃化冷冻载体与cryotop相比,胚胎复苏后各组差异均无显著性(P〉0.05),数值上除了2-细胞发育率外,cryotip其他几项结果都稍微高于cryotop组。结论OPS,cryotop,cryotip冷冻保存昆明小鼠体内原核期胚胎均是可行;cryotop在冷冻效果上要优于OPS,笔者自制cryotip因其成本低,制作简单,操作安全可靠,在实验中替代昂贵商业化载体OPScryotop是可行

  • 标签: 昆明小鼠 原核胚 不同冷冻载体 玻璃化冷冻
  • 简介:目的:采用电生理研究方法,观察脑源性神经营养因子(BDNF)基因修饰骨髓间充质干细胞脊髓损伤修复作用。方法随机将大鼠分成3组:空白组10只(只切除椎板,暴露脊髓硬脊膜);SCI组10只;SCI术后细胞移植组10只;从以上三组大鼠随机抽取8只于细胞移植后1d、7d、14d、21d、30d、60d进行SEP(皮层体感诱发电位)、MEP(运动诱发电位)等电生理检测技术,并观察大鼠运动评分恢复程度。结果细胞移植4d后,大鼠饮食活动开始增加;后肢变化过程如下:损伤后1~4d损伤侧后肢迟缓性瘫痪,拖地行走,损伤侧后肢由损伤初期运动减弱逐渐恢复,损伤后5~9d损伤侧后肢痉挛性瘫痪;10~14d损伤侧下肢恢复少量活动,损伤侧后肢恢复至较损伤前稍弱状态;15~21d损伤侧后肢活动能力较之前有明显改善,至30d损伤侧后肢活动能力及肌张力恢复程度最明显,30d以后无更明显改善。免疫组化发现损伤处诱导标记骨髓间充质干细胞存活,行为学观察发现细胞移植改善了损伤大鼠运动能力。结论骨髓间充质干细胞经BDNF基因修饰后可以促进脊髓损伤大鼠神经再生及部分传导功能恢复。

  • 标签: 骨髓间充质干细胞 BDNF基因 脊髓损伤 电生理
  • 简介:目的探讨制作兔VX2肝癌模型技术、新方法。方法将新西兰兔30只随机等分为3组,分别为嵌插组、改良嵌插组经皮穿剌组。分别按不同方法建立肝癌模型,于建模后第1、2、3周分别进行CT扫描,评估肿瘤大小。3周后处死动物进行解剖,观察肝脏成瘤及转移情况,比较各组转移率,并行常规病理组织学检查。结果30只动物建模成功28只,成功率93%,经皮穿剌组有2只肝脏未见种植灶,嵌插组改良嵌插组全部种植成功。改良嵌插组腹壁转移率显著低于嵌插组经皮接种组。结论改良嵌插法3周内不会形成接种部位腹壁以及远处转移,是一种理想移植性肝癌模型建模方法。

  • 标签: 兔VX2肿瘤 模型 嵌插改良技术
  • 简介:用原子吸收光谱法测定了铜、铁、锌、锰、铬、镁、铅、钾在SPF大鼠心、肝、肾、肺、脾中含量,发现铜、锌、铁、锰、在肝脏中浓度晟(P<0.001);铬、钾在肺脏中浓度最高(P<0.001);镁、铅在各脏器中浓度无显著性差别(P>0.05)。

  • 标签: 大鼠 脏器 微量元素 含量测定 原子吸收光谱法
  • 简介:长爪沙鼠是具有糖尿病潜质实验动物,但普通群体中糖尿病发病率很低,远远不能满足研究需求。我们在前期进行长爪沙鼠近交系培育过程中偶然发现其中一个分支具有高血糖特性,因此其进行了定向培育。经过20代全同胞近亲繁殖,获得一个自发性Ⅱ型糖尿病模型近交系,该品系动物具有空腹血糖升高、糖耐量受损、胰岛素抵抗、多器官病变多个糖尿病相关基因表达异常等糖尿病典型特征,其糖尿病特征模型比率达到60%左右。我们利用该模型进一步开展发病机制研究,发现肥胖型糖尿病非肥胖型糖尿病具有脂肪组织分布细胞大小水平等多方面的差异。这些研究结果证明糖尿病长爪沙鼠近交系是理想Ⅱ型糖尿病模型,将为糖尿病发生机制、脂肪组织在糖尿病发生中作用、糖尿病敏感药物筛选等诸多糖尿病相关研究提供新材料新思路。

  • 标签: 长爪沙鼠 Ⅱ型糖尿病 肥胖 瘦素 脂联素
  • 简介:目的探讨西藏小型猪生理生化指标特性。方法采用全自动血球计数仪和全自动生化仪,1.5—5月龄西藏小型猪(♂21,♀24)血液部分生理生化指标进行测定分析。结果西藏小型猪血液生理指标的性别差异不显著,部分生化指标性别差异显著;但多数指标在不同月龄间差异极显著(P〈0.01)或显著(P〈0.05),并有近半数项目随月龄增长呈减少或增加趋势,其余多无明显变化规律。所测生理生化指标中部分与巴马小型猪相近,与普通猪差异较大,与人类水平接近。结论西藏小型猪、其他小型猪人类生理生化特性有一定相似性。

  • 标签: 西藏小型猪 生理指标 生化指标
  • 简介:回顾国外NOD小鼠模型研究干燥综合征病理所取得成果。查阅PUBMED上自2000年以来相关文献,发现研究成果为疾病早期细胞凋亡疾病期自身免疫反应提供了有利证据。说明NOD小鼠模型在干燥综合征病理机制研究中具有重要作用,同时新抗原受体发现为今后研究提供了方向。

  • 标签: NOD小鼠模型 干燥综合征 病理机制
  • 简介:免疫缺陷动物是研究免疫相关疾病良好动物模型。Beige-Nude小鼠是T淋巴细胞NK细胞同时缺陷小鼠,其T细胞NK细胞活性很低,最初为肿瘤研究而培育。从上世纪七十年代起,学者们其免疫学特性进行了广泛而深入研究,为其在其他领域应用奠定了免疫学基础。

  • 标签: 免疫缺陷小鼠 T/NK缺陷 免疫学特性
  • 简介:目的建立人肝癌细胞系HCC-9724(简称H)淋巴结转移模型,研究肿瘤转移机理。方法采用裸鼠肝脏原位移植法,接种肿瘤细胞,取其淋巴结转移灶反复肝内接种,连续传三代后,观察其转移特性,采用SABC法测定淋巴结中nm23Ⅳ型胶原酶表达。结果裸鼠原位接种50d,肝内长出约1.7cm×6.0cm大小肿瘤,呈分叶状,质地较软,周围血供丰富,瘤组织与邻近脏器粘连,有明显浸润转移,经裸鼠三次筛选后肿瘤潜伏期短(15d),瘤体大,形成广泛肠系膜淋巴结转移,淋巴结中Ⅳ型胶原酶表达呈强阳性;而nm23呈弱阳性。结论采用裸鼠肝原位移植法,反复筛选,获得了人肝癌淋巴结转移模型。

  • 标签: 原位移植 裸鼠 肿瘤 人肝癌 淋巴结 Ⅳ型胶原酶
  • 简介:目的克隆广西巴马小型猪PGC-1α基因编码区(CDS)序列,利用RT-PCRQRT-PCR方法分析PGC-1αmRNA组织表达情况。方法本实验以广西巴马小型猪背最长肌cDNA为模版,PCR扩增PGC-1α基因CDS序列,将其连接至pEASY-T5载体,转染细菌、验证序列测定;通过RT-PCR半定量QRT-PCR实时荧光定量检测PGC-1α基因在小型猪多个组织中表达情况。结果克隆获得广西巴马小型猪PGC-1α基因CDS序列,全长2391bp,编码796个氨基酸,与参考序列同源性为99.9%,两处碱基发生同义突变,分别是C-A1105GA1524;PGC-1α基因在广西巴马小型猪心脏肾脏中表达丰度最高,其次是肝脏、皮下脂肪背最长肌,而在胰腺中未检测到其表达。结论成功克隆了广西巴马小型猪PGC-1α基因编码区序列并进行了多种组织表达分析,为后续研究PGC-1α在小型猪2型糖尿病发生过程中作用途径打下基础。

  • 标签: 广西巴马小型猪 PGC-1Α基因 序列分析 组织表达
  • 简介:诸氏鲻虾虎鱼是我国特色海洋鱼类,具有诸多实验动物培育与应用优势。本文概述了诸氏鲻虾虎鱼生物学特性、封闭群近交系培育、质量控制等实验动物化研究进展,并介绍了诸氏鲻虾虎鱼作为海洋实验鱼类在海洋环境监测、水生态毒理等研究应用。结合目前研究应用现状,诸氏鲻虾虎鱼质量标准化、近交系培育及其在功能基因组等领域应用进行了展望。

  • 标签: 诸氏鲻虾虎鱼 生物学特性 近交系 封闭群
  • 简介:目的克隆日本大耳白兔白毛黑眼系(白毛黑眼兔)眼部虹膜Trp1、Trp2基因,获取其完整外显子序列。进一步推测这两个基因编码蛋白,并分析其特征。方法从白毛黑眼兔黑色虹膜组织中提取RNA,并反转录成cDNA。利用来自小鼠、大鼠同源引物,扩增获得白毛黑眼兔Trp1、Trp2基因外显子片段。然后已知片段进行3’RACE5’RACE,从而获得白毛黑眼兔Trp1、Trp2基因外显子完整序列。利用相关软件获得序列进行翻译分析。结果首次获得了白毛黑眼兔Trp1、Trp2基因外显子全序列。该实验兔Trp1基因编码序列全长1604个碱基,其核苷酸序列与人相似度为87.9%,与小鼠相似度为82.7%。TRP1成熟蛋白包含513氨基酸,氨基酸序列与人相似度为89.8%,与小鼠相似度为86.6%。该实验兔Trp2基因序列全长1554个碱基,其核苷酸序列与人相似度为83.2%,与小鼠相似度为81.9%。TRP2成熟蛋白包含494个氨基酸,其序列与人一致度为84.2%,与小鼠一致度为84.4%。结论本研究获得TRP1、TRP2序列与已知家兔酪氨酸相关蛋白家族成员TYR序列进行比对,结果显示这三种蛋白之间有较高相似度,并且TRP1TRP2蛋白序列表现出了酪氨酸酶家族结构上保守性特有的结构特征。

  • 标签: 白毛黑眼兔 酪氨酸相关蛋白1 酪氨酸相关蛋白2
  • 简介:目的建立多重PCR技术鉴定选育剑尾鱼RR-B系方法.方法根据可明显鉴定剑尾鱼RR-B系6特异性微卫星引物Msa012、Msa014、Msa033、Msb025、Msd003、Msd051,采用不同组合方式RR-B系剑尾鱼红眼红体非选育剑尾鱼进行多重PCR扩增.结果引物组合1(Msa014、Msb025、Msd003)组合2(Msa012、Msa033、Msd051)两个三重PCR反应体系能清楚扩增各个微卫星座位,且各目的片段之间无干扰,易于识别,引物组合1排除概率为99.98%,引物组合2排除概率为99.96%,能准确鉴定剑尾鱼RR-B系.结论本检测方法具有较高稳定性,可快速准确鉴定剑尾鱼RR-B系.

  • 标签: 剑尾鱼 近交系 微卫星标记 多重PCR
  • 简介:目的研究中国版纳小型猪近交系动脉异种靶抗原α-Gal分布半定量分析,为研究异种移植超急性排斥反应和异种生物材料提供资料。方法通过亲和免疫组织化学法图象分析10头版纳小型猪四级动脉进行α-Gal分布半定量研究。结果(1)各级血管组织中血管内皮细胞阳性表达明显,弹性纤维、胶原纤维和平滑肌细胞未见表达,外膜有微弱表达;(2)图象分析显示,管径越细,其内皮细胞表达越高(P<0.01),各级动脉内皮细胞阳性表达面积密度比组间差异显著(P<0.01),t检验发现每两组间动脉内皮细胞阳性表达面积密度比相差显著(P<0.01)。结论(1)版纳小型猪动脉内皮细胞均有异种抗原α-Gal分面,但是分布不均匀;(2)微血管血栓是异种移植超急性排斥反应中重要环节,小型猪异种器官移植,彻底解决异种移植超急性排斥反应关键是防治微血管栓塞。

  • 标签: 中国版 纳小型猪 近交系 动脉异种移植 靶抗原