简介：目的:探讨miR-34b在白血病细胞株表达和启动子区CpG岛甲基化状态及其临床意义。方法:选择10例非血液系统疾病患儿作为对照组,收集对照组骨髓细胞标本,另选择HL-60和K562白血病细胞株,采用荧光定量PCR检测对照组骨髓细胞、HL-60和K562细胞株的miR-34b相对表达量,并用甲基化特异性PCR检测各组miR-34b甲基化状态。用地西他滨处理HL-60和K562细胞株,用同样方法检测两种细胞株miR-34b相对表达量及甲基化状态。采用脂质体转染法将Has-miR-34b转染至K562细胞株,根据转染是否成功分为未转染组、阴性对照组和Has-miR-34b转染组,记录各组培养后不同时间细胞的增殖情况,并计算增殖抑制率。结果:对照组miR-34b相对表达量为(5.23±0.75),HL-60相对表达量为(0.05±0.01),K562相对表达量为(0.04±0.01),3组间比较差异具有统计学意义(F=44.812,P=0.000)。HL-60细胞株和K562细胞株分别在启动子区CpG岛存在甲基化状态,10例非血液系统疾病患儿骨髓细胞无甲基化现象。经过地西他滨处理后HL-60和K562细胞株miR-34b表达水平均显著增加(P<0.05);加地西他滨前后白血病细胞株启动子区CpG岛均存在甲基化,但是加药后甲基化明显减弱,提示地西他滨对启动子区CpG岛甲基化具有抑制作用。培养48、72、96和120h后Has-miR-34b转染组细胞增殖抑制率分别为24.8%、46.7%、33.6%和24.7%,细胞增殖率均显著低于未转染组和阴性对照组,组间比较差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:白血病细胞株miR-34b启动子区CpG岛甲基化使其表达水平显著降低,这也是miR-34b对细胞株增殖抑制作用降低的原因;miR-34b也有可能是一种抑癌基因参与调控白血病的发生、发展。

简介：摘要目的探讨胰腺癌组织织间质表皮转化因子(c-MET)的表达与循环miR-34a、miR-449水平的相关性及其临床意义。方法收集2015年3月至2017年3月间嘉兴医学院附属第二医院行手术治疗并经病理证实的41例胰腺癌患者的临床资料。通过免疫组织化学染色检测胰腺癌组织及其匹配的癌旁正常胰腺组c-MET表达，根据测定结果将患者分为c-MET阳性组与c-MET阴性组。采集患者手术前和手术后3个月外周血，应用荧光定量PCR法检测循环miR-34a和miR-449水平。分析癌组织c-MET表达与患者临床病理参数、预后及循环miR-34a、miR-449水平的关系。分析循环miR-34a和miR-449水平对胰腺癌TNM分期、淋巴结转移和预后的评估价值。结果胰腺癌组织c-MET阳性率明显高于癌旁正常组织(63.4%比24.4%)，差异有统计学意义(P<0.05)。与c-MET阴性患者比较，c-MET阳性患者TNMⅢ/Ⅳ期者居多(73.1%比33.4%)，淋巴结转移率高(76.9%比46.7%)，生存时间短(29.5个月比35.0个月)，生存率低(38.5%比53.3%)，差异均有统计学意义(P值均<0.05)。术前c-MET阳性患者循环miR-34a、miR-449水平明显低于c-MET阴性患者(0.228±0.068比0.524±0.106、0.252±0.063比0.432±0.094，P<0.05)，术后c-MET阳性患者循环miR-449水平仍明显低于c-MET阴性患者(0.414±0.088比0.512±0.114，P<0.05)，但两组间miR-34a水平的差异无统计学意义。术前循环miR-34a、miR-449水平对胰腺癌TNM分期、淋巴结转移及预后有预测价值(P<0.05)。结论miR-34a、miR-449靶向结合胰腺癌组织c-MET，有可能成为潜在的胰腺癌标志物。

简介：目的探讨卵巢癌组织中miR-29c、miR-133b和miR-1的表达水平,分析3者与卵巢癌临床病理特征的关系。方法收集本院确诊的65例卵巢癌患者经手术切除的上皮性卵巢癌组织标本（卵巢癌组）,采用实时定量RT-PCR（qRTPCR）法检测miR-29c、miR-133b及miR-1水平,收集对应卵巢癌患者的临床病理参数（年龄、临床分期、分化程度、组织类型及淋巴结转移）,同时选取32例正常卵巢上皮组织（正常组）和39例良性卵巢上皮囊肿组织（良性组）作对照,以正常组的各指标均数为界值,将卵巢癌组miR-29c、miR-133b及miR-1水平分为高水平组（〉正常组）和低水平组（≤正常组）,比较miR-29c、miR-133b及miR-1不同表达水平与卵巢癌临床病理参数的关系,同时分析卵巢癌组织中3者水平的关系。结果卵巢癌组miR-29c水平高于正常组和良性组,而miR-133b和miR-1水平均低于正常组和良性组,差异有统计学意义（P〈0.05）;卵巢癌组miR-29c、miR-133b及miR-1水平均与分化程度有关,miR-29c水平与临床分期及淋巴结转移有关,而miR-133b亦与淋巴结转移有关,差异均有统计学意义（P〈0.05）;卵巢癌miR-29c水平与miR-133b和miR-1均呈负相关（r=-0.541、-0.361）,miR-133b与miR-1呈正相关（r=0.447）,差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论卵巢癌患者组织中miR-29c呈高表达,miR-133b及miR-1呈低表达,与临床病理学特征有关,且在卵巢癌诊断中有一定的价值,可用于辅助卵巢癌的诊断和病情评估。

简介：摘要目的探讨乳腺浸润性导管癌中CXC趋化因子配体10(CXCL10)与miR-34c-5p的靶向调控关系。方法收集2016年3月至2017年3月在中山大学附属第三医院行手术切除且经病理确诊的乳腺浸润性导管癌组织(n＝56)和乳腺良性组织(n＝14)，采用HTA2.0和miRNA4.0芯片检测CXCL10和miR-34c-5p在两组中的表达并用反转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)进行验证；采用Pearson相关分析两者表达的相关性并用IPA软件预测靶向关系；采用双荧光素酶报告基因系统验证二者的作用靶点，最后在乳腺癌细胞株MCF-7、ZR-75-30中进一步验证。结果基因芯片检测结果显示，CXCL10 mRNA在乳腺浸润性导管癌组织和乳腺良性组织中的表达量分别为7.135±1.350和4.348±0.722，miR-34c-5p mRNA在两组中的表达量分别为1.309(1.001，2.055)和3.948(3.278，4.371)，差异均有统计学意义(t＝7.628，P<0.001；Z＝－4.405，P<0.001)；Pearson相关分析显示，CXCL10 mRNA和miR-34c-5p mRNA的表达呈负相关(r＝－0.327，P＝0.004)。CXCL10 mRNA的表达与乳腺浸润性导管癌患者人表皮生长因子受体-2(t＝2.415，P＝0.019)和Ki-67(t＝2.483，P＝0.016)的表达有关；miR-34c-5p mRNA的表达与乳腺浸润性导管癌患者组织学分级(χ2＝8.626，P＝0.013)和雌激素受体/孕激素受体(Z＝－2.195, P＝0.028)的表达有关。RT-qPCR结果显示，CXCL10 mRNA在乳腺浸润性导管癌组织和乳腺良性组织中的相对表达水平分别为6.059±1.714和1.000±0.232，miR-34c-5p的相对表达水平分别为0.093±0.004和1.000±0.244，差异均有统计学意义(t＝3.484，P＝0.002；t＝5.112，P<0.001)，该结果与芯片检测结果一致。双荧光素酶报告基因结果表明，过表达miR-34c-5p后，在MCF-7细胞中WT-CXCL10和MUT-CXCL10报告载体的荧光素酶活性分别为1.117±0.040和1.647±0.031；在HeLa细胞中，两者的荧光素酶活性分别为0.885±0.051和1.430±0.020，差异均有统计学意义(t＝18.120，P<0.001；t＝24.040，P<0.001)。分别转染miR-34c-5p和miR-NC后，ZR-75-30细胞中CXCL10的相对表达水平分别为0.008±0.000和0.012±0.000；MCF-7细胞中CXCL10的相对表达水平分别为0.315±0.000和0.386±0.004，差异均有统计学意义(t＝20.384，P<0.001；t＝3.473，P＝0.026)。结论miR-34c-5p在乳腺浸润性导管癌中表达下调，而CXCL10表达上调；CXCL10是miR-34c-5p的靶基因。

简介：一提起快乐A、B、C，大家一定会马上想到快乐英语吧!但我今天要说的A、B、C，只是和数字1、2．3一样，表示几种方案。

简介：

简介：A“速成”这个词已经用了很多年了,记得50年代时就有叫“速成识字法”、“速成中学”之类的。效果如何,无从考证,但从昙花一现般地速来速去似乎就可以做出判断了。真没想到,时至20世纪末,人类文明和科学技术高度发达的今天,又爆出了“速成爱情”,每到周末的黄金时段,您如果关注一下电视屏幕就会发现,丰富的电视频道里处处都充满了“爱”。《玫瑰之约》、《浪漫久久》、《相

简介：虽然网络股一蹶不振,但电子商务的议题却始终是个热门话题。在所谓的B2C电子商务被投资人严厉质疑后,B2B则随着各大研究机构所勾勒的市场远景而成为下一波的抢手货。然而还记得在短短的两年前,我们对B2C电子商务的前景也有过极度乐观的预期,不是吗?现在却对之弃如蔽履。接着最近美国又有一些分析报告指出B2B的发展也存在着一些

简介：下课铃响，几个学生拿着同一道专业四级试题，面带笑容地朝我走来。“老师，这道题您选什么？”定睛看：Westoodstill,gazingoutoverthelimitles_________ofthedesert.

简介：丰田光冠这个车名对不少中国车迷来说可能有些陌生,国内汽车媒体常常会提到皇冠、花冠,但光冠就很少能看见了。丰田光冠究竟是怎么样的一款车？对国人来说最容易明白的介绍,可能就是光冠是蓝鸟的世仇。而对于日本车迷来说,半个世纪前如火如荼的＂BC战争＂更是一段佳话。BC战争的B就是蓝鸟Bluebird,C则是光冠Corona。

简介：

简介：多年来职业技术学校教材不统一，教学的随意性较大。教法以及教学内容与中学重复较多，加之实习间隔时间长，学生对语文兴趣不大，语文成绩也普遍较差，一些教师甚至认为语文是一种摆设课，可有可无，在这种情况下，怎么样才能既传授知识，又培养能力？通过什么方式培养学生的能力？这都成为语文教学的当务之急。下面就笔者多年的教学实践，谈谈语文教学ABC。所谓ABC，就是指语文教学中的三个基本环节，即备课、课堂、课后。

简介：A、B、C、D分别在1、2、3、4号位，第1次前后排字母换位，第2次左右排字母换位．这样交替下去，第10次换位后，C应在几号位子？如果更多次地换位又怎样计算呢？

简介：为子孙留下更多的绿色自治区人大和政府作出决定,今年7月份继续开展“中华环保世纪行在内蒙古”活动。这次活动的主题是“维护生态平衡——为子孙后代留下更多的绿色”。我区是今年全国环保执法检查的十个重点省区之一,为做好各项准备工作,迎接全国大检查,自治区人大、政府要求各地首先认真搞好自查工作。“中华环保世纪行在内蒙古”活动,是1993年由

简介：AbstractBackground:Long non-coding RNA (lncRNA) actin filament-associated protein 1 antisense RNA 1 (AFAP1-AS1) functions as a competing endogenous RNA to regulate target genes expression by sponging microRNAs (miRs) to play cancer-promoting roles in cancer stem cells. However, the regulatory mechanism of AFAP1-AS1 in cervical cancer (CC) stem cells is unknown. The present study aimed to provide a new therapeutic target for the clinical treatment of CC.Methods:Hyaluronic acid receptor cluster of differentiation 44 variant exon 6 (CD44v6)(+) CC cells were isolated by flow cytometry (FCM). Small interfering RNAs of AFAP1-AS1 (siAFAP1-AS1) were transfected into the (CD44v6)(+) cells. The levels of AFAP1-AS1 were measured by quantitative real-time PCR (qRT-PCR). Sphere formation assay, cell cycle analysis, and Western blotting were used to detect the effect of siAFAP1-AS1. RNA pull-down and luciferase reporter assay were used to verify the relationship between miR-27b-3p and AFAP1-AS1 or vascular endothelial growth factor (VEGF)-C.Results:CD44v6(+) CC cells had remarkable stemness and a high level of AFAP1-AS1. However, AFAP1-AS1 knockdown with siAFAP1-AS1 suppressed the cell cycle transition of G(1)/S phase and inhibited self-renewal of CD44v6(+) CC cells, the levels of the stemness markers octamer-binding transcription factor 4 (OCT4), osteopontin (OPN), and cluster of differentiation 133 (CD133), and the epithelial-mesenchymal transition (EMT)-related proteins Twist1, matrix metalloprotease (MMP)-9, and VEGF-C. In the mechanism study, miR-27b-3p/VEGF-C signaling was demonstrated to be a key downstream of AFAP1-AS1 in the CD44v6(+) CC cells.Conclusions:LncRNA AFAP1-AS1 knockdown inhibits the CC cell stemness by upregulating miR-27b-3p to suppress VEGF-C.

简介：摘要目的探讨微小RNA-214（miR-214）和miR-181c在胃癌组织中的表达水平及对预后的影响。方法选取2014年1月至2015年1月于川北医学院附属医院收治的68例胃癌患者为研究对象，均接受手术治疗，出院后随访1~60个月。利用实时荧光定量PCR技术检测患者癌组织和癌旁组织miR-214、miR-181c相对表达量；利用Kaplan-Meier曲线进行生存分析；Cox多因素回归分析影响胃癌患者预后的独立危险因素。结果胃癌组织中miR-214、miR-181c表达水平均明显低于癌旁组织，差异有统计学意义（P<0.05）。根据miR-214、miR-181c表达均值将患者分为高表达组和低表达组，miR-214、miR-181c表达水平与年龄、性别、淋巴结是否转移无关，与TNM分期、肿瘤分化程度有关（P<0.05）。患者总生存率为44.12%，miR-214低表达组和高表达组术后5年累积生存率分别为35.71%、57.69%，两组间比较差异有统计学意义（P=0.035）；miR-181c低表达组和高表达组术后5年累积生存率分别为35.55%、60.87%，差异有统计学意义（P=0.024）。Cox多因素回归分析结果显示，TNM分期高（HR=1.569，95% CI：1.029~2.391，P=0.036）、miR-214低表达（HR=1.643，95% CI：1.294~2.087，P<0.001）及miR-181c低表达（HR=1.327，95% CI：1.045~1.685，P=0.021）是影响胃癌患者预后的独立危险因素。结论miR-214、miR-181c在胃癌组织中表达显著下调，与胃癌患者临床病理参数及不良预后有关，参与胃癌的发生发展过程。

简介：

简介：B2C的未来是什么,提供平台服务的B2B2C或许是一条坦途.

简介：摘要目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者癌组织miR系列基因表达水平与手术疗效的相关性。方法分别收集2013年10月至2017年4月的同时收集25例NSCLC手术患者的癌组织和癌旁组织冰冻样本，以及手术前和手术后2周的血清样本。组织totalRNA抽提使用ThemirVanamiRNAIsolationKit（Ambion，Austin，Texas，USA）。血清的totalRNA使用microRNAsIsolationKit（AppliedBiosystems，ForsterCity，CA，USA）抽提。totalRNA溶于DEPC处理水中，零下80度保存。RNA浓度使用Nanodrop2100（NanoDrop，Wilmington，DE）测量。采用qRT-PCR方法检测NSLCLC患者手术前、后血清miR系列基因表达水平，判断血清miR系列基因表达水平与手术效果的关系。结果NSLCLC患者的组织中miR-17-3p、miR-18a、miR-19a、miR-20a、miR-19b-1和miR-92-1基因表达与癌旁组织存在显著差异（P＜0.01）。NSLCLC患者手术后的血清miR-17-3p、miR-18a、miR-19a、miR-20a、miR-19b-1和miR-92-1基因表达与手术前存在明显差异（P＜0.05）。结论miR-17-3p、miR-18a、miR-19a、miR-20a、miR-19b-1和miR-92-1基因表达水平在NSCLC患者癌组织内明显升高，手术切除后血清基因表达明显下降。血清miR系列基因有可能成为预测NSCLC手术预后的分子标志物。

简介：摘要目的探讨LncRNA OIP5-AS1对非小细胞肺癌放射抗拒细胞A549R的放射敏感性影响及作用机制。方法X射线6Gy照射5次A549细胞建立放射抗拒细胞A549R。qRT-PCR检测A549、A549R细胞OIP5-AS1和miR-34c-5p表达水平。转染OIP5-AS1抑制剂或miR-34c-5p模拟物至A549R细胞，OIP5-AS1过表达质粒至A549细胞。流式细胞仪检测细胞凋亡，克隆形成实验检测细胞放射敏感性，蛋白印记检测p-Chk2和p-ATM蛋白表达水平。双荧光素酶实验验证OIP5-AS1与miR-34c-5p之间关系。结果与A549细胞比，A549R细胞中OIP5-AS1表达上调(1.97±0.11︰1.01±0.05，P<0.05)，miR-34c-5p表达下调(0.43±0.02︰1.02±0.06，P<0.05)。沉默OIP5-AS1＋6Gy组A549R细胞中p-Chk2和p-ATM蛋白水平低于沉默对照＋6Gy组(0.43±0.03︰1.39±0.15和0.51±0.05︰1.21±0.11，P<0.05)，但凋亡率增加[(13.29±1.25)%︰(28.47±2.31)%，P<0.05]。过表达OIP5-AS1＋6Gy组A549细胞中p-Chk2和p-ATM蛋白水平高于过表达对照＋6Gy组(1.23±0.13︰0.75±0.06和1.08±0.11︰0.59±0.04，P<0.05)。抑制miR-34c-5p表达逆转了沉默OIP5-AS1对A549R细胞存活分数影响，增敏比为1.42。OIP5-AS1负调控miR-34c-5p表达。结论沉默OIP5-AS1通过上调miR-34c-5p表达增强A549R细胞放射敏感性，为放疗提供潜在的靶点。