简介:摘要目的观察钠钾ATP酶抑制剂哇巴因抑制肝癌HepG2细胞的增殖和分裂效果,并探讨其作用机制。方法不同浓度(0.1、1.0、10.0 μmol/L)哇巴因作用HepG2细胞24 h,以HepG2细胞为对照组,通过细胞活力检测试剂盒(CCK-8法)检测哇巴因对HepG2细胞增殖的抑制作用,细胞免疫荧光共定位(ICC法)检测细胞染色体分离状态,Western印迹检测极光激酶A(AURKA)、雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR、促分裂原活化蛋白激酶(ERK)、p-ERK蛋白表达。结果0.1、1、10 μmol/L哇巴因作用细胞24 h后,细胞生长抑制率分别为(23.50±4.57)%、(49.80±5.32)%和(72.10±5.62)%,与对照组相比差异均有统计学意义,抑制效果呈现浓度依赖性(F=32.8,均P<0.05);细胞免疫荧光共定位显示,1 μmol/L哇巴因作用细胞24 h后,染色体分离发生障碍。与对照组相比,加药组细胞纺锤体直径显著较低,差异有统计学意义(t=9.58,P<0.05)。Western印迹结果显示,1 μmol/L哇巴因作用HepG2细胞24 h后,与对照组相比,AURKA、p-mTOR、p-ERK表达较低(F=16.26,8.32,33.59;P<0.05),哇巴因可阻抑肝癌细胞在裸鼠体内生长(F=370.20,P<0.05)。结论哇巴因通过阻遏激光激酶信号途径,诱发肝癌HepG2细胞染色体分裂障碍、抑制肝癌细胞生长。
简介:经过20多年的改革开放,我国经济所有制结构、产业结构、投资主体、分配格局都发生了巨大的变化。外资企业、私营企业和个体经济等非公有制经济已经成为我国经济、税源的重要增长点,产业结构及其主导产业发生了较大变化,一些投资回报率高的第三产业迅速崛起,收入成倍增长:国民收入分配大幅度向居民倾斜,部分个人手中积聚了数量可观的财富。然而,我国的税收政策、税制结构、税收征管的改革相对滞后,依然将税源的重点压在国有企业、国内企业、生产性行业、传统行业以及商品销售等流动性的税基上,导致税收增长弹性和税收占GDP的比重降低,造成税负不均,制约这些企业发展后劲,税收增长乏力。从社会经济发展方式来看,在粗放型经济增长方式下,企业经济效益低下,生产发展的规模与速度受到严重束缚,因而税收收入增长受到税源相对萎缩的制约。