简介：摘要：宫颈癌是全球女性最常见的恶性肿瘤之一，其致病因子之一是人乳头瘤病毒（HPV）的高风险型感染。HPV E6和E7基因的活化对于宫颈癌的发展起着重要的作用，因此，检测HPV E6/E7 mRNA的表达水平在宫颈癌中的诊断和治疗中具有重要的意义。本文将详细介绍HPV E6/E7 mRNA检测在宫颈癌中的研究进展，包括其原理、检测方法、临床应用。

简介：宫颈癌是唯一病因明确,可预防的恶性肿瘤,因而宫颈癌的早期筛查意义深远。目前,宫颈癌初筛检查项目包括：宫颈人乳头瘤病毒（HPV）分型检测及宫颈液基细胞学（TCT）检查,然而,大多数患者宫颈HPV常常为一过性感染,数月后可转阴,且细胞异型性通常会自行消失,进展为宫颈癌者寥寥无几。因其灵敏度高,特异性较低,临床常出现过度诊治,同时还会造成患者的心理恐慌,增加患者的经济负担,因此寻找更有效的宫颈癌筛查方法成为关注的焦点。

简介：【摘要】：宫颈癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤，严重危害女性的身心健康。现已明确[1]人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)持续感染是引发女性宫颈癌发病的主要原因,其中HPV E6/E7蛋白的持续表达在宫颈癌发生发展过程中起重要作用,本文对 HPV E6/E7mＲNA 的研究进展进行综述，来探讨人乳头状瘤病毒(HPV)E6／E7mRNA 检测在宫颈病变研究中的价值。

简介：摘要目的分析E6/E7mRNA检测在宫颈病变筛查中的应用价值。方法选取本院2017年9月—2018年11月50例因宫颈疾病就诊的患者为研究对象，开展宫颈病变筛查。结果E6/E7mRNA检测方式宫颈疾病检出率为80.0%，与病理学检查比较差异不具备统计学意义（P＞0.05）。E6/E7mRNA检测方式检测宫颈疾病的敏感性、阳性预测值、阴性预测值与病理学检查比较，差异不具备统计学意义（P＞0.05）。结论E6/E7mRNA检测方式对ASC-US分流意义较为明确，能够有效指导阴道镜的合理使用。

简介：

简介：摘要目的探讨人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7 mRNA和高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)检测在液基薄层细胞学检测(TCT)异常的绝经女性宫颈病变筛查中的临床研究。方法本研究为回顾性研究，选取2019年1月至2021年4月北部战区总医院妇产科收治的502例TCT检查结果异常的患者，年龄(56.05±8.46)岁，年龄范围为45~74岁。所有患者进行HPV E6/E7 mRNA、HR-HPV检测及病理检查。结果502例患者的病理结果中，正常及炎症102例，低度鳞状上皮内病变(LSIL)64例，高度鳞状上皮内病变(HSIL)320例，宫颈癌16例。HPV E6/E7 mRNA和HR-HPV在不同病理类型的阳性表达率比较，差异有统计学意义(P<0.001)，两者在正常及炎症、LSIL中，差异有统计学意义(P<0.001)，在HSIL中，差异无统计学意义(P>0.05)。在病理诊断为LSIL及以下中，HPV E6/E7 mRNA的阳性率(53.1%+39.2%)低于HR-HPV(95.3%+66.7%)，差异有统计学意义(P<0.001)，在HSIL及以上病理结果中，HPV E6/E7 mRNA的阳性率(100%+98.1%)高于HR-HPV(100%+95.6%)，差异无统计学意义(P>0.05)。病理诊断在LSIL及以下与HSIL及以上比较，HPV E6/E7 mRNA的阳性表达率前者低于后者，HR-HPV检测的阳性率前者低于后者，差异均有统计学意义(P<0.001)。HPV E6/E7 mRNA在病理诊断为HSIL及以上病变的特异度[55.4%(92/166)]、阳性预测值[80.9%(330/408)]、阴性预测值[97.9%(92/94)]均高于HR-HPV[22.3%(37/166)、71.4%(322/408)、72.5%(37/51)]，差异有统计学意义(P<0.05)，灵敏度[98.2%(330/336)]低于HR-HPV[98.8%(332/336)]，差异无统计学意义(P>0.05)。结论HPV E6/E7 mRNA与宫颈病变病理诊断高低有相关性，联合TCT检测在绝经后女性宫颈病变筛查中有较高诊断价值。

简介：摘要目的探讨高危型人乳头状瘤病毒（HPV）E6/E7 mRNA原位杂交技术在宫颈上皮内瘤变（CIN）分级诊断中的应用价值。方法收集四川大学华西第二医院2019年7月至2020年6月组织病理诊断为CIN与宫颈鳞状细胞癌的病例共261例，其中CIN1级60例、CIN2级41例、CIN3级51例、鳞癌72例和形态学正常的宫颈对照组织37例（HPV阴性10例、阳性27例）。将所有病理组织制成组织芯片，分别进行HE染色、HPV E6/E7 mRNA原位杂交检测及p16免疫组织化学染色，在光镜下完成染色判读，并统计分析其阳性率及阳性模式。结果HPV mRNA原位杂交在CIN1级中主要表现为鳞状上皮基底至中层细胞核与质的点状染色（≤BME）及伴表层细胞内弥散整个核的片状染色（supD），即≤BME+supD模式；在CIN2级中主要表现为基底直至中层之上但未达上皮全层的细胞核与质的点状染色模式（>BME）和部分伴supD染色的模式，即>BME+SupD模式；CIN3级主要表现为>BME模式，且点状染色分布于上皮全层。在CIN1级、2级和3级中，上述3种染色模式差异有统计学意义（P<0.05）。结论HPV mRNA原位杂交技术有助于CIN的准确诊断与分级，且有着比p16免疫组织化学染色更佳的特异性。

简介：目的研究高危型人乳头瘤病毒（high-riskhumanpapillomavirus,hrHPV）E6/E7mRNA在结果意义不明的非典型鳞状上皮细胞（atypicalsquamouscellsofundeterminedsignificance,ASCUS）中的分流效率,探索其在ASCUS分流中的临床价值。方法选取2013年至2015年在青岛市立医院妇科门诊行细胞学筛查结果为ASCUS的女性405例,年龄21~65岁。根据HPV检测方法,分为3组：HC2组、HPV分型组、hrHPVE6/E7mRNA（E6/E7）组。比较3种HPV检测方法分流ASCUS的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值、阴道镜转诊率、CIN2~＋/CIN3~＋检出率。结果（1）E6/E7分流ASCUS的CIN2~＋灵敏度为100.00%（90.51%~100.00%）,CIN2~＋/CIN3~＋的特异度分别为64.84%（53.06%~75.99%）、56.46%（43.98%~69.72%）,阴性预测值分别为100.00%（99.41%~100.00%）、100.00%（99.34%~100.00%）,与HC2和HPV分型比较差异无统计学意义（P〉0.05）。阳性预测值分别为40.79%（37.91%~44.29%）、15.79%（10.07%~20.94%）,高于HC2（P〈0.05）。阴道镜转诊率为47.80%,低于HC2和HPV分型（P〈0.05）。CIN2~＋检出率为19.50%,高于HC2（P〈0.05）。（2）E6/E7分流ASCUS检测CIN2~＋的曲线下面积为0.815,〉HC2和HPV分型（P〈0.05）。结论hrHPVE6/E7mRNA分流ASCUS的灵敏度、特异度与HC2相似,PPV和CIN2~＋检出率更高,阴道镜转诊率更低,可用于ASCUS的分流。

简介：摘要目的研究宫颈鳞癌患者外周血HPV16 E6和E7特异性免疫反应与临床特征和预后关系。方法收集2013—2015年间新疆医科大学附属肿瘤医院经病理明确诊断的72例宫颈鳞癌初治患者，并同期入组75例体检者作为健康对照。采用酶联免疫斑点法检测患者治疗前外周血中经抗原重叠肽E6和E7刺激的T细胞特异性免疫反应。χ2检验和非参数检验分析宫颈鳞癌组和健康对照组的特异性免疫反应的频率和强度表达差异；Spearman法检验抗原特异性免疫反应和T细胞亚群相关性；log-rank法和Cox模型用于单因素和多因素预后分析。结果宫颈鳞癌组HPV16 E6和E7特异性T细胞免疫反应频率均高于健康对照组(51.39%∶29.33%，P＝0.006和45.83%∶25.33%，P＝0.009)，同时免疫反应强度也均高于健康对照组(20.00 SFC/106∶10.76 SFC/106，P<0.001和16.17 SFC/106∶10.72 SFC/106，P＝0.017)。宫颈鳞癌组HPV16 E6特异性T细胞免疫反应强度和外周血CD4＋/CD8＋呈正相关(r＝0.279，P＝0.018)；HPV16 E7抗原特异性T细胞免疫和外周血NK细胞占比和反应强度呈正相关(r＝0.274，P＝0.020)。单因素和多因素分析均显示治疗模式(放疗与放化疗HR＝2.918，95%CI为1.454～5.854，P＝0.003)和E6特异性免疫应答(应答与无应答HR＝0.491，95%CI为0.243～0.990，P＝0.047)是影响患者预后因素。E6特异性免疫应答组患者5年总生存率明显高于无应答组(64%∶41%，P＝0.041)。结论HPV16 E6特异性T细胞免疫反应强度与CD4＋/CD8＋呈正相关，无应答与单纯放疗导致宫颈鳞癌患者预后不良。

简介：摘要目的分析人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7mRNA检测在宫颈病变筛查中的应用价值。方法本文研究对象为宫颈病变患者，研究总例数200例，收取时间在2015年2月1日-2016年2月10日之间，总例数采取抽签分组方式分为两组，观察组100例(实施人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7mRNA检测)、对照组100例(实施TCT检测)，将两组的阳性率、灵敏度和特异度进行对比。结果观察组宫颈病变患者阳性率85.00%显著高于对照组阳性率（P＜0.05）；观察组宫颈病变患者宫颈病变患者灵敏度82.00%和特异度79.00%高于对照组患者（P＜0.05）。结论人乳头瘤病毒(HPV)E6/E7mRNA检测在宫颈病变筛查中具有显著的应用价值，具有较高的阳性率、灵敏度和特异度。

简介：摘要宫颈癌的发病率和死亡率之高令人畏惧，早期发现和早期治疗宫颈癌是降低死亡率和发病率最为有效和必要的手段。目前筛查宫颈癌的方法很多，包括细胞学和病毒学检测等。病毒检测方法包括DNA和mRNA检测，而哪种检测方式能最有效地反应病变发展状态和进展趋势，值得我们深究。本文具体探讨高危型人乳头瘤病毒癌基因E6/E7mRNA检测对宫颈癌筛查的现状和意义。

简介：摘要目的分析人乳头瘤病毒（HPV）与E6/E7mRNA检测在宫颈癌筛查中的相关性表达。方法选取本院2017年10月-2018年10月接诊的80例宫颈病变患者为研究对象。结果80例患者接受阴道镜下活检，不同病变HPV与E6/E7mRNA检测对比，炎症患者、CIN-I患者检出率对比与HPVmRNA表达量对比，无显著差异(P＞0.05)。高级别宫颈病变及宫颈癌与HPVE6/E7mRNA检测结果具备显著性差异。结论HPVE6/E7mRNA检测对年轻女性宫颈癌筛查具备十分重要的意义。

简介：摘要目的通过突变整合于宿主细胞中的人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)16型的E6、E7致癌基因，探索预防和治疗宫颈癌的新方法。方法以SiHa细胞系为研究对象，设计靶向其内整合的HPV16 E6和E7基因的小引导RNA(small guide RNA，sgRNA)，将其克隆入CRISPR/Cas9质粒，并应用其将E6、E7基因敲除，随后应用错位酶切法和克隆测序检测突变效果，并用细胞迁移与侵袭实验检测细胞的侵袭力。结果设计的sgRNA被克隆入CRISPR/Cas9质粒，经测序克隆正确。该质粒转染SiHa细胞后，可以引发靶点DNA的突变，致使E6和E7基因密码子改变，无法正确表达。E6、E7突变后SiHa细胞侵袭及增殖能力下降(t检验，pCas9组与psgE6-1-1-Cas9组相比，P＝0.0006; pCas9组与psgE7-1-2-Cas9组相比，P＝0.0007)，促进肿瘤抑制因子P53的表达恢复，细胞的恶性度降低。

简介：目的探讨人乳头瘤病毒（HPV）E6/E7mRNA检测在无明确诊断意义的不典型鳞状细胞（ASC-US）患者中的临床应用价值.方法对320例ASC-US患者进行HPVE6/E7mRNA和高危型HPV（HR-HPV）DNA检测,结合病理学诊断资料进行统计学分析.结果CINⅡ＋级和CINⅢ＋级的HPVE6/E7mRNA阳性率分别高于CINⅡ-级和CINⅢ-级,差异均有统计学意义（P〈0.001）;不同等级宫颈病变的HPVE6/E7mRNA拷贝数不同,差异有统计学意义（P〈0.001）,且宫颈病变级别与mRNA拷贝数之间呈正相关.HPVE6/E7mRNA与HR-HPVDNA检测CINⅡ＋级和CINⅢ＋级的灵敏度、阳性预测值、阴性预测值差异均无统计学意义（P〉0.05）;两者特异度比较,差异有统计学意义（P〈0.001）.结论HPVE6/E7mRNA检测作为ASC-US的分流指标更确切有效,是目前ASC-US患者是否阴道镜转诊的较佳分流策略.

简介：摘要：目的：在研究中基于多重实时荧光定量PCR的方法以及相关的技术，来建立一个能够同时对14中高危型人乳头瘤病毒进行检测与分析，来有效地建立一个对癌基因E6/E7mRNA的检测方法。方法：在此次研究中选取我院223例临床样本进行检测与分析，来探究14种高危型人乳头瘤病毒中，不同病毒的E6/E7基因序列，来探究这些基因序列中存在的区域设计特异性，并且结合相对应的反应体系来构建一个高危型人乳头瘤病毒E6/E7mRNA的检测方法与系统。在实验中需要结合这些临床样本来利用温核算扩增技术进行高危型人乳头瘤病毒E6/E7mRNA检测，最终来探究其检测结果与宫颈组织病理学检测结果之间是否存在着一致性。结果：在实验中所建立的检测方法，能够在试验检测中将检测限提升更高的程度，并且对于一些常见低危型HPV中也并没有出现交叉检出的情况，使用多重实时荧光定量PCR方法所检测出的结果与Aptima HPV检测结果是具有较好的一致性，并且多重实时荧光定量PCR法中的敏感性为84.0%，特异性更是高达94.4%阴性预测值比阳性预测值高出更多，高达97.9%，而阳性预测值仅为65.6%。结论：使用多重实时荧光定量PCR法进行检测有着特异性好、稳定性好以及灵敏性高等等优势，能够在为高危型人乳头瘤病毒的患者提供一个更好的诊断方案以及技术平台。

简介：摘要目的构建人乳头状瘤病毒（HPV）16 E6/E7基因稳定表达的人永生化角质形成细胞（KC），为研究HPV16 E6/E7诱导的细胞永生化及恶性转化机制提供细胞模型。方法两步消化法分离培养原代人包皮角质形成细胞（HFK），利用慢病毒感染技术对细胞稳定转染HPV16 E6/E7基因，连续培养30代以上，筛选出永生化KC，分为3组：①空白对照组：传代2次的原代HFK；②实验组：传代2次的原代HFK感染LV5-HPV16 E6/E7，感染细胞记录为A0代，感染后以传代次数记录（A1、A2……）；③阳性对照组：HPV16阳性宫颈癌细胞SiHa。应用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）、Western印迹实验分别检测空白对照组、实验组、阳性对照组HPV16 E6/E7 mRNA、蛋白及CK14蛋白的表达，CCK-8及Transwell Insert方法检测细胞的增殖及侵袭能力。裸鼠致瘤实验检测实验组A30、阳性对照组SiHa细胞的致瘤能力。结果成功分离原代HFK。LV5-HPV16 E6/E7重组质粒感染原代HFK后，空白对照组细胞无荧光表达，连续传代后出现衰老表现，实验组A30细胞体积、形态较原代HFK无明显变化，且荧光表达率为100%。与空白对照组相比，实验组A1、A10、A20、A30细胞HPV16 E6 mRNA表达水平显著升高（t值分别为7.12、8.07、6.53、5.66；P值分别< 0.001、< 0.001、= 0.001、= 0.005）；与空白对照组相比，实验组A1、A10、A20、A30细胞HPV16 E7 mRNA表达水平也显著升高（t值分别为3.20、4.29、3.75、4.22；P值分别为0.024、0.008、0.013、0.014）。空白对照组未见HPV16 E6/E7蛋白的表达，而A30及SiHa细胞可见HPV16 E6/E7蛋白的表达。CCK-8实验显示，实验组A10、A20、A30细胞增殖水平显著高于空白对照组（t值分别为6.49、7.55、9.43；P值分别为0.003、0.002、0.001），而A1的增殖水平与空白对照组比较，差异无统计学意义（t = 2.40，P = 0.074）。Transwell Insert侵袭实验显示，A30不能穿过基底膜，SiHa细胞可穿过基底膜被染成蓝色。裸鼠接种A30细胞2个月后无肉眼可见肿瘤，组织学亦显示无肿瘤形成，裸鼠接种SiHa细胞后可于皮下形成肿瘤。结论通过采用慢病毒技术转染HPV16 E6/E7基因成功建立人永生化角质形成细胞，可作为HPV相关研究中的理想细胞模型。

简介：摘要目的探讨在宫颈细胞学ASC-US分流管理中高危型人乳头瘤病毒E6/E7的临床检测价值。方法选择在2016年4月-2017年4月期间来本院妇科门诊进行宫颈TCT检查结果为ASC-US的50例患者作为研究对象，对所有患者采取HR-HPVDNA分型检测与E6/E7mRNA检测，同时进行宫颈活检与阴道镜检查。对HR-HPVDNA与E6/E7mRNA检测结果的特异性与敏感度进行比较与分析。结果对于CIN2+，E6/E7阳性率为52.5%，HPV阳性率为86.9%；对于CIN2-，HPVDNA检测CIN2+敏感度为87.0%，低于HPVDNA敏感度（91.3%），差异无统计学意义（P＞0.05）；前者特异性为67.5%，高于HPVDNA特异性（25.0%），差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论E6/E7表达与宫颈病变关系密切，HPVE6/E7mRNA检测可反映病毒的致癌能力，对细胞学检查为ASC－US患者有一定的分流价值。

简介：【摘要】目的：探究在宫颈癌筛查中采用DNA倍体定量分析联合HPV E6/E7mRNA检测的临床价值。方法：选取2020年10月～2021年10月于我院行宫颈癌筛查的3000例女性，均行DNA倍体定量分析结合HPV E6E7mRNA检测。结果：两者联合检查的阳性率为（6%，180/3000），病理活检后ClN 1级及以上为（64.44%，116/180）。结论：DNA倍体定量分析结合HPV-E6/E7mRNA检测在宫颈癌筛查中的应用价值较高，能够为患者的进一步诊疗提供可靠依据。

简介：摘要子宫颈癌是影响全球女性健康的第4大恶性肿瘤，也是我国女性第6位高发恶性肿瘤。绝大多数子宫颈癌及癌前病变是由高危型HPV持续感染引起的。近年来，随着对HPV致癌的分子学机制研究的不断深入，发现HPV E6和（或）E7（E6/E7）基因的激活与子宫颈病变的发生、维持及进展有密切关系，故其作为潜在的治疗靶点受到了学者们的广泛关注。本文从治疗性疫苗、基因编辑治疗、免疫治疗和植物药治疗几个方面综述目前靶向HPV E6/E7基因的治疗在子宫颈癌及其癌前病变中应用的研究进展，希望为临床治疗子宫颈癌及其癌前病变提供新的研究思路和策略。

简介：摘要目的探究宫颈特殊染色法（FRD）联合高危型人乳头状瘤病毒（HPV）E6/E7 mRNA与液基薄层细胞学（TCT）在宫颈癌筛查中的诊断价值。方法选取2018年10月至2019年11月在萧山医院行宫颈癌筛查的734例疑似宫颈癌患者作为研究对象，进行FRD、HPV E6/E7 mRNA和TCT检测。以阴道镜取样活组织检查作为金标准，对比以上检测手段单独检测及联合检测对宫颈癌的诊断效能。结果734例疑似宫颈癌患者中，病理活组织检查阳性率为9.81%（72例）；FRD阳性率为11.99%（88例），HPV E6/E7 mRNA阳性率为12.53%（92例），TCT阳性率为14.44%（106例），符合率分别为93.46%、92.37%和89.92%，FRD、HPV E6/E7 mRNA与病理学诊断结果的Kappa值分别为0.664和0.616，TCT与病理学诊断结果的Kappa值为0.529。FRD、HPV E6/E7 mRNA和TCT的灵敏度分别为77.78%、75.00%和72.22%，且3种方法联合检查的灵敏度为95.83%，优于单独检查。结论FRD在宫颈癌筛查方面具有与TCT、HPVE6/E7 mRNA相仿的效能，且与TCT、HPV E6/E7 mRNA联合应用有助于提高灵敏度，加之具有快捷和成本低的特点，有一定的推广意义。