简介：摘要目的构建DNAJA1(DnaJheatshockproteinfamily(Hsp40)memberA1)基因过表达质粒，转染结肠癌细胞株，并对其是否转染成功进行鉴定。方法Real-time聚合酶链反应(PCR)及Westernblot检测6株结肠癌细胞及瞬时转染DNAJA1质粒的细胞中DNAJA1mRNA水平。采用全基因合成法合成DNAJA1编码区序列并克隆入pEGFP-C1载体末端，构建重组质粒pEGFP-C-DNAJA1并进行测序及凝胶电泳鉴定。结果6株结直肠癌细胞中，DNAJA1在HT29和HCT116中的mRNA和蛋白水平最较低，在LOVO和SW620细胞中较高。测序及凝胶电泳结果表明DNAJA1重组质粒构建成功。瞬时转染HT29和HCT116细胞后，与对照组相比，DNAJA1mRNA分别升高约50倍，蛋白表达也明显升高。结论成功构建DNAJA1基因过表达重组质粒，并有较高的转染水平，为进一步的研究提供了条件。

简介：AbstractBackground:Hyperthermia in combination with DnaJA4-knockout (KO) obviously affects the anti-viral immunity of HaCaT cells. The mechanisms of this process are not yet fully explored. However, it is known that DnaJA4 interacts with actin cytoskeleton after hyperthermia. Our aim was to investigate the effects of DnaJA4 on F-actin in HaCaT cells following hyperthermia.Methods:Wild-type (WT) and DnaJA4-KO HaCaT cells were isolated at either 37°C (unheated) or 44°C (hyperthermia) for 30 min followed by testing under conditions of 37°C and assessing at 6, 12, and 24 h after hyperthermia. The cytoskeleton was observed with immunofluorescence. Flow cytometry and Western blotting were used to detect the expression of F-actin and relevant pathway protein.Results:DnaJA4-KO and hyperthermia changed the cytoskeleton morphology of HaCaT cells. F-actin expression levels were elevated in DnaJA4-KO cells compared with WT cells (6364.33 ± 989.10 vs. 4272.67 ± 918.50, P < 0.05). In response to hyperthermia, F-actin expression levels of both WT and DnaJA4-KO cells showed a tendency to decrease followed by an obvious recovery after hyperthermia (WT cells: unheated vs. 6 h after hyperthermia or 24 h after hyperthermia: 0.34 ± 0.02 vs. 0.24 ± 0.01, 0.31 ± 0.01, P < 0.001, P < 0.05; DnaJA4-KO cells: unheated vs. 6 h after hyperthermia or 24 h after hyperthermia: 0.44 ± 0.01 vs. 0.30 ± 0.01, 0.51 ± 0.02, P < 0.001, P < 0.01). WT cells restored to baseline levels observed in the unheated condition, while DnaJA4-KO cells exceeded baseline levels in the recovery. As the upstream factors of F-actin, a similar profile in rho-associated serine/threonine kinase 1 (ROCK 1) and RhoA expressions was observed after hyperthermia. While E-cadherin expression was decreased in response to hyperthermia, it was increased in DnaJA4-KO cells compared with WT cells.Conclusions:Hyperthermia affects the expression levels of F-actin in HaCaT cells. DnaJA4 knockout increases the expression of F-actin in HaCaT cells after hyperthermia. DnaJA4 regulates the expressions of F-actin and the related pathway proteins in response to hyperthermia in HaCaT cells.

简介：你知道不莱梅吗？噢——它是一个美丽快乐的地方。不莱梅在哪儿呢？噢——有梦想的地方就有不莱梅。没错儿，不莱梅这个地方，早就存在于“很久很久以前”的童话里了……

简介：1名学生＋1位教师=1所学校。这个特殊的场景,出现在重庆綦江区赶水镇太公山村小。学校唯一的学生叫谭陆森,而陪伴教导他的是老教师令狐克洪。太公山村小的生源逐年减少,学生陆陆续续转到镇上就读,只剩下谭陆森一人。谭家四世同堂,家庭负担颇重,小陆森为了能与祖母互相照顾,不方便转校下山就读。于是,令狐克洪向学校申请：＂让我在太公山站好最后一班岗,照顾好最后一名学生。＂

简介：世间有一种最甜美的呼唤，那就是妈妈；世间有一种最伟大的爱，那就是母爱。那个特殊的夜晚，我读懂了那份母爱，也证明了1＋1=1这个让我疑惑很久的式子。

简介：“我们人类总是不满足的。小孩生下来，刚刚学会爬，就不满足，就想学走，刚刚学会走，就又想学跑了。”大鼻子教授一上课，就说了这样一段话，“但人们还是不满足，于是，发明了——”

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简介：１＋１＝？●魏鹏程前不久，县国税局召开征管改革现场会。两位老所长看完我们所税负核定清册后，问我们：“你们月初核定的税款，当月能如数收上来吗？”我们回答：“能”。两位老所长不信的摇摇头，并笑着说：“在农村收税，要想１＋１＝２，哪是不可能”。听了老所长的...

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简介：我们网罗的对象。随想随写,随写随想。所有奇闻趣事,所有奇思妙想,都是

简介：近日，多家媒体报道，加多宝集团出品的王老吉红色罐状饮料出现断货，究其原因，商家们给出了出乎人们意外的答案：王老吉向地震灾区捐款1亿元人民币，创下国内单笔最高捐款额度。这一善举，让消费者看到了一个负责任企业的形象，短时间里得到市场更多关注和追捧，品牌价值不断提升。

简介：清明小长假，作业不多，爸爸也难得从部队回家休假。晚饭后，一家人去广场散步。我快乐得像只小鸟，一手牵着爸爸，一手拉着妈妈，边走边唱。突然，爸爸说：“我出一个题目．1＋1=1．你们相信吗？就是某种事物加某种事物等于一种新的事物，我们三个人来比一比，看谁说得多。”

简介：如果给你四个数1、2、3、6,请你想想,这四个数有什么样的关系？那就是下面这两个等式：1＋2＋3=6,1×2×3=6.

简介：世界上最有效、最奇妙的机器是什么描匕是你的大脑和神经系统。这也是我们每个人迈向成功的有效辅助机器，美国心理学家马尔茨通过多年的研究发现：大脑具有帮助人们分析环境、选择目标、提供方法、矫正错误，引导人们最终走向成功的功能。我们每个人都具有这种世界上最奇妙、无可比拟的成功辅助机器．成功的关键在于我们是否善于运用它。

简介：法国农业工程师林格曼曾设计过一个发人深省的“拉绳实验”：把被试者分成一人组、两人组、三人组和八人组，要求各组用尽全力拉绳，同时用灵敏度很高的测力器分别测量其拉力。结果发现，两人组的拉力只是单独拉绳时两人拉力总和的95％，三人组的拉力只是单独拉绳时三人拉力总和的85％，而八人组的拉力只是单独拉绳时八人拉力总和的49％。

简介：法国农业工程师林格曼曾设计了一个发人深省的“拉绳实验”：把被试者分成一人组、两入组、三人组和八人组。要求各组用尽全力拉绳，同时用灵敏度很高的测力器分别测量其拉力。结果发现。两人组的拉力只是单独拉绳时两人拉力总和的95％。三人组的拉力只是单独拉绳时三人拉力总和的85％，而八人组的拉力只是单独拉绳时八人拉力总和的49％。

简介：看完了这些段落，是不是有了些启发呢？下面就进入我们的《素材1＋1》。各位在欣赏下面的文章的同时，也不要忘记仿写一下啊！快把你仿写的段落寄给我们吧！

简介：在2005年“国家电网公司农村供电所安全管理年”活动中，江苏省沛县供电公司农电管理所大胆创新，自3月份以来，在全县农村供电所推行了一种新的安全管理运行机制——4个1=1，为已经连续实现安全生产15年的沛县供电公司注入了新的活力。

简介：小说家：1男＋1女=生死恋、夫妻情、母子情深、姐弟恋、兄妹情……社会学家：1男＋1女=夫妻、情侣、兄妹、姐弟、父女、爷孙女…