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  • 简介:目的构建Wilson病基因ATP7B的重组腺病毒载体.方法分别以BamHⅠ+SalⅠ双酶切pcDNA3.0/ATP7B和pDC315,将ATP7BcDNA目的基因片段和线性化的pDC315连接,定向克隆构建pDC315/ATP7B,以PCR和酶切的方法鉴定.pDC315/ATP7B与腺病毒骨架共转染293细胞构建Ad-ATP7B,PCR进行鉴定.结果经PCR和酶切鉴定证实pDC315/ATP7B构建成功.pDC315/ATP7B与腺病毒骨架共转染293细胞后见明显的毒斑,说明二者在293细胞中同源重组并包装成功.经PCR证实重组腺病毒Ad-ATP7B构建已完成.结论本实验成功构建了ATP7B外源目的基因序列完全正确的重组腺病毒载体Ad-ATP7B,为下一步采用ATP7B基因重组腺病毒载体对Wilson病进行基因治疗打下了基础.

  • 标签: 基因重组腺病毒载体 ATP7B WILSON病基因 293细胞 pcDNA3 BamHⅠ
  • 简介:目的检测肝豆状核变性(Wilsondisease,WD)ATP7B基因启动子区的DNA序列,分析其结构,发现存在的突变,通过报告基因瞬时表达研究突变对启动子功能的影响.方法检测36个WD家系71名成员(其中48例WD患者)及20名正常人的基因组DNA序列并进行分析.对发现的突变,进行荧光素酶报告基因瞬时表达研究.结果(1)在正常对照、患者一级亲属和WD患者的启动子区-190、-78和+260位(转录起始点为+1)均发现存在单个碱基的不同;(2)在48例病人中发现3例存在-183位C→T突变,其中2例为纯合突变,另1例为杂合突变,在正常对照、患者一级亲属中未发现此改变;(3)通过荧光素酶报告基因瞬时表达研究,发现-183位C→T突变不影响ATP7B基因启动子的功能.结论本研究在ATP7B基因启动子区未发现存在致病突变,提示ATP7B基因启动子区存在致病突变在中国人群中是不常见的.

  • 标签: 肝豆状核变性 基因 启动子 突变
  • 简介:摘要目的构建B-7.1基因真核表达载体并导入CAK-1肾细胞癌细胞表达,为进一步研究基因的功能做材料准备。方法采用RT-PCR方法,以正常肝脏组织cDNA为模板,扩增B-7.1基因全长读码框架,并构建到真核表达载体pCDNA3.1中,将其导入CAK-1肾细胞瘤细胞,对转染后的细胞进行RT-PCR和Westernblot分析。结果经过克隆测序结果证实,我们成功将B-7.1读码框架插入真核表达载体pCDNA3.1的相应位点,并且,与pCDNA3空载体转染对照细胞相比,pCDNA3-B-7载体转染的CAK-1细胞中B-7基因无论是mRNA水平还是蛋白水平均有明显升高。结论B-7.1转基因细胞株的成功构建和检测,为深入研究B-7.1蛋白的生物学功能奠定了材料基础。

  • 标签: B-7.1 转基因 表达 载体
  • 简介:答:所谓B快门,即B(Bublesetting),也叫手控快门,一般都刻在快门调节钮或环上,俗称B门,按下快门时,快门打开,开始曝光,松开快门,快门关闭即停止曝光。也就是说,B快门是由快门按下时间的长短来决定每一次曝光的时间,没有固定的时间秒数,可以自由控制曝光时间。

  • 标签: B快门 曝光时间 照相机 手控快门
  • 简介:本研究把碳酸盐(NaHCO3、Na2CO3)对植物造成的逆境称为“碳酸盐逆境”(Carbonatestress)。从水稻根cDNA文库中筛选出一些与碳酸盐逆境相关的基因,水稻线粒体ATP合成酶6kDa亚基基因(简称:RMtATP6基因)为其中之一。该基因编码的氨基酸序列与Jansch等人(1996)从马铃薯(Solanumtuberosum)线粒体中纯化的线粒体ATP合成酶6kDa亚基氨基酸序列(F1F0ATP合成酶的F0部分)具有同源性,但是这个小蛋白的功能尚不清楚,其基因也没有被鉴定。本研究克隆了这个基因(Accessionnumber:AB055076),并解析了在碳酸盐逆境胁迫下它的表达特性。RMtATP6基因编码的蛋白预测分子量为6578kDa,预测的细胞内存在位置为线粒体膜间间隙,结果预示了RMtATP6基因编码的蛋白为水稻线粒体ATP合成酶6kDa亚基基因。Southern杂交结果表明RMtATP6基因是水稻核基因组中的一个单拷贝基因。通过对RMtATP6基因在植物中的表达特性及在碳酸盐逆境下在酵母中的功能解析,表明了该基因与碳酸盐逆境有关。

  • 标签: 碳酸盐逆境 F1F0-ATP合成酶 ATP合成酶6kDa亚基 线粒体
  • 简介:从常理来说,瑞典球员本土作战的能力一向很强,但在本赛季,几名瑞典选手的状态都不出色,诺曼今年的表现更是糟糕,想要卫冕成功难度不小。这不,他在半决赛中再次遇上了克星、巨人杀手尤利拉奇。几个月前的戴维斯杯团体赛中,正是这名捷克选手令诺曼折翼而归,当时诺曼曾发誓要报仇雪恨,谁知旧仇未报,又添新恨,眼睁睁地看着对手在第3盘胜出,打入决赛。

  • 标签: 土场 决赛权 公开赛 普拉斯 冠军 瓦克
  • 简介:ATP是自然界中的一切生物生命活动的直接能源物质,其英文全称为adenosinetriphosphate,adenosine是腺苷,tri是三的意思,Phosphate是磷酸盐,取英文中每个词的第一个字母,即ATP,因而其中文全称是三磷腺苷也称腺三磷。1ATP的结构特点ATP(三磷酸腺苷)是腺嘌呤核苷的洐生物,可以看成是含三个磷酸根的腺嘌呤核苷酸,ATP的结构为:

  • 标签: ATP 三磷腺苷 腺三磷 生物化学 ADP 二磷酸腺苷
  • 简介:目前,BCD-7B、8B系列冰箱冬季经常出现在人工智能条件下时,冰箱启、停机正常,但冷藏室蒸发器下面的流水沟结冰及靠近流水沟附近的食品结冻现象。因此,造成许多用户投诉或要求退、换机,也给维修工作带来了一定难度。针对上述故障现象,本人将以往的维修检测方法及解决措施介绍给大家,供大家在维修中参考。

  • 标签: B系列 冰箱 结冰 冬季 检修 人工智能
  • 简介:包括长期的感染,自体免疫的疾病和癌症,很长期的人的疾病的致病经常包含坚持的、未解决的煽动性的回答。决定尖锐煽动性的回答的变换进一个长期的过程的分子的机制难倒研究人员许多年了。最近的研究揭示那B7-H1(CD274,PD-L1),一个最新识别的co-stimulatory分子,拥有天真的T房间的合作刺激和激活的受动器T房间的抑制的双功能。异常细胞的表示和B7-H1的deregulated功能在长期的病毒、细胞内部的细菌的感染期间被报导了,以及在许多自体免疫的疾病和癌症。重要地,B7-H1的双功能的解除管制看起来与被联系一延长,由为激活诱惑天真的T房间并且阻抑的不完全的有免疫力的反应激活受动器T房间。而且,指向B7-H1信号的策略的开发提供一条新、有希望的途径操作与长期的发炎联系的破坏疾病。因此,B7-H1可以在煽动性的回答的慢性起一个批评immunoregulatory作用。

  • 标签: 免疫调节 B7-H1 炎症 免疫反应
  • 简介:κ-银环蛇毒素(κ-bungarotoxin,κ-BGT)属于突触后神经毒素,能选择性的识别α3β2亚型的神经元烟碱乙酰胆碱受体,可作为药理学研究的工具药。由于κ—BGT分离提取比较困难,难于从自然界中大量获取,无法满足各项研究的需要,所以本文探讨在大肠杆菌和毕赤酵母表达体系中表达κ—BGT及其在实验室规模生产的可行性。

  • 标签: 表达 银环蛇毒素 乙酰胆碱受体 药理学研究 亚型 基因
  • 简介:BandTlymphocyteattenuator(BTLA),identifiedasanimmuneinhibitoryreceptorrecently,playswidespreadrolesonTandBcells.EmergingevidencehasgeneratedplentifulinformationonthemechanismswhichBTLAmediatesnegativeregulationinimmuneresponsesandinvolvesinavarietyofphysiologicalandpathologicalprocesses.TheexplorationofthebiologicalmechanismsandregulationofBTLAwillopenpossibilitiesonnoveltherapeuticstrategiesinimmune-relateddiseases.

  • 标签: B细胞弱化子 T细胞弱化子 配合体 免疫抑制
  • 简介:目的克隆和测定剑尾鱼(Xiphophorushelleri)线粒体细胞色素b基因(cytb)的全序列。方法提取剑尾鱼肝脏的总DNA。设计合成特异引物进行PCR扩增,扩增产物经琼脂糖电泳检测,纯化后克隆到pGEM-Teasyvectorsystem中的T载体上,筛选转化子,提取质粒,酶切鉴定。挑取重组质粒pGEM-T-xhcytb11进行序列测定。结果获得了剑尾鱼线粒体cytb基因的全序列,共1140bp。结论用BLAST与GenBank中的线粒体DNA序列进行比较,显示剑尾鱼与其他鱼类的cytb基因具有较高的同源性,根据剑尾鱼与其他13种鱼的cytb基因序列同源性所建立的是进化树,与传统的分类地位基本吻合。

  • 标签: 剑尾鱼 线粒体 细胞色素B基因 序列分析
  • 简介:澳视ATP-730投影机采用时装化简约设计,银白色的外观彰显典稚与高贵,简洁的控制面板按键设计,很多功能都合为一踺,使操作更加方便;具有内藏式广角安全镜头和封闭的光学引擎结构,采用一般和经济双模式设计,用户可根据环境的需要选择相应的应用模式,同时灯泡尾部两个散热口和前端三个散热口充分保证了灯泡的散热,更加有效地延长了灯泡的使用寿命,节约了使用成本。

  • 标签: 模式设计 控制面板 使用寿命 使用成本 多功能 散热
  • 简介:本文简要介绍了电炉-连铸-连轧生产B7钢工艺方案的确定及生产的基本情况。从成分、性能等方面分析,该工艺生产的B7钢完全满足用户的使用要求。使用效果良好。

  • 标签: B7钢 高温标准件钢 生产工艺 力学性能
  • 简介:T细胞活化需要两个信号,一个是抗原特异的,由T细胞受体识别并结合抗原呈递细胞表面的MHC-抗原肽的第一信号;第二信号是由T细胞上的CD28与抗原呈递细胞上的B7分子的结合而提供的.只有两个信号都存在时,T细胞开始增殖并分泌细胞因子.CTLA4是B7的另一个受体,它在T细胞活化时上调表达,其功能为抑制T细胞增殖.阻断或给予第二信号,可以人为调节免疫应答使之增强或抑制,对免疫治疗提供了新的手段.阻断CD28/B7途径导致免疫耐受,降低机体的免疫应答,可应用于自身免疫性疾病、器官移植及移植物抗宿主病的治疗.激活CD28/B7途径可应用于免疫系统识别并清除侵犯免疫系统的肿瘤.

  • 标签: CD28 B7 CTLA4 共刺激信号 免疫治疗 肿瘤治疗
  • 简介:本实验室为中国红十字总会定点HLA配型实验室之一,2001年11月以来应用序列特异性引物(PCR-SSP)分型技术,对江苏六城市(苏州、无锡、南通、泰州、盐城、连云港)6300例汉族随机人群进行HLA等位基因分型,结果发现江苏汉族人群低频率基因HLA-B41、B63、B64、B65、B81的常见连锁基因为A23-B41、A1-B63、B64-DR7B65-DR1、A2-B81.现报告如下.

  • 标签: HLA PCR-SSP 低频率基因 连锁不平衡参数 单倍型频率
  • 简介:Objective:TostudythesynergiceffectsofIL-12andB7-1transfectantonantitumorimmunityinvivo.Methods:TheretrovirusvectorencodingmIL-12andmB7-1genewastranfectedintoEL-4thymiclymphomacellsrespectively.Thecellswereusedastumorvaccineandthetherapeuticeffectwasobserved.Results:IncontrasttothemiceimmunizedwithEL-4/WtorEL-4/Neogroups,thetumorigenicityofEL-4/IL-12transfectantwasdecreased(P<0.001).TheEL-4/IL-12andEL-4/B7-1cellsirradiatedwith60CoshowedsignificantsystematicprotectiveeffectsagainsttherechallengeofEL-4/Wt.60CoirradiatedEL-4/IL-12cellsdelayedtheoccurrenceoftumorandprolongedthesurvivalperiodoftumorbearingmice.CombinationofthevaccinesofEL-4/IL-12andEL-4/B7-1resultedintheenhancedtherapeuticeffectcomparedwitheachsingletransfectantgroup(P<0.001).Conclusion:TheresultsshowedthatIL-12transducedcellscouldenhancetheantitumorimmunityofhostascancervaccine.CombinationoftheEL-4/IL-12andEL-4/B7-1transfectantcouldimproveimmunityofhostandisaprospectcancervaccine.

  • 标签: IL-12 B7-1 基因转染细胞 抗肿瘤免疫 癌症 疫苗
  • 简介:载脂蛋白(APO)B主要分布在人体血液中的的低密度脂蛋白(LDL)和极低密度脂蛋白(VLDL)中,约占LDL蛋白质的95%~99%,其主要功能是参与脂质转运和被细胞膜上的LDL受体识别。研究证明,apoB与动脉粥样硬化(AS)的发生有着密切的关系。近年来,多数医院已开展了测定人体血液中apoB含量来判定AS的危险程度。而国内所用的试剂盒均为多克隆抗体,这给临床测定结果的准确性和特异性带来了一定的差异。为此国内许多研究单位拟想通过基因重组技术,将apoB单抗细胞株通过逆转录、构建使其表达apoB单链抗体。

  • 标签: 单链抗体基因 载脂蛋白B 多克隆抗体 动脉粥样硬化(AS) 极低密度脂蛋白 LDL受体
  • 简介:笔者1978~1987年应用维生素B痛点封闭治疗眶上神经痛7例,报告如下。临床资料7例均系门诊病人,男2例,女5例,年龄38~51岁,左侧4例,右侧3例,病程1~9年。曾各自先后服用过大仑丁、菸酸、地巴唑、中药煎剂及针灸理疗等,有的还使用过普鲁卡因加无水酒精痛点封闭,疗效均不理想。

  • 标签: 眶上神经痛 痛点封闭 大仑丁 菸酸 针灸理疗 地巴唑
  • 简介:B7家族成员是最重要的共刺激分子,其中对B7-1、B7-2分子的研究最为深入,近年来,该家族中B7-H1、B7-H2、B7-H3、B7-DC、B7-H4等新成员也被陆续发现,其作用机制主要是为T细胞活化提供所需的正性和负性共刺激信号,通过复杂的网络平衡作用决定最终的免疫效应。随着器官移植的迅速发展,诱导对移植物的特异性耐受成为解决移植排斥的重要途径,正性共刺激通路B7/CD28通路、B7-H2/ICOS通路、B7-H3通路的过度活化,以及负性共刺激通路B7/CTLA-4通路、B7-H1、B7-DC/PD-1通路、B7-H4/BTLA通路的发现,在移植免疫中意义尤为突出。

  • 标签: B7 移植免疫