简介:摘要目的观察苦参碱对人皮肤癌A431细胞体外增殖、细胞周期的影响,探讨其对皮肤癌可能的作用机制。方法MTT法检测苦参碱对人皮肤癌细胞增殖,流式细胞仪检测苦参碱对人皮肤癌细胞周期的影响。结果苦参碱在0.5、0.75、1g/L浓度时均能明显抑制人皮肤癌A431细胞增殖,抑制率分别为13.35%、23.61%和41.47%,与对照组相比差异显著(P<0.01),IC50为1.21g/L。苦参碱0.5、0.75、1g/LG0/G1期细胞数量明显高于对照组,并呈浓度依赖关系。结论苦参碱对人皮肤癌细胞有明显的生长抑制作用,且有剂量依赖关系;苦参碱可能是通过将人皮肤癌细胞周期阻滞在G0/G1期,抑制其增殖,发挥其抗皮肤癌作用。
简介:目的探讨5-ALA-PDT对A431细胞增殖与凋亡的影响。方法将细胞分为对照组以及不同剂量的5-ALA-PDT处理组(5-ALA孵育浓度分别为:0.05、0.1、0.2、0.4、0.8mg/ml,激光能量密度分别为1.25、2.5、5J/cm^2),处理24h后采用MTT法检测5-ALA-PDT对A431细胞存活率的影响,采用流式细胞术(FCM)检测5-ALA-PDT对A431细胞的周期及凋亡的影响。结果MTT法检测结果显示在不同的5-ALA孵育浓度(0.05、0.1、0.2、0.4、0.8mg/ml)和不同的激光能量密度(1.25、2.5、5J/cm^2)处理A431细胞时,当激光的能量密度和孵育的浓度都较低的时候.在5-ALA-PDT的作用下,A431细胞的杀伤曲线平缓的下降,然而伴随着激光的能量密度和光敏剂5-ALA浓度的不断加强,可见抑制曲线的下降速度十分迅速,各组细胞的存活率在达到较高的强度时呈现相接近的趋势。当5-ALA孵育浓度达到0.8mg/ml时,不同激光能量密度处理的细胞存活率差异无统计学意义(P〉0.05);5-ALA-PDT作用后使A431细胞滞留在G0/Gl期,A431细胞的增殖指数(PI)降低;与对照组相比,5-ALA-PDT处理后可以显著增加A431细胞的凋亡率和坏死率(P〈0.05)。结论5-ALA-PDT显著抑制皮肤鳞状细胞癌A431细胞的增殖,促进A431细胞的凋亡。
简介:摘要目的观察苦参碱对人皮肤癌A431细胞体外增殖、细胞周期及细胞凋亡作用的影响,探讨其对皮肤癌可能的作用机制。方法选用人皮肤癌细胞株A431,设置苦参碱的浓度为0.5、0.75、1g/L浓度组,阴性对照组和阳性对照组(顺铂组)。MTT法检测苦参碱对人皮肤癌细胞增殖的,流式细胞仪检测苦参碱对人皮肤癌细胞周期的影响。结果苦参碱在0.5、0.75、1g/L浓度时均能明显抑制人皮肤癌A431细胞增殖,抑制率分别为13.35%、23.61%和41.47%,存在着明显地浓度依赖关系,与对照组相比差异显著(P<0.01),IC50为1.21g/L。苦参碱0.5、0.75、1g/L浓度组G0/G1期细胞数量明显高于对照组,并呈浓度依赖关系。另外,苦参碱可诱导人皮肤癌细胞发生凋亡,凋亡率分别为5.86%、10.27%和20.32%。结论苦参碱对人皮肤癌细胞有明显的生长抑制作用,并有明显的剂量依赖关系;苦参碱可能是通过将人皮肤癌细胞周期阻滞在G0/G1期,抑制其增殖,通过诱导人皮肤癌细胞发生凋亡等,发挥其抗皮肤癌作用。
简介:摘要目的观察苦参碱对人皮肤癌A431细胞体外增殖、细胞周期及细胞凋亡作用的影响,探讨其对皮肤癌可能的作用机制。方法选用人皮肤癌细胞株A431,设置苦参碱的浓度为0.5、0.75、1g/L浓度组,阴性对照组和阳性对照组(顺铂组)。MTT法检测苦参碱对人皮肤癌细胞增殖的,流式细胞仪检测苦参碱对人皮肤癌细胞周期的影响。结果苦参碱在0.5、0.75、1g/L浓度时均能明显抑制人皮肤癌A431细胞增殖,抑制率分别为13.35%、23.61%和41.47%,存在着明显地浓度依赖关系,与对照组相比差异显著(P<0.01),IC50为1.21g/L。苦参碱0.5、0.75、1g/L浓度组G0/G1期细胞数量明显高于对照组,并呈浓度依赖关系。另外,苦参碱可诱导人皮肤癌细胞发生凋亡,凋亡率分别为5.86%、10.27%和20.32%。结论苦参碱对人皮肤癌细胞有明显的生长抑制作用,并有明显的剂量依赖关系;苦参碱可能是通过将人皮肤癌细胞周期阻滞在G0/G1期,抑制其增殖,通过诱导人皮肤癌细胞发生凋亡等,发挥其抗皮肤癌作用。
简介:摘要目的研究长链非编码生长停滞特异性蛋白6反义RNA1(lncRNA DLX6-AS1)对皮肤鳞状细胞癌细胞A431增殖、迁移和侵袭的影响及潜在机制。方法以双荧光素酶报告系统实验验证lncRNA DLX6-AS1与miR-16-5p、miR-16-5p与核酪蛋白激酶和细胞周期蛋白依赖性激酶底物1(NUCKS1)mRNA的靶向结合。通过单独或联合转染lncRNA DLX6-AS1抑制物(si-DLX6-AS1)、miR-16-5p抑制物(anti-miR-16-5p)、NUCKS1抑制物(si-NUCKS1)和相应对照(DLX6-AS1-NC、anti-miR-NC、NUCKS1-NC)调控A431细胞目的基因的表达,采用qRT-PCR检测A431细胞lncRNA DLX6-AS1、miR-16-5p、NUCKS1 mRNA的表达;Western印迹检测NUCKS1、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)抗体、基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP9蛋白水平;CCK8实验检测细胞存活率;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。两组间比较采用独立样本t检验。结果双荧光素酶报告系统实验显示,lncRNA DLX6-AS1靶向结合miR-16-5p,miR-16-5p靶向结合NUCKS1。si-DLX6-AS1组A431细胞miR-16-5p表达水平(3.01 ± 0.31)高于DLX6-AS1-NC组(1.02 ± 0.10,t = 18.33,P < 0.001);NUCKS1、Cyclin D1、MMP2和MMP9蛋白相对水平均低于DLX6-AS1-NC组(均P < 0.05),细胞存活率、迁移和侵袭细胞数亦低于DLX6-AS1-NC组(均P < 0.05)。si-NUCKS1组A431细胞NUCKS1、Cyclin D1、MMP2和MMP9蛋白相对水平均低于NUCKS1-NC组(均P < 0.05),细胞存活率、迁移和侵袭细胞数亦低于NUCKS1-NC组(均P < 0.05)。低表达lncRNA DLX6-AS1后,anti-miR-16-5p组A431细胞miR-16-5p表达(0.34 ± 0.04)低于anti-miR-NC组(1.00 ± 0.12,t = 15.65,P < 0.05),Cyclin D1、MMP2和MMP9相对表达水平均高于anti-miR-NC组(均P < 0.05),细胞存活率、迁移和侵袭细胞数均高于anti-miR-NC组(均P < 0.05)。低表达lncRNA DLX6-AS1、敲减miR-16-5p后,si-NUCKS1组A431细胞NUCKS1、Cyclin D1、MMP2和MMP9蛋白相对水平均低于NUCKS1-NC组(P < 0.05),细胞存活率、迁移和侵袭细胞数均低于NUCKS1-NC组(P < 0.05)。结论lncRNA DLX6-AS1可通过靶向miR-16-5p/NUCKS1调控A431细胞增殖、迁移和侵袭,lncRNA DLX6-AS1可能是治疗皮肤鳞状细胞癌的潜在分子靶点。
简介:目的探讨lincRNAuc431+与绝经后骨质疏松症(postmenopausalosteoporosis,POP)肾阴虚证的关系及其二级结构特征。方法在前期研究证实了CLCF1是POP肾阴虚证的重要关联基因,并在血液lncRNA芯片检测中筛选了POP肾阴虚证的特异lincRNAs,本文采用blat软件对靶基因为CLCF1的lncRNA进行分析;采用分析软件RNAfold对lncRNA及其二级结构进行预测;随机选择绝经后骨质疏松症患者,中医辨证分型为肾阴虚证组25例,健康绝经后妇女25例设为正常对照组。用定量PCR技术检测绝经后骨质疏松症肾阴虚证组、对照组外周血lincRNAuc431+及CLCF1的表达水平。结果blat软件预测lincRNAuc431+的靶基因为CLCF1,相关系数为-0.8192(P=0.0069);RNAfold软件预测发现lincRNAuc431+有多个茎环结构;实时荧光定量PCR结果表明,POP肾阴虚证组CLCF1mRNA表达水平明显低于对照组(P〈0.01),lincRNAuc431+在POP肾阴虚证组中表达出现降低,与对照组相比,差异具有统计学意义(P〈0.01)。结论lincRNAuc431+的表达下调可能与绝经后骨质疏松症肾阴虚证相关联。