简介:摘要目的了解安徽省2020年柯萨奇A组10型(coxsackievirus A10,CV-A10)流行特征及VP1区基因特征。方法选取2020年1月至12月安徽省各市疾控中心上送的手足口病(hand,foot and mouth disease,HFMD)标本,接种人横纹肌肉瘤细胞进行病毒分离培养,采用荧光定量RT-PCR鉴定病毒分离物,对CV-A10毒株进行RT-PCR VP1区扩增及序列测定,使用软件对测序结果进行分析并构建系统进化树。结果共分离HFMD标本186份,阳性标本147株,其中CV-A10分离株13株,占8.84%(13/147),柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CV-A16)分离株4株,占2.72%(4/147),柯萨奇病毒A组6型(coxsackievirus A6,CV-A6)分离株130株,占88.44%(130/147),未分离到肠道病毒A组71型(enterovirusA71,EV-A71),总病毒分离率为79.03%。将13株CV-A10毒株进行VP1区全长扩增,共获得6条完整VP1序列。本研究中CV-A10毒株VP1区核苷酸同源性为97.9%~100.0%,氨基酸同源性为99.0%~100.0%;与CV-A10原型株(Kowalik)VP1区核苷酸同源性为76.3%~76.6%,氨基酸同源性为92.3%~100.0%。系统进化分析显示CV-A10可划分为分为A~I 9个基因型,2020年安徽省6株CV-A10均属于C基因型。结论2020年安徽省CV-A10毒株属于C基因型,为优势流行基因型,与国内其他地区毒株共进化。
简介:目的:预测柯萨奇病毒A组10型(CVA10)的VP1蛋白的线性B细胞抗原表位,为CVA10疫苗研制提供理论基础。方法:分析我国近年流行的CVA10分离株的VP1序列进化特征;选择代表株以DNAStar软件预测其VP1蛋白序列的二级结构、亲水性、柔韧性、表面可能性和抗原指数等指标,根据这些指标综合分析预测VP1蛋白中可能的B细胞表位区域。结果:相对于CVA10原型株,我国CVA10分离株的VP1序列已发生了较大的变化;CVA10代表株的VP1中存在较多的β转角,而无规则卷曲结构较少;根据VP1序列的理化性质和二级结构等多种特征,预测到9个可能的线性B细胞表位。结论:成功预测到我国CVA10分离株VP1可能的B细胞表位区域,为CVA10表位疫苗的研发提供了理论基础。
简介:摘要目的探讨结直肠癌组织中膜联蛋白A10(ANXA10)与肿瘤生长转移的关系。方法选取唐山市工人医院肿瘤外科在2018年1月至2019年10月手术切除的结直肠腺癌标本进行研究,患者均为初诊患者。75例结直肠癌患者中男45例,女30例,年龄(57.69±8.32)岁。免疫组织化学技术(IHC)检测75例结直肠癌肿瘤及癌旁正常肠黏膜石蜡组织中ANXA10蛋白表达,分析ANXA10与患者临床病理特征的关系。应用全基因克隆技术上调人结直肠癌细胞株SW480中ANXA10的水平;新型四唑化合物(MTS)法检测细胞活性,划痕实验及Transwell小室实验检测肿瘤细胞迁移及侵袭能力。实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)及蛋白质印迹法(Western blot)技术检测肿瘤细胞中增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、N-钙黏素(N-cadherin)、E-钙黏素(E-cadherin)的表达。应用SPSS 21.0软件对数据采用t检验、单因素方差分析。结果结直肠癌组织中ANXA10蛋白阳性率(22.67%)低于癌旁正常肠黏膜(54.67%,χ2=16.190,P<0.01);ANXA10表达与患者的肿瘤分化(高中分化36.36%,低未分化11.90%)、淋巴结转移(阳性5.13%,阴性41.67%)及临床分期(Ⅰ~Ⅱ期58.33%,Ⅲ~Ⅳ期5.88%)明显相关(χ2=6.307,P<0.05,χ2=14.258,P<0.01,χ2=25.614,P<0.01)。ANXA10在人结直肠癌细胞株中低于正常肠黏膜细胞株HIEC,SW480细胞中ANXA10表达最低(F=31.714、85.211,P<0.01)。转染后SW480细胞中ANXA10表达明显增高(F=1 774.586、1 559.994,P<0.01);转染48 h后转染组SW480细胞的活性明显低于对照组(F=271.017、215.699,P<0.01);转染组SW480细胞的迁移能力、侵袭能力明显低于对照组(F=1 204.876、70.137,P<0.01)。转染组SW480细胞中PCNA、N-cadherin、MMP-2的mRNA和蛋白水平均明显低于对照组(mRNA:F=35.974,P<0.01;F=8.933,P<0.05;F=21.868,P<0.01;蛋白:F=100.484,P<0.01;F=90.413,P<0.01;F=7.990,P<0.05);而E-cadherin的mRNA和蛋白水平在转染组明显高于对照组(mRNA:F=40.375,P<0.01;蛋白:F=128.487,P<0.01)。结论结直肠癌组织存在ANXA10表达缺失现象,ANXA10表达下调可能是导致结直肠癌进展及转移的重要机制。
简介:目的:在胚胎大鼠主动脉平滑肌细胞(A10),探讨Cl^-通道与Ca^2+内流的关系及酪氨酸磷酸化对Ca^2+内流的作用。方法:采用Fura-2荧光探针双波长测定胞浆游离Ca^2+浓度([Ca^2+]i)。结果:Ca^2+通道阻断剂nifedipine和SK&F96365可阻止肾上腺素(Adr0触发的Ca^2+内流;氯通道阻断剂niflumicacid(NFA)和furosemide呈浓度依赖性抑制Ca^2+内流。在Ca^2+内流被SK&F96365最大限度抑制后,NFA和furosemide可进一步抑制内流,而Ca^2+内流被NFA和furosemide分别最大抑制28%和35%后,SK&F96365也可进一步抑制Ca^2+内流达53%和52%。genistein呈浓度依赖怀抑制Ca^2+内流;vanadate浓度依赖性促进Ca^2+内流。结论:在A10细胞,肾上腺素受体触发的Ca^2+内流涉及电压依赖性Ca^2+通道(VDC)和受体操纵性Ca^2+通道(ROC);氯通道参与了VCD及ROC介导的Ca^2+内流;蛋白酪氨酸磷酸化的水平影响Ca^2+内流。
简介:摘要目的研究分析鉴定手足口病患儿咽拭子病原体柯萨奇病毒A10和A6的结果。方法可以随机选取50例医院在2013年1月到2015年1月期间收治的手足口病患儿,通过采集患儿的咽拭子作为标本,对能够引起手足口病的病原体柯萨奇病毒开展鉴定分析,具体可通过BLAST程序,分析其A10和A6产生的影响。结果对手足口病患儿咽拭子病原体柯萨奇病毒A10和A6进行分析,得出在患儿咽拭子病原体柯萨奇病毒引物040-011能够对A10和A6产生良好的基因扩增特异性;手足口病男性患儿咽拭子病原体柯萨奇病毒检测阳性率达到52.3%,女性病原体柯萨奇病毒检测阳性率达到13.8%,对比存在差异(P<0.05);其中,在原体柯萨奇病毒检测中,检测到12例为A10阳性,3例为A6阳性,同时病毒中A10阳性、A6阳性的比例分别是24.0%、6.0%,对比存在差异(P<0.05);同时A10和A6也是手足口病患儿的重要病原。结论在临床诊治鉴定手足口病过程中,可以根据患儿咽拭子病原体柯萨奇病毒A10和A6鉴定结果,强化手足口病病原检测工作,通过A10、A6变化来为患儿制定有效治疗决策,以确保提升临床手足口病治疗方案效果。
简介:摘要目的阐明河南省安阳市柯萨奇病毒A10(CV-A10)手足口病流行状况,分析其VP1基因变异和进化特征,为CV-A10病毒研究及手足口病防控工作提供依据。方法收集2011—2015年安阳地区医院收治的手足口临床病例,获得人口流行病学信息和粪便标本,利用荧光定量PCR检测并对肠道病毒进行分型;选取CV-A10感染病例,对CV-A10 VP1基因扩增并测序、亚型鉴定、构建系统发生树、分析病毒进化特征和变异特点。结果2011—2015年分别收集277、514、479、505和495例研究对象,检出肠道病毒阳性标本1 863份(阳性率为82.07%)。CV-A16、EV-A71、CV-A6和CV-A10为主要病毒,占肠道病毒阳性标本的94.26%,其中CV-A10阳性样本52例(占2.79%)。基于数据库CV-A10 VP1基因序列,发现CV-A10可分为A、B、C、D 4个基因型,核苷酸序列相似性为75.1%~84.2%。获得安阳地区26例样本中的CV-A10 VP1基因序列,存在2种基因亚型。结论CV-A16和EV-A71是引起手足口病的主要病毒,CV-A6、CV-A10病原也应该引起关注和重视,近年来CV-A10的流行水平总体平稳,但存在流行水平上升的风险。
简介:目前,据日本《东洋经济》预测,今后10年将取得飞跃性发展的10大技术是:1.便携式信息机器2.燃料电池汽车3.使用电脑的高科技农业4.上网定购高品质、低价位商品5.步入虚拟生活时代
简介:上期讲到,小雄他们穿过暗道来到了一个大厅,大厅里的景象让众人目瞪口呆!这时,一向不讨人喜欢的西单不知被什么东西叮了一下,便神色恍惚地离开了众人……