简介:摘要目的表达和纯化重组人Ⅲ型胶原蛋白(rhCol),并评价其性能。方法构建重组基因工程菌pET30a(+)-1880/pACYCDuet-hy726/BL21(DE3),稳定共表达rhCol和脯氨酰羟化酶。通过大肠杆菌高密度发酵与盐析和柱层析蛋白纯化技术制备并纯化rhCol。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定rhCol的纯度,全自动蛋白质多肽测序仪测定rhCol的N端氨基酸序列,紫外分光光度法测定rhCol中的羟脯氨酸含量,噻唑蓝法评价rhCol的细胞相容性。结果高密度发酵最终菌体湿重约200 g/L,表达量约3 g/L,通过亲和层析获得的rhCol的纯度大于95%。rhCol的羟脯氨酸含量为11.44%,其水溶性及细胞相容性良好。结论本研究制备的rhCol可作为一种优良的生物材料广泛用于皮肤护理及生物医药等领域。
简介:摘要目的了解Ⅰ型胶原蛋白α1链(COL1A1)在三阴性乳腺癌(TNBC)组织中的表达,探讨其与TNBC临床病理特征及患者预后的关系。方法收集TNBC手术标本148例,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测COL1A1的mRNA表达,采用Western blot法检测COL1A1的蛋白表达,采用免疫组化法检测COL1A1和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达状态,分析COL1A1表达状态与TNBC患者临床病理特征和预后的关系。结果MDA-MB-231细胞中COL1A1的mRNA和蛋白表达量分别为1.696±0.486和0.550±0.088,均高于MCF-10A细胞(分别为1.020±0.231和0.350±0.083;P=0.032,P=0.046)。TNBC组织中COL1A1的mRNA和蛋白表达量分别为1.632±0.598和0.733±0.068,均高于癌旁组织(分别为1.041±0.316和0.612±0.016;P=0.003,P=0.039)。TNBC组织COL1A1和α-SMA的高表达率分别为35.8%和56.7%,均高于癌旁组织(分别为16.7%和30.0%;P=0.041,P=0.037)。COL1A1的表达与TNBC的肿瘤大小、TNM分期、淋巴结转移、脉管侵犯、α-SMA表达有关(均P<0.05)。COL1A1高表达组患者的中位生存时间为64个月,低于低表达组(73个月,P<0.05)。Cox比例风险回归模型多因素分析显示,COL1A1表达是TNBC患者生存的独立影响因素(HR=3.952,P=0.004)。结论COL1A1在TNBC组织中高表达,是TNBC患者预后的独立影响因素。
简介:摘要目的讨论I型胶原蛋白海绵在骨缺损治疗中的临床价值。方法将我院2007年2月-2011年12月收治的64例骨缺损患者分为实验组和对照组。2组患者均系四肢长管骨骨折接骨板或交锁髓内钉固定术后骨性愈合,入院行内固定物取出术的病人。在完成内固定物取出术后,治疗组在螺丝钉孔洞中和间隔置入Ⅰ型胶原蛋白海绵。对照组未置入胶原蛋白海绵。术后14d、30d、60d和90d对2组患者进行X光摄影,观察影像学图像评价治疗效果。同时结合随访结果,对比较治愈时间并进行功能评价。结果在术后14d,2组影像学无差异。但是术后30d后,2组影像学差异显著,表现为治疗组在骨痂形成方面明显快于对照组,治疗组的疼痛感觉消失更快。治疗组的平均愈合时间为5.3±1.7月,与对照组的8.6±2.4月相比,差异显著,P<0.05。治疗组功能评价整体优良率为71.87%,与对照组存有统计学差异,P<0.05。结论I型胶原蛋白海绵用于骨缺损治疗均有较好的疗效,值得在临床中进一步推广使用。
简介:以3-氯-2-羟丙基三甲基氯化铵(CHPTAC)为阳离子化试剂,对相对分子质量分别为3000-6000Da的胶原蛋白I及相对分子质量为50000-80000Da的胶原蛋白II进行阳离子化反应,制备了两种阳离子型胶原蛋白絮凝剂,并以高岭土悬浊液为模拟体系,考察了阳离子化前后胶原蛋白的絮凝性能。结果表明,阳离子化能明显提高胶原蛋白的絮凝能力,阳离子化胶原蛋白I及胶原蛋白II对高岭土悬浊液的絮凝效率提高了20%,但阳离子化大大加快了絮凝速度,絮凝时间可缩短到20min以内。胶原蛋白II阳离子化后的絮凝能力最强,当该絮凝剂投加量为200mg/L、絮凝时间为20min时,对高岭土悬浊液的絮凝效率达到80%以上。
简介:摘要 目的:研究重组Ⅲ型人源化胶原蛋白敷贴对皮肤创面的修复效果。方法:选取40例皮肤存在创口的患者作为研究对象,依据随机数字表法分为观察组与对照组,各20例。对照组给予CO2激光治疗,观察组在对照组基础上使用重组Ⅲ型人源化胶原蛋白敷贴,比较并评估两组的创面愈合时间、创面面积、缩小率以及抑制色素沉着和瘢痕形成的作用。结果:观察组治疗9 d就有患者痊愈,对照组没有患者痊愈,观察组1个疗程痊愈率较对照组高70%,差异有统计学意义(P < 0.05);观察组在每个时间点上的创面总面积平均值都比对照组小,在治疗12 d后两组创面面积的差异有统计学意义(P < 0.05);治疗9 d后观察组的创面面积缩小率明显高于对照组,差异有统计学意义(P < 0.05);观察组显著抑制创面色素沉着、瘢痕形成的作用好于对照组;重组Ⅲ型人源化胶原蛋白敷贴在本研究中没有引发任何不良反应。结论:重组Ⅲ型人源化胶原蛋白敷贴在创面修复愈合中显示出较好的疗效,并且在一定时间范围内能够促进创面的痊愈和收缩并具有良好的安全性。
简介:摘要胶原蛋白是保健品中的明星分子,是由动物结缔组织提取而来。对皮肤表面的蛋白质分子具有较大的亲和力、较弱的抗原性、良好的生物相容性和生物降解安全性,可降解吸收,适应性强,在生物医学材料、组织工程、美容、食品等方面都具有良好的发展前景和较高的研究价值。本实验使用实验室以猪皮为原料制备的胶原蛋白为样本,对胶原蛋白的定量分析和鉴定,认识其生化性质,熟悉其蛋白组成,以便更好地辨识目前市场上的胶原蛋白产品。