简介：以土霉素产生菌龟裂链霉菌（Streptomycesrimosus）D-7号为出发菌株，经自然分离，纯化处理后，再经摇瓶初筛、复筛获得高效价菌株10号，其摇瓶效价提高12．6％。经传代实验表明，该高产菌株遗传性能较为稳定。在15m^3罐上生产试验，与出发菌株相比，发酵效价提高7．18％，发酵总亿提高5．48％。

简介：以玉米须浸膏为原料，采用萃取和液相制备色谱相结合的办法分离得到高纯度玉米须黄酮单体,并优化出纯化工艺。

简介：目的探讨大鼠胰腺干细胞体外分离、纯化的实验条件及其定向分化潜能。方法应用胰腺原位灌注V型胶原酶消化大鼠胰腺组织，100目滤网滤过，Ficoll400浓度梯度离心法分离胰腺干细胞，采用添加表皮生长因子（EGF）、成纤维细胞生长因子（hFGF）的培养基行体外培养。运用荧光免疫染色法检测细胞表面CK-19、Fdx-1、Nestin、Insulin和Glucagon蛋白，计算阳性细胞率。双硫腙（DTZ）染色鉴定诱导分化后的细胞，光电酶标记法ELISA检测胰岛素分泌功能。结果本实验获取的胰腺干细胞，体外培养可稳定传代培养8代以上。细胞表面CK-19、Pdx-1和Nestin蛋白均呈阳性，阳性细胞率分别为（88．6±6．2）％、（84．6±8．6）％和（81．3±7．5）％。诱导分化后细胞经DTZ染色呈棕红色。在高糖刺激下，培养上清液中胰岛素含量增高。结论本法可获取高纯度、多数量的胰腺干细胞，在人工诱导下可定向分化为具有胰岛素分泌功能的胰岛样细胞团，为临床胰岛移植获得足量细胞来源提供实验基础。

简介：目的KIAA1199是一种功能未知的胞浆蛋白,通过制备多克隆抗体来为进一步研究其功能奠定基础.方法采用PCR技术扩增出目的基因,将其克隆到pMAL-C2X和pGEX-5X-1原核表达载体中.经IPTG诱导后,重组质粒pMAL-C2X/KIAA1199和pGEX-5X-1/KIAA1199,分别表达含麦芽糖结合蛋白(MBP)的MBP-KIAA1199融合蛋白和含重组谷胱甘肽转移酶(GST)的融合蛋白GST-KIAA1199.其中,MBP-KIAA1199融合蛋白经纯化后,免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体；GST-KIAA1199融合蛋白用于检测抗体特异性.此后应用ELISA及Westernblot方法鉴定该抗体.结果pMAL-C2X/KIAA1199和pGEX-5X-1/KIAA1199两个重组质粒构建成功,并获得了高效价的特异性多克隆抗体.结论成功制备了KIAA1199抗体,为进一步研究基因功能奠定了基础.

简介：目的建立一种心型脂肪酸结合蛋白新的纯化方案.方法以牛心为材料,通过凝胶过滤层析,疏水层析,离子交换层析,快速分离纯化出脂肪酸结合蛋白.结果经SDS-PAGE和Westernblot鉴定,纯度及特异性均良好.并用其免疫大耳白兔获得抗脂肪酸结合蛋白的多克隆抗体.结论该纯化方案可作为一般蛋白的纯化战略.

简介：摘要：日常生活中使用的不同种类的纺织品因为本身的成分及结构,在使用及存储过程中容易吸收气体、液体、固体杂质，它们为各种致病微生物提供了适当的繁殖环境。影响纺织品品质并危害使用者健康,为了满足人民的健康保护需要，纺织企业加强了对抗菌纺织品的研究、开发和投资，对织物进行抗菌处理从而抑制或阻碍微生物产生危害,为消费者建立安全屏障。了解抗菌处理机理,确认霉变微生物的种类,提高抗菌处理的基础储备。

简介：目的：分离、培养、纯化家猫的骨髓间充质干细胞，并对获得细胞的表面标志物进行鉴定，为进一步利用骨髓间充质干细胞的细胞移植实验奠定基础。方法：采用全骨髓贴壁法体外分离、培养、纯化家猫骨髓间充质干细胞，通过多次更换培养液获得较纯化的骨髓间充质干细胞，倒置相差显微镜下对细胞形态进行观察；根据第1、3、5、7、9代细胞的镜下增殖情况绘制出生长曲线；通过流式细胞仪检测细胞表面标志抗原CD34、CD44和CD90的表达率。结果：在倒置相差显微镜下观察，分离培养的骨髓间充质干细胞贴壁呈梭形或纺锤形；原代细胞生长丛集成片，5～7d达到融合，进行传代；培养到第三代以后，细胞出现相对均匀的梭形扁平外观，迅速增殖的细胞呈涡流样排列；第3、5代骨髓间充质干细胞增殖能力强于第7、9代；采用流式细胞仪分析结果显示细胞的CD34、CD44和CD90阳性率分别为17．5％、97．9％和91％，这与骨髓间充质干细胞表面抗原的表达一致。结论：分离培乔的细胞具有骨髓间充质干细胞特性，成分相对单一，第3、5代细胞纯度高，增殖能力强，适用于进一步的实验研究.

简介：雷氏大疣蛛（Macrotheleraveni）是最近发现的异仿蛛科大疣蛛属的蜘蛛新种．雷氏大疣蛛毒素-V就是以该蜘蛛粗毒为原料，利用阴、阳离子交换层析和反相高效液相色谱分离纯化得到并命名的一种新型蜘蛛毒素．利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪分析得知它的相对分子质量为3133．48；通过初步活性研究证明雷氏大疣蛛毒素-V是一种昆虫专一性神经毒素．

简介：从28日龄断奶健康仔猪以及健康蛋鸡的粪便中分离出5株经初步鉴定为乳杆菌的菌株，其中BF1作进一步的生长特性及耐胆盐和耐酸性环境试验。试验结果表明，BF1生长速度快，产酸能力强。能耐受高达0．6％（w/v)的胆盐，以及pH值低于2．0的酸性环境。因此BF1是一株适合作为微生态制剂的生产用菌种。

简介：目的利用哺乳动物细胞表达含有西尼罗病毒（WNV）prM和E蛋白，形成病毒样颗粒（virus-1ikepartcles，VLPs），为西尼罗病毒感染的免疫诊断试剂的研制奠定基础。方法筛选典型西尼罗病毒株，构建重组质粒，转染293T细胞，表达并纯化西尼罗病毒prM-E蛋白，利用透射电镜、免疫印迹试验、间接免疫荧光实验0FA）和酶链免疫吸附试验（ELISA）对表达产物进行鉴定。结果重组质粒转染细胞后产生病毒样颗粒（viruslikeparticlesVLPs），转染细胞上清纯化物中透射电镜观察到重组蛋白形成的球型颗粒，免疫印迹试验和间接免疫荧光试验表明，表达的病毒样颗粒蛋白能够与抗西尼罗病毒抗体特异结合，具有良好的抗原性；间接ELISA证实，重组蛋白可以作为抗原用于检测患者血清特异性抗体。结论在哺乳动物细胞中表达的西尼罗病毒样颗粒具有良好的抗原性，为西尼罗病毒感染快速特异诊断试剂研制奠定了基础。

简介：　　毛冬青根中总木脂素配糖体的提取工艺尚未见报道,毛冬青木脂素配糖体提取工艺纯化鉴定,乙醇浓度和提取时间对毛冬青总木脂素配糖体的提取有显著性影响

简介：摘要为改革生物化学实验，提高实验教学水平，对“血清γ-球蛋白的分离与提纯”实验进行改进和重新整合，建立了综合性实验“血清γ-球蛋白的分离、纯化与鉴定”，实现实验内容和生化技术的综合与创新。经过4年的医学本科生教学实践，实验方法稳定，结果重复可靠，适合实验教学，有利于提高大学生的综合实验技能。

简介：视网膜Müller细胞是一种特化的神经胶质细胞,其贯穿着整个视网膜,为神经元细胞提供营养、促进视网膜祖细胞向神经元分化[1]及保护光感受器细胞等[2]功能;同时也通过多种途径参与视网膜的病理生理过程[3]。因此,建立Müller细胞有效的体外培养体系,有利于进一步研究其在视网膜的生理活动及病理过程中所起的作用。目前国内外学者都在努力探寻体外稳定地培养大量单一Müller细胞的有效方法。现就Müller细胞的培养、分离、纯化、鉴定等方法的研究进展作一综述。

简介：目的克隆人HMGBlA—box的cDNA，构建高效稳定的大肠杆菌（E．coli）表达菌株并对其诱导表达纯化．同时探讨其对间充质干细胞（Mesenchymalstemcells，MSC）的促分化作用。方法根据优选合成的HMGBl基因序列设计引物，PCR扩增目的基因片段，插入克隆载体pGEM—T并进行序列测定。重组克隆载体经BamHI和xhoI酶切．琼脂糖凝胶电泳分离目的基冈，插入含His标签的表达载体pET24a。将构建的质粒转染BL21大肠杆菌，经IPTG诱导后．SDS—PAGE观察表达量。HIS—link层析柱纯化重组人HMGBlA—box．蛋白印迹鉴定重组蛋白。将重组蛋白加入hBMSC培养体系中培养一周后，碱性磷酸酶染色检测其促MSC成骨分化作用。结果经RT—PCR扩增得到了261bD的DNA片段，经测序分析．与GenBank中报道的已知序列完全一致，构建了含融合蛋白的重组表达质粒。经诱导后细菌高表达A—boX，表达量为总蛋白的45％。经层析柱纯化后，蛋白印迹证实目的蛋白为高纯度的A—box。将A—box加入MSC培养体系中培养后，细胞活性无明显改变．但细胞碱性磷酸酶表达明显增高。结论成功构建了重组人HMGBlA—Box的表达载体．纯化的重组蛋白能有效促进MSC向成骨细胞分化。

简介：摘要：介绍水电解纯化设备纯化干燥过程的原理，干燥塔三塔流程零排放，并对纯化系统装置故障及排除方法研究分析。一般氢气纯化干燥再生工艺中，干燥器再生时加热吹除和冷却吹除过程要排放含有水汽的氢气。其排放量为整个生产产品氢气气量10-15%，这就造成了能源的浪费增加利润生产成本。因为水电解制氢生产主要用电，生产一立方氢气需要消耗5-6度电。实现再生气零排放的经济效益非常可观。介绍干燥器干燥氢气纯化工艺，其再生气零排放工艺利用生产本身的动力进行再生循环，使用冷冻水降低再生气出口温度排除大量的水分，是干燥再生过程零排放工艺实现。

简介：摘要：介绍水电解纯化设备纯化干燥过程的原理，干燥塔三塔流程零排放，并对纯化系统装置故障及排除方法研究分析。一般氢气纯化干燥再生工艺中，干燥器再生时加热吹除和冷却吹除过程要排放含有水汽的氢气。其排放量为整个生产产品氢气气量10-15%，这就造成了能源的浪费增加利润生产成本。因为水电解制氢生产主要用电，生产一立方氢气需要消耗5-6度电。实现再生气零排放的经济效益非常可观。介绍干燥器干燥氢气纯化工艺，其再生气零排放工艺利用生产本身的动力进行再生循环，使用冷冻水降低再生气出口温度排除大量的水分，是干燥再生过程零排放工艺实现。

简介：摘要目的构建细粒棘球蚴pET30a-EgG1Y162-2原核表达重组质粒，诱导表达EgG1Y162-2重组蛋白，为研制细粒棘球蚴疫苗提供研究基础。方法以细粒棘球蚴cDNA为模板，利用PCR法合成EgG1Y162-2目的基因，经限制性内切酶EcoRⅠ和HindⅢ双酶切后连接到原核表达载体pET30a中，构建pET30a-EgG1Y162-2重组质粒；将重组质粒转化至大肠埃希菌BL21（DE3）感受态细胞中，经异丙基硫代半乳糖苷（IPTG）诱导表达大量蛋白，采用亲和层析方法纯化重组蛋白；经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）分析蛋白纯化水平，蛋白免疫印迹（Western blot）法鉴定表达产物。结果成功构建pET30a-EgG1Y162-2重组质粒，诱导表达后菌体上清液和洗脱液均在相对分子质量约15 × 103处出现EgG1Y162-2蛋白目的条带，且200 mmol/L咪唑洗脱的蛋白抗原成分较纯。Western blot结果显示，纯化后带有His标签的EgG1Y162-2重组蛋白能被抗His单克隆抗体识别。结论成功构建了细粒棘球蚴pET30a-EgG1Y162-2原核表达重组质粒，诱导表达了EgG1Y162-2重组蛋白，为进一步开展抗细粒棘球蚴疫苗的研究奠定基础。

简介：植物体内普遍存在内生真菌,它们可以产生与宿主相同或相似的生理活性物质。通过微生物发酵产生生理活性物质可以为解决能源短缺和寻找替代能源开辟一条新途径。作者初步探讨了分离和纯化高产菌株以及对其发酵代谢产物的结构鉴定的方法。采用溶剂提取法、薄层色谱法和柱色普法,对从东北红豆杉(T.cuspidataSieb.etZucc.)上分离筛选出的高产紫杉烷类物质紫杉链格孢(Alternariaalternatavar.taxi1011Y.XiangetLUAn-guo)1011菌株的发酵产物进行分离纯化,提取了一个化合物Ⅰ。经紫外扫描、红外扫描、质谱、核磁共振等方法鉴定,确定该化合物为紫杉烷类二萜Ⅲ型化合物。图1表2参12。

简介：目前网箱养殖水域的硫酸盐还原菌（SRB）的危害表现日益严重,海水网箱沉积物中SRB分离鉴定尚属空白,针对不同属种的SRB开展生物修复具有一定的意义。在大亚湾大鹏澳网箱养殖沉积物中分离出25株硫酸盐还原菌纯菌株,通过对菌株的形态观察,生理生化特征和遗传特征的一系列研究,结果表明所有菌株均含有脱硫弧菌素,被鉴定为脱硫弧菌属（Desulfovibrio）其中CSRB2、CSRB4、ESRB2鉴定为脱硫脱硫弧菌（DesulfovibrioDesulfovibricans）,ASRB4、BSRB1菌株鉴定为脱硫脱硫弧菌河口亚种（DesulfovibrioDesulfovibricanssubsp.aestuarii）,其余菌株鉴定为需盐脱硫弧菌种（Desulfovibriosalexigens）。此海区SRB种类数量特征是需盐脱硫弧菌〉脱硫脱硫弧菌〉脱硫脱硫弧菌河口亚种。

简介：摘要：本文详细介绍了纳滤纯化工艺的原理及其关键技术参数，其中关键参数包括：透过率、纯化比、纯化体积等，针对这些参数，基于物料平衡理论提出了一种关键参数图表的绘制及使用方法，图表分为连续定容纯化过程曲线图及等比稀释纯化过程曲线图两种图表，并通过案例介绍了关键参数图表的使用方法。因此在纳滤纯化工艺研究中，可以利用图表法快速查取关联关键技术参数，进行工艺的制定，可行性的预判及实验方案的设计，是一种快速、灵活、科学的工程技术实用方法。