简介：摘要目的制备全人源表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor，EGFR)单克隆抗体，为基于人EGFR靶点的肿瘤免疫调节治疗提供基础制剂。方法采集110例胸部肿瘤(肺癌102例，乳腺癌8例)患者外周血，构建噬菌体单链抗体库。经噬菌体展示后筛选阳性克隆，测序并构建全长轻重链表达载体质粒，共转染HEK293。通过亲和层析获得纯化抗体，抗原抗体免疫反应测定抗体特异性和敏感性，生物膜干涉(biolayer interferometry，BLI)技术测定抗体亲和力和流式细胞技术(fluorescence activating cell sorter，FACS)检测对肿瘤细胞系EGFR结合活性。结果成功构建肺癌单链抗体噬菌体库，抗体库库容≥108，筛选获得两株单抗，分别为BTHG17-1，BTHG17-2，酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)测定结合抗原敏感性为10 ng/mL，亲和力在10－8 mol/L水平，两抗体结合相同表位，可特异性结合野生型EGFR和突变体EGFRvⅢ蛋白，具有结合肺癌和神经胶质瘤细胞活性。结论获得较高亲和力全人源EGFR单链抗体(single-chain variable fragment，scFv)，具有EGFR(包括EGFRVⅢ)特异性，为EGFR靶点封阻和免疫导向治疗研究提供一种新抗体工具。

简介：对15个月季引进品种进行黑斑病发病情况的观测,分析不同月季品种抗黑斑病的差异,筛选出抗黑斑病强的品种。结果表明,6月份为月季黑斑病发病初期,10月份达到高峰;通过对15个月季品种抗黑斑病的鉴定,其中1个为高抗品种(HR),1个为中抗品种(MR),2个为低抗品种(LR),6个为感病品种(CS),5个为严重感病品种(SS)。

简介：目的：克隆培养SD大鼠皮肤真皮多能干细胞,并对其生物学特性进行检测,以期为组织工程再生牙齿探寻一种可靠的成体干细胞.方法：采用贴壁细胞培养法和有限稀释法培养出生1d的SD仔鼠掌趾部皮肤真皮成纤维细胞,分别检测其克隆形成能力、增殖能力和多向分化能力,并对其进行分子标志分析.结果：培养获得的SD大鼠皮肤真皮成纤维细胞,其中7株单克隆来源的细胞具有较强的克隆形成能力、较高的细胞群体倍增能力;同时,这部分细胞高表达细胞表面分子标志物CD44和CD90;成骨诱导后可形成矿化结节,成脂诱导后可见细胞内出现脂滴.结论：利用贴壁细胞培养法和有限稀释法培养皮肤真皮成纤维细胞,可获得具有类似间充质干细胞的生物学特性的真皮多能干细胞.本实验成功培养并获得了单克隆来源的真皮多能干细胞,为后续实验奠定了基础.

简介：种子萌发期,筛选、鉴定高粱抗旱材料对挖掘种子萌发期抗旱基因以及培育抗旱性更强的高粱品种都具有重要意义。本研究采用聚乙二醇（PEG6000）模拟干旱胁迫,设置0（CK）、5%、10%、15%、17.5%、20%、22.5%和25%8个不同浓度梯度PEG6000对粒用高粱BTx623和甜高粱Rio进行干旱处理,确定PEG6000初步筛选浓度,然后利用PEG6000初步筛选浓度对全球收集的396份高粱进行初步筛选,筛选出较抗旱的材料逐渐加大选择压力,最终筛选出高抗旱性的高粱材料。基于以上试验,确定了大批材料初步筛选时PEG6000浓度为15%较为适宜。396份高粱材料经过15%PEG6000初步筛选时,相对出苗率达到80%以上的有89份,逐步加大筛选压力,最终筛选出4份抗旱能力很强的高粱材料,其中3份来自中国的粒用高粱,1份来自东亚的粒用高粱。随着处理浓度的增加,高粱抗旱性和耐盐性两者之间的相关性存在不确定性。

简介：参试260份烟草品种对青枯病抗性先做自然病圃初筛鉴定,从中选取表现R-LR和部份优质感病品种共n3份分菌系接种测定.结果表明,对青枯病Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型菌系反应R-LR的抗病品种有G3、反帝3号和G6等3份,这是迄今所发现抗病谱广且能抗强菌系的种质资源;抗Ⅰ、Ⅱ型菌反应R-MR,感Ⅲ型菌的品种有SPG117、OX2028和岩烟97等12份;抗Ⅰ型菌反应R-MR,感Ⅱ、Ⅲ型菌的品种有K326、K346、G80、RGll和Coker176等50份;对Ⅰ型菌反应为MS-HS的感病品种有中烟15、云烟87、春雷3号、大叶密目、大黄金和革新3号等195份,包括目前生产上的主栽品种NC89、云烟85、翠碧一号和红花大金元等.

简介：在被追踪的降血糖活性组分为未知的情况下,从南瓜中筛选出降血糖活性成分-南瓜多糖(PCE-C),并对其作初步鉴定.借鉴祖国经典方剂的溶剂提取法,并在药理试验的配合下采用动物实验进行筛选,用成分分析及紫外扫描法对PCE-C进行鉴定.结果表明,小鼠经腹腔注射7h后就可以使其血糖值由(15.32±3.38)mmol/L降至正常范围(5.77±1.46)mmol/L;南瓜多糖主要由糖(69.82%)和蛋白质(17.53%)组成,UV吸收显示一个典型的糖吸收峰,而无核酸(260nm)和蛋白质(280nm)的特征吸收峰.从而筛选并初步鉴定出南瓜中的降血糖活性成分为多糖类物质.

简介：【背景】相似穿孔线虫是一种重要的检疫性有害生物，其寄主范围广，危害具有毁灭性，已给我国农业生产造成潜在威胁。由于目前大多化学杀线剂毒性较高，筛选获得对相似穿孔线虫具有拮抗活性的微生物菌株对线虫防控具有重要意义。【方法】广泛从染病香蕉植株根际采集土壤样本，运用等比稀释涂布平板法分离菌株；采用摇瓶发酵法制备拮抗菌株上清液和发酵液。通过室内生物测定和盆栽试验，筛选出对相似穿孔线虫具有拮抗作用的细菌菌株，并通过16SrDNA的PCR扩增和序列分析，对拮抗菌株进行种类鉴定。【结果】获得5株对相似穿孔线虫具有较理想拮抗活性的细菌菌株。其中，菌株HD-86的作用效果最好，其发酵上清液处理24h后的相似穿孔线虫死亡率达100%。盆栽试验表明，菌株HD-86发酵液处理42和70d后对相似穿孔线虫的相对防效分别为77.34%和90.51%，均优于对照药剂阿维菌素。【结论与意义】菌株HD-86对相似穿孔线虫具有很强的拮抗作用，将其鉴定为洋葱伯克氏菌Burkholderiacepacia。本研究可为相似穿孔线虫生防制剂的研发和病害的防控提供依据。

简介：目的：筛选高抗氧化活性双歧杆菌优良菌株,为双歧杆菌抗氧化剂的开发与应用提供参考。方法：以新疆吐鲁番地区长寿老人源的16株双歧杆菌为出发菌株,以超氧阴离子清除率、DPPH清除率、羟自由基清除率、抗脂质过氧化率和还原能力为考察指标,比较不同菌株及部位的抗氧化能力,筛选优良菌株。采用形态学观察、API20A生化鉴定系统和16SrDNA序列分析对菌株进行分类学鉴定。结果：菌株不同部位抗氧化能力差异较大,无细胞提取物清除超氧阴离子、DPPH能力和抗脂质过氧化反应能力最强,菌体细胞清除羟自由基的活性最高,发酵上清液的还原能力强于其他部位。综合比较不同待测菌株的各项抗氧化指标,发现菌株BF-10的抗氧化能力较强且全面,为筛选到的高抗氧化优良菌株。分类学鉴定结果表明该菌株为动物双歧杆菌。结论：获得高抗氧化活性动物双歧杆菌BF-10。

简介：摘要目的分析红花素的分子特性，筛选并鉴定红花素抗脓毒症的潜在靶点。方法通过中药系统药理学分析平台（TCMSP）分析红花素的药理参数和分子特性。采用SwissTargetprediction服务器（提供化合物靶点预测的网站）和通过化学蛋白质相互作用分析来预测化学成分靶向蛋白的服务器（DRAR-CPI）筛选红花素抗脓毒症的潜在靶点，并与人类孟德尔遗传病数据库（OMIM）、毒性与基因比较数据库（CTD）和药物靶点数据库（TTD）中已发布的抗脓毒症相关疾病靶点进行匹配，筛选出红花素的抗脓毒症靶点，进一步通过分子对接服务器鉴定红花素抗脓毒症的潜在靶点。结果红花素的口服生物利用度为41.15%，药物相似度为0.24，可旋转键数为1，表明红花素口服吸收较好，具有良好的成药性。通过SwissTargetprediction和DRAR-CPI服务器共筛选到115个潜在靶点；从OMIM、CTD和TTD 3个数据库中共获得149个疾病靶点；将两个服务器筛选出的115个红花素靶向蛋白与疾病靶向蛋白进行匹配，发现既是分子靶点又是疾病靶点的蛋白有10个，分别为凝血因子Ⅸ（F9）、腺苷A1受体（ADORA1）、一氧化氮合酶2（NOS2）、丝裂素活化蛋白激酶1（MAPK1）、组织蛋白酶G（CTSG）、中性粒细胞弹性蛋白酶（ELANE）、蛋白C（PROC）、脂钙蛋白2（LCN2）、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）和前列腺素内过氧化物酶２（PTGS2）。经分子对接服务器鉴定显示，红花素具有与上述10个靶向蛋白结合的能力，为红花素抗脓毒症的潜在靶点；红花素可通过与靶向蛋白的关键氨基酸残基发生交互作用，从而发挥相应的药效。结论红花素能够通过调节CTSG、ELANE和LCN2抑制脓毒症组织和器官损伤，通过调控ADORA1、PTGS2、NOS2和MAPK1减轻炎症，通过调控PROC和F9抑制凝血并减轻脓毒症炎症反应，通过调节G6PD改善氧化应激而减少脓毒症的发生，最终预防和治疗脓毒症。

简介：摘要：自然界中产生的纤维素属于葡糖多聚生物大分子，是自然界植物细胞壁的最主要、重要的成分，植物体内的纤维素常与木质素等其它物质形成复杂的结构且交联致密难以被完全降解。目前对于纤维素降解主要通过筛选出高酶活的纤维素降解菌来降解天然纤维素，利用生物手段对纤维素利用加以拓展。本实验课题通过用CMC-Na（羧甲基纤维素钠）-刚果红固体鉴别培养基、牛肉膏蛋白胨固体扩大培养基、CMC-Na液体富集培养基以及CMC-Na发酵培养基进行鉴别筛选出一株酶活较高的纤维素降解菌，通过DNS法测定其CMCase活力为13.11U以及通过核糖体测序鉴定为Penicillium oxalicum （草酸青霉）。

简介：摘要：自然界中产生的纤维素属于葡糖多聚生物大分子，是自然界植物细胞壁的最主要、重要的成分，植物体内的纤维素常与木质素等其它物质形成复杂的结构且交联致密难以被完全降解。目前对于纤维素降解主要通过筛选出高酶活的纤维素降解菌来降解天然纤维素，利用生物手段对纤维素利用加以拓展。本实验课题通过用CMC-Na（羧甲基纤维素钠）-刚果红固体鉴别培养基、牛肉膏蛋白胨固体扩大培养基、CMC-Na液体富集培养基以及CMC-Na发酵培养基进行鉴别筛选出一株酶活较高的纤维素降解菌，通过DNS法测定其CMCase活力为13.11U以及通过核糖体测序鉴定为Penicillium oxalicum （草酸青霉）。

简介：裂球是甘蓝生产中存在的一个严重问题。本研究通过对7份春甘蓝和8份秋甘蓝不同耐裂性材料的田间裂球方式、裂球率、裂球程度的比较,综合最大裂口层数、裂口面积的表现,建立了甘蓝耐裂球性评价方法并制定了甘蓝个体裂球分级标准。根据春甘蓝叶球成熟后5天、秋甘蓝叶球成熟后15天的裂球指数将甘蓝种质群体的耐裂球性分为极耐裂球、耐裂球、中耐裂球、易裂球、极易裂球5级。对59份春、秋甘蓝种质进行耐裂球性鉴定筛选获得一批极耐裂甘蓝种质资源。同时,对甘蓝室内成熟叶球浸泡法评价耐裂球性进行了初探,首次提出室内浸泡能够准确地鉴定甘蓝的耐裂球性,可用于选育耐裂球品种及生产实践。本研究制定出了一套春、秋甘蓝耐裂球性的田间及室内鉴定方法与标准,筛选获得了不同甘蓝耐裂球种质,为甘蓝耐裂球性研究和育种应用提供技术支撑和优异材料。

简介：对40份初选萝卜种质分别接种Xcc8004和XccBJ两个菌株,进行黑腐病苗期抗性鉴定,对其中8份代表性萝卜种质肉质根切片接种Xcc8004进行抗性鉴定和27份萝卜种质幼苗接种8个效应物基因进行过敏反应鉴定。结果表明：不同萝卜种质苗期对黑腐病的抗性存在显著差异,筛选出高抗Xcc8004的材料3份、抗病1份、中抗4份,高抗XccBJ的材料1份、抗病2份、中抗5份。萝卜苗期对Xcc8004和XccBJ的抗病性极显著相关,幼苗和肉质根对Xcc8004的抗病性极显著相关。筛选出17份对不同效应物表现过敏反应的萝卜种质。对效应物XC_0241表现过敏反应的种质数最多,对XC_0542和XC_0541表现过敏反应的种质数次之。不同抗源对不同效应物的过敏反应程度有所不同。稳定可靠抗病资源的获得为萝卜抗病育种和抗病机理的深入研究提供了基础材料。

简介：虎尾草（Chlorisvirgata）是禾本科虎尾草亚族的一种一年生草本植物，适应性极强，能在恶劣的盐碱化土壤上生长。本实验构建了虎尾草的cDNA基因文库，随机挑选出2300个克隆，并且通过点杂交分析在NaCl胁迫下这些基因的表达情况。结果表明有59个基因在NaCl胁迫下强烈表达，这些上调基因中23个同时也被NaHCO3胁迫表达。这个结果暗示了NaCl逆境与NaHCO3逆境在基因表达的应答机制存在明显的差异。59个基因可以分成8类：能量代谢（21．70％），信号转导（5．0％），氧化逆境（13．30％），光合作用（10．0％），生长发育（5．5％），转录因子（1．67％），各种酶类00．0％）和一些未知基因（28．3％）。从中选出了一些上调基因进行Northern杂交分析，Northern杂交表明这些基因中的有些是在根或叶中表达，与点杂交的结果有一致的趋势。

简介：利用溴甲酚紫染色透明圈法和发酵测酶活的方法，从黄皮果、芒果自然发酵过程中筛选出5株酯酶产生菌，其中HP-4菌株活性最高，经生理生化及16SrDNA鉴定，初步断定该茵为芽孢杆菌属，丰富了微生物菌种资源库，同时为酯酶的工业化生产提供了一定参考。

简介：从毛竹林土壤中分离得到9株木霉菌株，采用平板对峙法评估了9株木霉菌对4种柑橘产后病害病原菌的抑制效果，并利用ITS及rpb2基因序列分析鉴定木霉菌株。结果发现：（1）9株木霉对柑橘青霉病菌具有较好的抑制效果，对峙培养7d的抑制率均达到100％；9株木霉对其它3种柑橘产后病害的抑制率不同，其中菌株T2对柑橘黑腐病抑菌效果最好，抑制率达8584％；菌株T3和T8对柑橘酸腐病菌抑制效果最好，抑制率达100％；菌株T3、T5和T6对柑橘绿霉病菌抑制效果最好，抑制率达80％。（2）共鉴定木霉菌3种，其中哈茨木霉（Trichodermaharzianum）6株（T1、T3、T5、T7、T8和T9），为优势种；绿木霉（Trichodermaviride）2株（T2和T4）；绿色木霉（Trichodermavirens）1株（T6）。

简介：为研究小麦近缘属种的耐低磷特性,本试验通过砂培法,以9种山羊草为供试材料,对低磷和正常供磷2个处理下山羊草苗期的相对地上部干重、相对根干重、相对生物量、相对根长、相对根冠比、相对磷积累量、相对磷吸收效率进行研究。结果表明,不同基因型山羊草对低磷胁迫的反应存在一定的差异。相关分析和主成分分析结果表明,相对地上部干重、相对根干重、相对生物量和相对磷积累量可作为耐低磷基因型山羊草筛选的指标。筛选结果表明,双角、粘果、小伞和拟斯卑尔脱山羊草为耐低磷型山羊草,尾状山羊草为磷敏感型山羊草。

简介：采用常规分离法从不同地区健康黄栌根系中共分离得到33株内生真菌，其优势类群主要包括无孢菌群、腐质霉属、青霉属等，而且不同地区黄栌的根系内生真菌种类和数量有一定差异。内生真菌对黄栌枯萎病病原——大丽轮枝孢的拮抗试验结果表明：团炭角菌、黑乌霉属、假丝酵母属的菌株抑制作用较强，其它内生真菌菌株对大丽轮枝孢均有不同程度的抑制作用。

简介：摘要：番茄黄化曲叶病毒是番茄上的重要病害之一，严重影响番茄产量和品质，给番茄生产造成巨大的经济损失。目前国内外对该病的防治主要依赖于化学药剂，但其有一定的抗药性、且会对环境造成污染，因此培育抗病品种是最有效的防治方法。我国具有丰富的番茄种质资源，是开展番茄黄化曲叶病毒抗性研究的良好材料。本研究对全国收集到的23份番茄材料进行了TYLCV检测，筛选出12份抗性较好的材料。为培育抗病品种及防治番茄黄化曲叶病毒病提供了新的种质资源。

简介：基于临床上犊牛腹泻的高发病率,致使犊牛死亡严重,给养牛业造成重大经济损失。本实验采用细菌常规分离鉴定方法和96孔板微量滴定法。筛选出肠球菌及其生物膜;研究生物膜的生长特性。共筛得细菌214株,其中,肠球菌24株;肠球菌所占的比例为11.21%。利用96孔微量板测定,得到生物膜阳性菌1株。生物膜阳性率为4.17%。为临床上犊牛腹泻的诊断和治疗提供依据。