简介：目的应用反向点杂交技术(RDB)建立敏感、特异、简便的检测方法来同时检测17种不同的β-珠蛋白基因突变。方法应用反向点杂交技术对734例来我院做产前检查的高危患者进行检测，发生突变位点共68例，占92.6％。其中，654／N18例占2.45％，41-42／N31例占4．22％，22-28/N5例占0.6％，BE／N5例占0．41％，-28/N4例占0.54％，17／N4例占0.5％，14-15／N1例占0．14％，-29／41-421例占14％，71-72／N1例占0．14％。结论反向点杂交方法应用于进行β-地中海贫血的血液学筛查、基因诊断、携带者检出具有简便、快捷、准确的特点。

简介：目的应用反向线点杂交技术（reverselineblothybridization,RLB）快速鉴定临床常见的曲霉属和毛霉目真菌。方法收集我院真菌和真菌病研究中心保存的5种曲霉菌（烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉、构巢曲霉）和7种毛霉目真菌（冻土毛霉菌、总状毛霉菌、卷枝毛霉菌、少根根霉、小孢根霉、微小根毛霉、伞状犁头霉）,共计98株菌株。利用真菌通用引物ITS1和ITS4对菌株进行PCR扩增,用12个真菌种特异性探针与扩增后产物进行反向线点杂交。将RLB结果与真菌传统形态学鉴定结果、ITS区DNA测序结果进行比较。结果RLB可以正确鉴定98株实验菌株,与形态学方法和ITS区测序方法鉴定结果100%一致,种特异性探针之间未见交叉杂交,显示出该方法的高度敏感性和特异性。8株阴性对照菌株（白念珠菌、茄病镰刀菌、尖端赛多孢、马尔尼菲青霉、疣状瓶霉、棒曲霉、日本曲霉以及雅致小克银汉霉）,使用RLB方法无法鉴定。通过烟曲霉基因组DNA浓度10倍倍比稀释法验证RLB的敏感性为1.8×10-3ng/μL。结论RLB技术为实验室早期快速诊断、鉴定临床常见的曲霉属和毛霉目真菌提供参考。

简介：

简介：摘要目的探究对结核分枝杆菌利福平耐药相关基因rpoB突变以PCR-反向点杂交法检测的效果。方法设计结核分歧杆菌rpoB基因引物，采用PCR-反向点杂交法对40例结核杆菌临床菌株耐药性进行检测，对照由DNA测序法检测的标准结核分歧杆菌（H37Rv）rpoB基因，确定rpoB基因的变异情况，对PCR-反向点杂交法的灵敏度和准确性作出评价。结果40株临床菌株中有11株利福平敏感株的基因序列与对照的H37Rv相同，剩下的29株耐药株中检测到变异基因27株，其特异性为100%，阳性率为93.1%。结论rpoB基因本身高度保守,但由于rpoB基因突变导致结核分枝杆菌对利福平耐药。本研究使用PCR-反向点杂交法针对rpoB基因高突变区设计引物，此方法快速、简便、准确,能有效监测临床标本中结核分枝杆菌,对临床早期诊治结核病有极大帮助。

简介：探讨霍夫变换（Houghtransform）在聚合酶链反应-反向点杂交（polymerasechainreaction-reversedotblotting,PCR-RDB）检测基因突变结果的自动化判读中的应用。以凯普HMM-2I医用核酸分子快速杂交仪检测基因突变为例,建立一种通过霍夫变换进行图像识别的方法,以快速判读PCR-RDB的检测结果,并提出一套基于移动终端的检测结果后处理方案。利用开发的软件,对113份地中海贫血常见突变以及86份人乳头瘤病毒分型的PCR-RDB检测结果进行了自动读取,并同人工判读结果进行了比较,二者的符合率均达100%。将霍夫变换应用于PCR-RDB检测图像的自动化判读符合实际需求,无需人工干预,可以降低肉眼判读的错误率并提高工作效率。

简介：摘要：目的：实时荧光PCR法与PCR-反向点杂交法在HPV检测中的对比研究。方法：选取我院2023年5月至2024年5月宫颈癌筛查的162例患者为研究对象，分别行实时荧光PCR法与PCR-反向点杂交法对样本进行HPV检测，以病理组织学检查结果为金标准，对比两种方法在HPV检测中的阳性检出率、一致性以及性能评估。结果：病理组织学检查结果为阳性122例，阴性40例；实时荧光PCR法和PCR-反向点杂交法在HPV检测中阳性检出率分别为70.99%和66.67%，差异无统计学意义（P＞0.05），两种方法检测符合率为90.74%，kappa值为0.78；实时荧光PCR法在HPV检测中灵敏度、特异性和准确度均高于PCR-反向点杂交法（P＜0.05）。结论：两种检测方法具有较高度的一致性，均可广泛用于宫颈癌筛查；实时荧光PCR法在HPV检测中临床诊断价值更高，具有更高的灵敏度、特异性和准确度，操作更方便，检测用时更短，更适合临床实验室推广应用。

简介：目的：建立检测猪常见致病菌的反向斑点杂交方法。方法：将23SrRNA基因芯片用的针对12种细菌的25～30mer探针加长到30～38mer,2对通用引物序列不变。用地高辛标记下游引物,以尼龙膜为载体制备膜芯片,检验探针/膜杂交的特异性和敏感性;另外设计1条大肠杆菌K88基因探针、一段带K88探针的报告基因和1对报告基因的反向PCR引物,在PCR体系中增加封口的K88报告基因和反向引物对,被检样品扩增后进行膜杂交。结果：修改的13条探针与参考目标菌株在膜上成特异性杂交,对52个参考菌株和野外分离株的检测准确率为92%;膜杂交的敏感性与玻片芯片接近,最小检出量为100fgDNA;在尼龙膜上增加K88探针,与3重PCR产物杂交,可以检测到大肠杆菌K88毒力基因。结论：建立的反向斑点杂交方法简便快速,检测成本低,可用于仪器设备不足的实验室,同时可以加入检测如大肠杆菌K88等致病基因,提高基于保守基因的芯片的诊断能力。

简介：

简介：目的：建立一种能同时快速检测奈瑟淋球菌、沙眼衣原体、生殖支原体、单纯疱疹病毒1型和2型的杂交检测方法。方法：选取靶基因16SrRNA基因和gD糖蛋白基因，设计2对通用引物和特异性探针，建立双重PCR结合反向斑点杂交技术检测以上4种病原体，并对其检测能力进行评估。结果：建立的杂交检测方法检测奈瑟淋球菌、沙眼衣原体、生殖支原体、单纯疱疹病毒1型和2型的敏感性分别为1CFU、3IFU、6．7pg／μL、1CFU、1CFU；各特异性探针只与相应病原体扩增产物杂交，未见交叉反应；与临床常规检测方法比较，一致率达96．8％，并显示能检出沙眼衣原体和生殖支原体双重感染。结论：该方法敏感性高、特异性好，并能同时检测多种病原体，在性病的快速诊断和病因学筛查等方面具有重要意义。

简介：摘要用PCR-LiPA可简便、快速、灵敏、特异地检测出一部分结核分支杆菌耐药株的rpoB、katG、rpsL、rrs、embB基因突变，可作为临床结核分支杆菌耐药性的辅助诊断手段。

简介：目的评价PCR结合反向斑点杂交法检测福尔马林固定、石蜡包埋组织中曲霉感染的可行性。方法选取39例病理证实曲霉感染的患者活检标本（21例为鼻窦感染标本、18例为尸检标本），以1对真菌特有的28SrRNA保守序列结构作为真菌通用引物，以临床常见的4个曲霉菌种：烟曲霉、黄曲霉、黑曲霉、土曲霉的种特异性序列为种特异性探针，与扩增产物进行反向斑点杂交。结果尸检标本阳性率为55．6％（10／18），鼻窦标本阳性率为76．2％（16／21），特异性均为100％。在这些曲霉所致的系统性感染中，烟曲霉是主要的致病真菌。结论该方法能对临床无法培养的石蜡组织块进行回顾性病原学研究，并可以鉴定常见的曲霉菌种，有良好的特异性和敏感性，适用于临床曲霉感染的检测。

简介：论述了龙眼有性杂交的各个技术环节，包括花粉采集及处理、母本花穗的选择及处理、授粉、保果以及存在问题等，为开展龙眼杂交育种提供参考。

简介：摘要：甜瓜是一种经济作物，适合大规模的种植。提升甜瓜的口感和产量的方法是进行杂交，将不通性状的植株基因进行重组，挑选出香甜可口和产量高的植株，经过培育制成种子。本文研究了甜瓜杂交制种技术的具体方法和注意事项。

简介：所谓反向思考,就是从事物相反的方面来思考,从而发掘出新的甚至是更深层更有价值的东西。例如打仗,由于敌人火力太猛,正面进攻受阻,伤亡不小,怎么办?有

简介：打破常规。学会逆向思维，可以让我们的生活变得更加精彩有趣。由日本设计师发明的反向伞，既另类又实用，它将整个雨伞的结构与折叠方式完全颠倒过来：把雨伞的骨架移到了伞外，可以防止被大风吹翻；收起雨伞后，打湿的那面将在伞里，不用担心弄湿衣服，还可稳稳地直接放在地上。

简介：摘要随着我国农业的飞速发展，玉米单产的不断提高，我国玉米制种面积不断扩大的同时，因自然灾害、环境条件及技术等造成的种子质量不合格、减产减收甚至绝收现象时有发生，给制种单位和制种农户带来严重的经济损失，大量劣质种子也给农业生产带来严重后果。

简介：

简介：牛肉是营养丰富的高蛋白，低脂肪肉食品，深受广大消费者喜爱，发展肉牛生产前景十分广阔。

简介：

简介：反向物流包括回收物流和废弃物物流等．它是现代物流活动的一个重要组成部分在反向物流的实施过程中，最困难的是制造商和零售商的目标不一致。导致反向物流的管理非常艰巨。因此，企业必须从供应链一体化的高度去认识和解决反向物流管理问题．