简介::改良双缩脲比色法测定食品中蛋白质含量。最大吸收峰为 540nm。线性范围为 0.00-55.13mg/25ml,该方法与凯氏定氮法用 t 检验法检验无显著差异 关键词:蛋白质;双缩脲反应;比色测定;凯氏定氮 中图分类号:O629.73 文献标识码:B 文章编号: improved method of biuret spectrometry determines content of protein in food YUE-Qiu-hong, (Xi’an zhongyuan International Certification Techical Services Co.LTD, Xi’an, 710068, China) Abstract:An improved method of biuret spectrometry determines the content of protein in food. The optimum absorbance peak gives 540nm.A positive correlation exists between absorbance and protein content in the rage of 0.00-55.13mg/25ml.This method is not apparently different from Kjeldahl by t-test. Key words:Protein; Biuret; Spectrometry; Kjeldahl 前言部分。 凯氏定氮法测定蛋白质含量结果准确,但耗时太长,危险性高,对环境污染大。双缩脲法传 统方法显色时间较长,溶液澄清度不好,重现性差。双缩脲反应受温度,时间影响较大,一般常温下 (20-25℃) 需 1h ,40℃需 15min,60℃需 5-10min。另外加入异丙醇可降低淀粉的溶解性,有利于蛋白质的提取和显色。 为了提高蛋白质测定的速度及结果的准确性,通过对双缩脲的改良,并与凯氏定氮法比较,以确定改良后的双缩脲法的可行性。 材料与方法 蛋白质中含有两个以上的肽键,能与 Cu2+在碱性条件下发生双缩脲反应,生成紫红色络合物,其颜色深浅与蛋白质含量成正比,而与蛋白质分子量无关。 材料与试剂 0.15mol/L KOH (分析纯 天津金汇太亚化学试剂有限公司) 谷朊粉 (山东成武山河粉业有限公司 ) ,全蛋粉(济南顺发食品有限公司 ) 双缩脲试剂:60ml 4%CuSO4.5H2O(分析纯,天津金汇太亚化学试剂有限公司生产 )200ml 2.5%酒石酸钾钠(分析纯辽宁嘉诚精细化学品有限公司生产 ) , 6 0m l 5 m o l/L KO H ,用蒸馏水定容至 50 0m l。 异丙醇(分析纯 苏州市相城区圣昊精细化工厂 ) 仪器与设备 UV-VIS 分光光度计 (北京美国哈希 HACH 公司) 25ml 具色塞比管 离心机 (80-2 型 常州拓兴实验仪器厂) 超级恒温水浴震荡器 (HZS-H 型 哈尔滨东联电子技术开发有限公司) 注明所用仪器型号(放在仪器名称前)、生产厂商、主要和关键配件、条件。 方法 标准溶液的配置 称取 2.0g 谷朊粉,0.15 mol/L KOH 溶解定容至 100ml,充分摇匀后粗滤, 以此滤液做为标准蛋白 液 。 取 此 滤 液 5 m l 做 凯 氏 定 氮 , 计 算 出 1 m l 中 含 蛋 白 质 的 量 ( mg ) 。 实验条件的确定:
简介:目的:确定双缩脲法测定胸腹水总蛋白和溴甲酚绿法测定胸腹水白蛋白的检测限,并做其检测范围线性评价。方法:制备空白样品,选择近检测限和病理高值的病人样品。在日立7600全自动生化分析仪上分别用双缩脲法测定总蛋白和溴甲酚绿法测定白蛋白,做检测低限和生物检测限分析,采用EP-6P做线性评价和多项式做线性评价。结果:双缩脲法测定胸腹水总蛋白的检测低限为0.47g/L,生物检测限为1.3ag/L,2。5~49.7g/L范围内线性符合临床要求。溴甲酚绿法测定白蛋白的检测低限为0.44g/L,生物检测限为0.98g/L,1.2~35.2g/L范围内线性符合临床要求。结论:双缩脲法测定胸腹水总蛋白和溴甲酚绿法测定胸腹水白蛋白能满足临床要求.
简介:摘要目的对一种新的液体双试剂谷氨酸脱氢酶检测试剂盒(GLDH)进行方法学评价。方法评价北京九强生物技术股份有限公司新型液体双试剂及英国Randox公司干粉谷氨酸脱氢酶检测试剂盒的精密度、线性、干扰因素、最低检测限、相关性以及稳定性。结果1)九强及Randox试剂的批内精密度和室内精密度良好;2)在1-120U/L检测范围内,九强及Randox试剂稀释线性良好;3)抗坏血酸、血红蛋白、结合胆红素对测定均无明显干扰,抗丙酮酸干扰性能九强优于Randox;4)两种试剂的最低检测限可以满足临床需求;5)九强与Randox试剂在0.7-120U/L,回归方程为y(九强)=1.006x(Randox)-0.108,相关系数为0.999,;6)九强试剂开盖一个月,测定质控稳定性良好,而Randox试剂有明显下降趋势。
简介:目的收集北京大学人民医院疑似非淋球菌尿道炎泌尿生殖道标本130份,分析支原体感染的情况及耐药状况,帮助临床合理选用抗生素,提高疗效。方法对130份标本用支原体培养、鉴定、计数及药敏试验试剂盒(比色法)(MycoplasmaIST2)进行支原体的检测、计数及药敏试验。结果在130份标本中,检出支原体共59份,检出率为45.4%。解脲脲原体(Uu)、人型支原体(Mh)和uu联合Mh的阳性率分别为42.3%(55份)、1.5%(2份)和1.4%(2份)。uu对抗菌药物的敏感率分别为多西环素(100)、四环索(98.2%)、交沙霉素(89.1%)、克拉霉素(87.3%)等。耐药率最高的是环丙沙星(73.4%),其次是氧氟沙星(47.3%)。结论在支原体导致的非淋球菌尿道炎中,主要由uu引起(93.2%,s5/S9);临床治疗推荐使用多西环素、四环素、交沙霉素、克拉霉素。