简介：目的探讨将胰腺癌MiaPaCa-2细胞总RNA转染树突细胞（DCs）最优化的方法。方法以rhGM—CSF、rhIL-4和TNF-α联合诱导外周血单核细胞以获得DCs，观察DCs的形态变化，流式细胞术检测DCs表面标志CD40、HLA—DR、CD83和CD86表达，混合淋巴细胞反应（MLR）测定DCs刺激异体T细胞增殖的能力。采用脂质体转染、电穿孔及被动转染三种方法将MiaPaCa-2总RNA转染DCs，应用实时定量PCR法检测MUC1mRNA表达，MTF法测定DCs存活率。结果所获细胞具有典型的成熟DCs形态特征，CD40、HLA—DR、CD83和CD86阳性表达率分别为34．3％、50．2％、89．2％和73．6％，对同种异体T淋巴细胞具有极强的刺激增殖作用。电穿孔法DCs转染48h后，DCs的MUC1mRNA表达量为45．39±9．33，明显高于脂质体法的31．68±7．25和被动转染法的18．53±3．26；DCs存活率为（80．36±2．43）％，较被动转染法的（91．48±5．42）％略低，但高于脂质体法的（67．44±2．51）％，且基本稳定在80％左右。结论采用电穿法将胰腺癌MiaPaCa－2细胞总RNA体外转染DCs的效率较高，且较安全。

简介：将壳聚糖纳米粒包裹的报告基因pEGFP-N1质粒转染至HEK293细胞,并在HEK293细胞中成功表达荧光蛋白的基础上,进一步将本室自行构建的PNP基因的真核高效表达载体质粒pcDNA3-PNP转染至HEK293细胞.转染72h后,对转染的HEK293细胞给予前体药6-MPDR至终浓度40μg/ml,一天后,采用MTT比色法测定药物对细胞增值的影响,并进行统计学处理.实验结果表明采用壳聚糖纳米粒转染试剂转染并给予前体药6-MPDR的实验组活细胞数,与用壳聚糖转染但不给前体药6-MPDR的对照组活细胞数相比,有显著差异(P＜0.05),说明新筛选出的壳聚糖纳米粒转染试剂可以将PNP自杀基因递送至靶细胞中,并在细胞中进行表达,从而使PNP/6-MPDR自杀基因系统发挥杀伤细胞的作用.分别采用相同工作浓度的脂质体与壳聚糖纳米粒转染试剂转染相同浓度的基因质粒,壳聚糖纳米粒对靶细胞生长数量影响很小,说明的壳聚糖纳米粒细胞毒性大大低于阳离子脂质体的细胞毒性.

简介：无

简介：摘要目的以增强型绿色荧光蛋白（EGFP）为报告基因，观察干细胞生长情况及两者间生物相容性。方法WST-1法检测rMSCs增殖效应，Westernblot法检测hBDNF蛋白的表达。结果CD34、CD45、CD29、CD90阳性细胞比率分别为0.79%、6.8%、98.9%、99.9%。结论Ad5-hBDNF-EGFP能成功转染接种在水凝胶上的rMSCs，两者间具有良好的生物组织相容性。

简介：摘要：高效DNA体外转录的模板纯化是分子生物学研究中的关键步骤，直接影响转录产物的质量与纯度。传统的纯化方法存在时间长、操作繁琐及成本高等问题。本文提出了一种改进的DNA模板纯化策略，旨在提高纯化效率和降低操作难度。通过优化离心与色谱方法的结合，提出了一种快速、简便且高效的纯化方案。这一改进能够大幅提高体外转录反应的成功率，为大规模生产RNA分子提供了新的技术支持。

简介：

简介：摘 要:本文主要以采用体外转体法施工的沈阳市新建胜利大街快速路—揽军路跨铁路转体桥工程为实例，工程采用增设临时主墩进行体外转体的施工方法，有效解决了因设计主墩转体空间不足，无法满足转体需要的问题。本文重点对临时墩的设计结构进行研究，并采用有限元软件对其进行受力数值分析，根据实践数据，验证临时墩的强度、刚度、抗扭性能及稳定性，结果满足施工要求，对类似工程的施工具有指导意义。

简介：目的体外培养雪旺细胞并转染NT-3基因，观察转染后细胞的生物学行为。方法用预涂有10％多聚赖氨酸的培养瓶体外原代和传代培养SD仔鼠雪旺细胞并用抗S-100多抗鉴定细胞性质，原代培养12小时后加入10-5M阿糖胞苷，72小时后换成100μg/ml的G-418，连续作用5天后加入2μM氟丝扣林继续培养。用脂质体法转染入质粒pIRES2—EGFP—NT—3，免疫细胞化学检测NT—3的表达并用图象分析法定量，观察转染NT—3细胞的形态和细胞周期的变化。结果体外成功培养了SD仔鼠雪旺细胞，免疫细胞化学证实成功转染了NT-3基因，转染NT-3组有丝分裂期细胞数量较未转染组增高，但是细胞形态未见明显变化。结论细胞转染NT-3基因后，细胞的有丝分裂增快，细胞增殖增快。

简介：

简介：摘 要：介绍了外转子永磁 电机和外转子感应 电机两种外转子电机及特点 ，详细介绍了国内外科研人员在设计两种电机时的不同设计方法，并对比了各种方法的优缺点。最后介绍了外转子电机在近年来市场中的两种应用，阐述了 外转子电机的发展方向 。

简介：中国青少年研究中心的一项调查显示：学生学习负担从课内向课外转移。“00后”上课外班的时间大幅度增长，学习日上课外班的时间为0．8小时，是“90后”的两倍；休息日上课外班的时间为2．1小时，是“90后”的三倍。学习负担出现了从课内向课外转移的特点，小学生尤其突出。

简介：目的建立正常（CAG重复次数为19次）和异常（CAG重复次数为82和66次）atrophin-1[齿状核红核苍白球路易体萎缩（DRPLA）致病基因]全长基因真核表达体系，通过观察细胞形态及蛋白质表达水平和分布情况，比较稳定转染和瞬时转染两种细胞表达体系，为进一步研究建立良好的细胞模型。方法基于已构建的GFP-atrophin-1．019／Flp—InTREx293和GFP—atrophin-1-Q82／Flp—InTREx293两种稳定转染细胞株，利用四环素调控系统Tet—on诱导表达。正置荧光显微镜观察正常与异常atrophin-1融合蛋白在细胞中的表达定位，电子显微镜观察细胞超微结构的改变；脂质体介导法将重组真核表达质粒GFP—atrophin-1-Q19和GFP—atrophin-1-Q66瞬时转染293T和SH—SY5Y细胞，HE染色、倒置荧光显微镜和电子显微镜分别观察细胞形态结构、蛋白质表达定位和细胞超微结构，Westernblotting检测atrophin-1融合蛋白表达水平。结果在稳定转染体系中，绿色荧光信号大多位于细胞核内，异常蛋白质呈不均匀分布且有少数聚集现象；电子显微镜观察异常细胞胞核结构欠完整，核膜皱缩，核内结构紊乱。在瞬时转染293T细胞体系中，HE染色可见异常细胞核内形成粉紫色嗜酸性小体；大量atrophin-1融合蛋白在核内呈点状聚集现象；电子显微镜观察异常细胞核膜皱缩严重，核内大量电子致密物沉积且核仁消失；Westernblotting检测均表达atrophin-1融合蛋白。在转染的SH-SY5Y细胞体系中，蛋白质表达定位及Westernbloning检测结果与转染293T细胞基本一致。结论包含异常扩增多聚谷氨酰胺链的atrophin-1融合蛋白在真核表达体系中可产生明显的核内聚集现象，并引起细胞形态改变，此为研究DRPLA核内包涵体的形成及其在发病中的作用，以及进一步的干预治疗奠定了理论基础。

简介：摘要：马达不论是在日常生活中还是在现有工业产业中都有着不可或缺的地位。本文对于外转子马达进行研究，调整弹簧单连接结构为波介质结构连接，以提高机电性能和稳定性。

简介：《中华工商时报》2009年4月3日报道，日前，天津市商务委在天津市政协俱乐部举办外贸企业与大型零售商场、超市对接洽谈会。劝业场、中原百货、友谊新天地和家乐福、沃尔玛、华润万家等20家知名大型零售商场、超市，与北方集团、利和集团等50家外贸出口企业展开对接洽谈。据统计，现场达成近60项包销、代销、设立展位、参加集中促销等多种合作意向。另据了解，津洽会将开设外贸出口商品专区，组织外贸出口商品参会集中进行展示洽谈。

简介：据波士顿咨询公司和中国建设银行过去两年的调研．中国富人群体总计拥有33万亿元资产，其中已成功实现海外转移的部分约达2．8万亿元，相当于中国2011年GDP的3％。并且，这一趋势还在明显加快，预计两三年内转移至海外的资产将翻番。

简介：摘要：随着时代发展，我国的科学水平不断进步。目前很多用于细胞培养的洁净孵房大多利用蒸汽作为热源，采用净化机组+高效送风口的方式循环，风机采用内置式皮带传动离心风机，在实际运行中容易出现洁净孵房温度不均匀和生产不能连续进行的情况利用高分子均流膜和无蜗壳风机可以比较理想的洁净这一问题。

简介：摘要目的探讨重组腺病毒缺氧诱导因子-1α(AdHIF-α1)在大鼠缺氧脑微血管内皮细胞(BMEC)中的转染情况，为AdHIF-1α治疗缺氧的BMEC提供理论基础。方法建立大鼠BMEC的体外分离培养及鉴定，并用含100 μmol/L二氯化钴(CoCl2)的维持培养液培养，制成BMEC缺氧模型；然后将AdHIF-1α转染入缺氧的BMEC中，在荧光显微镜下观察荧光蛋白的转染情况。结果AdHIF-lα转染入缺氧的BMEC后，分别在12 h、24 h、48 h、72 h于荧光显微镜下观察AdHIF-lα的转染情况，结果显示，12 h开始出现少许荧光，光密度值(A值)0.13±0.01；24 h荧光表达有所增强，A值0.46±0.03；48 h荧光表达最明显，A值0.97±0.05；72 h可见荧光减弱，A值0.38±0.02；不同时间点比较差异有统计学意义，两两比较结果显示，相邻时间点A值比较差异均有统计学意义(q＝25.88、40.00、46.28，均P<0.01)。结论重组腺病毒缺氧诱导因子-1α能成功转染至缺氧的BMEC。

简介：采用意法半导体公司的STM32F103C8T6为主控制器、仙童公司的FSBB20CH60F为智能功率模块设计出了一套外转子变频洗衣机驱动系统。系统对无刷直流电机进行稳定控制，主要完成电机硬件驱动及变频算法的设计。较同类系统在集成度和可靠性上都大有提高。经过测试，系统在功能上满足变频洗衣机的控制要求，所有模块均工作正常．可作为变频洗衣机的主控系统应用在相关领域中。

简介：本研究提出了一种在外转子永磁（PM）电机中对单位体积最大力矩的优化分析模型，其中最大可实现的空隙磁通密度取决于空隙直径与外径的分流比，定子槽面积为分流比、空隙磁通密度及在槽底定子直径与空隙直径的定子分流比的函数。在考虑或不考虑最大可实现空隙磁通密度由分流比限制的情况下通过分析得到最优化的分流比、定子分流比和空隙磁。另外，空隙磁通密度分布、槽与极的数量、槽的形状、齿尖、端绕组、转子轭、内径对最优设计的影响都进行讨论。有限元分析和试验的结果验证了分析的正确性。结果显示当平均空隙慈通密度稍低于最大定子磁通密度一半时外转子永磁电机的力矩密度为最大.

简介：背景与目的：肿瘤细胞受损伤时,其旁边未受损肿瘤细胞也出现损伤的现象称为旁观者效应,国内外研究发现多种肿瘤组织在体内外存在该效应,为进一步明确脑胶质瘤在药物化疗时是否存的旁观者效应以及CX43（缝隙连接蛋白43）对该效应的影响,通过构建并转染pCMV-Cx43cDNA质粒入C6细胞,上调缝隙连接蛋白CX43表达,增强缝隙连接功能,探讨转染缝隙连接蛋白CX43对脑胶质瘤化疗体外旁观者效应影响。方法：（1）通过C6细胞培养,并提取总RNA,行RT-PCR、质粒酶切及连接等,构建缝隙连接蛋白CX43真核表达重组质粒pCMV-Cx43cDNA;（2）通过脂质体行重组质粒pCMV-Cx43cDNA转染C6细胞,过表达C6细胞缝隙连接蛋白CX43,RT-PCR及Weston-blot检测CX43mRNA及蛋白表达水平变化。划痕荷载染料传输实验法检测转染缝隙连接蛋白CX43后缝隙连接功能;（3）通过体外TRASWELL细胞共培养模型,将转染pCMV-Cx43cDNA、空载体细胞分别分成化疗药物替膜唑胺处理组与替膜唑胺未处理组细胞,然后将两组细胞按一定比例分别接种TRASWELL细胞共培养板膜两侧,检测未化疗处理细胞存活率及凋亡率,观察体外转染CX43对体外化疗旁观者影响。结果：（1）成功构建带CX43目的基因的真核表达pCMV-Cx43cDNA重组质粒;（2）成功转染C6细胞并筛选稳定转染过表达CX43细胞株（C6-Cx43）及转染空载体的细胞株（C6-non）,C6-Cx43细胞Cx43mRNA及CX43蛋白表达显著增加;（3）在体外TRASWELL细胞共培养模型中,观察到体外未化疗细胞凋亡的旁观者效应,（C6-Cx43）组与对照组差异存在明显统计学意义。结论：（1）C6细胞转染重组质粒pCMV-Cx43cDNA,缝隙连接蛋白CX43表达增高,C6细胞GJIC功能增强;（2）在体外化疗时,C6-Non、C6-Cx43都存在化疗旁观者效应,而C6-Cx43的化疗旁观者效应显著。即转染缝隙连接蛋白CX43能放大体外化疗的旁观者效应。