简介:摘 要:国内和国外的大量研究指出,学生在进行科学概念的学习之前,在生活中通过多种途径,已经形成了对所学概念的看法,这些看法可能是片面的,可能是有偏差的,甚至可能是错误的,这些看法被称为前科学概念。
简介:摘要目的探索烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶亚单位4(NOX4)与鼻咽癌放疗敏感性的关系及相关分子机制。方法Western blot法检测鼻咽癌细胞CNE1、CNE2和HONE1及正常鼻咽上皮NP69细胞中NOX4的表达。构建NOX4基因干扰和过表达慢病毒载体转染鼻咽癌细胞,联合放射线、PI3K/AKT通路抑制剂LY294002处理,Western blot法检测相关蛋白的表达,CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况。用GraphPad Prism 5进行作图及统计分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果鼻咽癌细胞中NOX4的蛋白表达水平高于正常鼻咽上皮细胞。与空载慢病毒转染组(siNC组)相比,NOX4干扰慢病毒转染组(siNOX4组)鼻咽癌细胞增殖能力较弱[72 h吸光度(A)值:1.16比0.75]、凋亡率较高(2.9%比10.0%)。与空载慢病毒转染组(Vector组)比较,NOX4过表达组(NOX4组)鼻咽癌细胞增殖能力较强[72 h A值:1.01比1.32]、凋亡率较低(1.7%比1.1%)。联合PI3K/AKT通路抑制剂LY294002处理,与NOX4组比较,NOX4+LY294002组鼻咽癌细胞增殖能力减弱[72h A值:1.32比0.77)、凋亡率增加(1.1%比3.1%)。当联合4 Gy剂量放射线照射处理,与siNC/Vector+放射组比较,siNOX4+放射组鼻咽癌细胞增殖能力较弱[72 h A值:0.72比0.33]、凋亡率较高(7.8%比17.3%);NOX4+放射组鼻咽癌细胞增殖能力较强[72 h A值:0.65比0.78]、凋亡率较低(8.1%比3.8%)。与NOX4+放射组相比,NOX4+放射+LY294002组鼻咽癌细胞增殖能力较弱[72 h A值:0.79比0.56],凋亡率较高(3.8%比8.1%)。结论NOX4通过激活PI3K/AKT通路抑制鼻咽癌细胞对放疗的敏感性。
简介:摘要目的探讨细胞外组蛋白参与脂多糖(LPS)诱导的肺泡巨噬细胞损伤的作用及机制。方法体外培养小鼠肺泡巨噬细胞株(MH-S)并传代,取融合生长至80%时的细胞进行实验,用1 mg/L的LPS刺激细胞3 h后以50 mg/L的外源性组蛋白分别刺激细胞3、6、12、24 h(LPS +组蛋白3、6、12、24 h组),并设磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(PBS组)、LPS单独刺激组(LPS组)、外源性组蛋白单独刺激组(组蛋白组)及肝素预处理组蛋白组(肝素+ LPS +组蛋白组)。各组细胞经相应处理后,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清液中乳酸脱氢酶(LDH)及炎性因子表达,用FluxORTMⅡ绿色钾离子通道检测试剂盒检测细胞内K+浓度,采用蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)测定钾离子通道蛋白(TWIK2)、炎症小体(NLRP3)及凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的表达。结果与PBS组比较,单用LPS刺激可使LDH及白细胞介素(IL-1β、IL-18)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等炎性因子水平显著升高。与LPS组比较,加用外源性组蛋白处理后LDH及炎性因子水平显著升高,当组蛋白刺激时间为3 h时达到峰值〔LDH(U/L):123.10±1.83比85.32±1.66,IL-1β(mg/L):40.75±2.60比18.78±1.37,IL-18(mg/L):49.94±2.45比30.19±1.82,TNF-α(mg/L):36.51±1.56比20.84±1.61,均P<0.01〕。Western Blot结果显示,与LPS组比较,NLRP3、ASC及TWIK2蛋白在LPS +组蛋白组表达均明显上调(NLRP3/GAPDH:0.80±0.02比0.57±0.02,ASC/GAPDH:0.57±0.02比0.38±0.01,TWIK2/GAPDH:0.65±0.01比0.41±0.01,均P<0.01),而肝素预处理后上述蛋白表达均明显下调(NLRP3/GAPDH:0.28±0.02比0.80±0.02,ASC/GAPDH:0.25±0.02比0.57±0.02,TWIK2/GAPDH:0.35±0.01比0.65±0.01,均P<0.01),表明组蛋白可通过TWIK2活化NLRP3参与炎症反应。此外,LPS +组蛋白组细胞内K+浓度较LPS组明显下降(荧光强度:35.48±2.53比83.92±3.11,P<0.01);与LPS +组蛋白比较,给予肝素预处理后K+浓度明显上升(荧光强度:72.10±1.78比35.48±2.53,P<0.01),表明细胞外组蛋白可通过TWIK2致K+大量外流从而介导NLRP3活化参与肺泡巨噬细胞炎症损伤。结论细胞外组蛋白可致肺泡巨噬细胞炎症损伤,其作用机制可能与细胞外组蛋白激活TWIK2通道促进K+外流从而活化NLRP3有关。
简介:摘要目的研究姜黄素通过激活miR-192-5p/PI3K/Akt信号通路抑制肾母细胞瘤增殖并诱导细胞凋亡。方法采用CCK-8法探讨姜黄素对肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞增殖的影响,并探究其合适的作用浓度;V-FITC/PI检测SK-NEP-1细胞的凋亡率;荧光素酶报告试验验证miR-192-5p和PI3K的结合活性;RT-PCR检测miR-192-5p mRNA的表达水平;Western blot检测PI3K和Akt的蛋白质表达水平。结果姜黄素能够显著抑制SK-NEP-1细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,且呈剂量依赖性。RT-PCR检测结果表明姜黄素能够显著提高miR-192-5p的表达。此外,miR-192-5p显著抑制细胞的增殖并诱导其凋亡,且能够增强姜黄素对SK-NEP-1细胞的作用。荧光素酶报告试验结果表明miR-192-5p能够靶向结合PI3K,Western blot结果表明姜黄素可通过介导miR-192-5p的表达抑制PI3K和Akt的蛋白质表达水平。结论姜黄素能够抑制肾母细胞瘤细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制是通过介导miR-192-5p的表达并进一步抑制下游PI3K/Akt信号通路来实现的。
简介:摘要:随着我国社会经济的不断发展和进步,化工行业也取得了较大的进步,因此,为确保化工机械设备良好的运行状况,需要及时的进行故障诊断与故障控制分析工作,对于快速发展的其他行业来讲,化工行业的技术的正在不断的更新和进步,化工机械的发展规模也逐渐庞大起来,因为机械内部结构比较复杂,在化工生产的过程当中,机械设备一旦发生故障则会对化工企业造成严重的经济问题,严重的更会对工作人员的安全造成巨大的影响。基于机械化工设备的独特性,可以在日常运行中实施故障控制和预防措施,对设备运转的每个阶段都加以预防和控制,从而有效保障设备的正常运行,降低出现故障的频率。对于化工设备的管理的具有非常重要的现实意义。鉴于此,文章结合笔者多年工作经验,对化工机械的故障诊断与故障控制分析提出了一些建议,仅供参考。