简介：目的：构建人血清白蛋白（hSA）与小鼠乳清酸蛋白（mWAP）调控序列的杂合基因座。方法与结果：在pBR322载体上连入预先无痕连接的3对同源臂,利用基于Red同源重组系统的缺口修复（gap-repair）技术,分别对8kb的mWAP基因座3′调控区、16kb的hSA基因组编码序列及13kb的mWAP基因座5′调控区进行连续3次基因抓捕,最终将全长37kb的乳蛋白杂合基因座构入pBR322载体;通过PCR扩增、限制性内切酶消化和序列测定验证,确定mWAP基因座中的编码序列被精确地置换为hSA的基因组编码序列。结论：构建了整合有mWAP-hSA杂合基因座的pBR322载体,为研究杂合基因座在乳腺中的表达效果及置换型基因座表达的可行性提供了数据。

简介：由杜仲植株的根、茎、叶分离到内生真菌，分别对各菌株进行液体培养，筛选能产生与杜仲药材相同或相似黄酮类化合物的内生真菌。将培养物适当处理后，根据黄酮类化合物所特有的颜色反应进行初筛，然后根据TLC分析和紫外一可见光分光光度法测定结果进行复筛，结果从杜仲植株共分离得到44株内生真菌，其中1株（DZY5）能产出与其宿主相同或相似的黄酮类物质。

简介：烟曲霉是侵袭性曲霉菌病的重要病原菌之一,它通过产生无性分生孢子进行感染。孢子的生存能力极强,能在多种微生物培养基上和环境条件下生长。现对烟曲霉无性产孢的基因调控机制的研究进展作一阐述。

简介：针对植物内生真菌体外培养过程中出现的退化问题,对1株具有产西贝碱能力的平贝母内生真菌采用在其培养基中加入不同比例平贝母药材的方法进行了复壮处理。结果表明：在相同培养条件下,添加量为3%时,其发酵液中西贝碱产量可达到0.0563mg/L,比出发菌株提高了21.9%,且具有良好的遗传稳定性。

简介：以产小檗碱的内生真菌S6为出发菌株，采用多种单一或复合诱变措施对其菌丝体进行诱变处理，最终筛选得到高产菌株S-Nu-302。其小檗碱产量比出发菌株提高170％，达到12．28mg／L；生长速率提高81．7％，达到5．72g／L；经10次传代显示该菌株具有良好的遗传稳定性。

简介：为实现真菌发酵生产黄酮，用HPLC和氯化铝比色法，从四川、贵州、山东等地采集的银杏根、茎、叶中分离到7株产黄酮真菌。分子和形态学鉴定结果表明：这些菌株分别属于Colletotrichum和Fusarium，菌株QC102经鉴定为ColletotrichumacutatumSimmonds，其总黄酮产量为8．2μg／mL。

简介：S-NU-3-2菌株是对源自药用植物黄檗的内生真菌S6进行诱变获得的小檗碱产量比出发菌株有明显提高的突变株,本研究对其培养条件进行了优化,以期进一步提高其产量,为开发利用真菌发酵生产植物活性成分的新途径奠定基础。以菌丝生长和小檗碱产量为指标,筛选出了适宜该菌株发酵的基本培养基、碳源、氮源、光照和培养温度,并经进一步的正交试验优化,得出该高产菌株的最佳培养条件为豆芽汁基本培养基含蔗糖3%,酵母膏0.2%,pH7.0,温度26℃,全光照培养。与初始培养条件相比,在优化后的条件下,该菌株的小檗碱得率提高了47.2%,菌体生物量提高了24%。

简介：目的：构建一个牛dSl酪蛋白调控序列指导人溶菌酶（hLYZ）基因组序列的杂合基因座。方法：采用本实验室发明的连续3步缺口修复技术。将6个无痕连接的同源臂插入以pBR322为载体的骨架中，构成能进行3次连续基因抓捕的载体，利用Red同源重组系统介导的缺口修复技术，分别抓捕牛aSl酪蛋白3’端调控序列（9kb）、hLYZ基因座序列（5kb）、牛axSl酪蛋白5’端调控序列（20kb），使这3个基因片段自动无痕地连接在基因抓捕载体上，形成牛oLSl酪蛋白一hLYZ杂合基因座。结果：实验经过PCR扩增、限制性内切酶酶切验证和序列测定，验证了hLYZ的基因组序列对牛仪S1酪蛋白编码基因组序列的精确置换。结论：这种修复技术为乳腺生物反应器高效表达大载体的制备提供了可行的思路及方法。

简介：采用显色反应、薄层层析色谱和紫外吸收光谱法,对甘蔗叶内16株内生真菌的代谢产物进行黄酮类化合物检测。结果共筛选到3株能够产黄酮类化合物的内生真菌（GZ-1、GZ-4和GZ-5）。依据真菌的形态特征及ITS序列分析,鉴定结果表明菌株GZ-1、GZ-5为棘孢曲霉（Aspergillusaculeatus）,菌株GZ-4为黑曲霉（Aspergillusniger）。

简介：目的：利用荧光定量PCR技术,建立快速敏感特异的检测产气荚膜梭菌的方法。方法：以产气荚膜梭菌基因为靶序列设计引物和探针,以自产气荚膜梭菌菌株中提取的DNA为模板,优化引物和探针的浓度比,同时验证方法的特异性、敏感性。结果：建立的反应体系在上游引物浓度为0.45μmol/L、下游引物浓度为0.15μmol/L、探针浓度为0.3μmol/L时,具有良好的特异性和敏感性,与创伤弧菌等12种相关细菌均无交叉反应;对纯菌检测的灵敏度低于10CFU/反应体系。结论：建立的实时荧光PCR方法特异、灵敏、快速,能对战时气性坏疽做出快速准确的报告,实现对这种战时高发疾病的安全、快速和定量检测。

简介：从植物虎杖(PolygonumcuspidatumSieb.etZucc.)的根状茎中分离出24株内生真菌,分别对其液体发酵液进行抗菌活性检测,结果筛选出3株内生真菌具有抗菌活性,它们分别属于曲霉属、青霉属和无孢菌类.

简介：用鸡羽毛粉或人头发粉作为唯一碳、氮源，对9个耐热的金孢属（Chrysosporiumspp．）真菌菌株进行了产角蛋白酶筛选。研究结果表明：菌株H-49—2对鸡羽毛的利用能力最强，而菌株H-143—1对人头发的利用能力最强。对H-49—2菌株进行液体发酵产酶试验的结果表明，培养6d时酶活性最大，为9．6U／mL。

简介：采自吉林省长白山自然保护区的冷杉产丝齿菌（Hyphodontiaabieticola）是中国新记录种，一般生于针叶树上。该种特征为子实体平伏，子实层体表面深赭色，具有长管状的囊状体和圆柱形至近腊肠形的担孢子。根据采集的材料对该种进行了详细的描述和显微结构绘图。

简介：报道了从凤尾蕨属井栏边草（Pterismultifida）根状茎中分离出一内生真菌——菌株JJF006，对其形态特征进行了初步研究，并用TLC对该菌株培养物进行了分析。初步结果表明：该真菌液体培养基中含有芦丁成分。

简介：食用含有极高浓度三聚氰胺饲料的鸡所产的蛋含有的这种有潜在毒性的污染物的浓度仍然没有超过美国食品与药品管理局（FDA）规定的上限。这是首个检查了三聚氰胺污染的饲料对产蛋母鸡的影响的研究得出的结论。它发表在了美国化学会的《农业与食品化学杂志）（JournalofAgriculturalandFoodChemistry）双周刊上。

简介：N6-（2-羟乙基）腺苷[N6-（2-hydroxyethyl）．Adenosine，HEA]，又名茧草菌素，是一种钙离子拮抗剂，具有抗紫外辐射、抗血小板凝结和镇痛等效用，是集医药保健、化妆品等多项开发潜力于一身的生物资源，也是衡量虫草制品质量的一个重要生物活性物质指标。该研究采用高效液相色谱法对菌丝体中HEA进行检i贝0，以HEA的产量为指标，考察不同培养方法、培养基及其组分、前体物和氨基酸对粉被虫草（CordycepspruinosaPetch）cp菌株产HEA的影响。结果表明：在沙氏培养基上，静置培养120d，cp菌株HEA的产量明显优于摇床培养20d和发酵罐培养3d的产量，说明随培养时间的延长，cp菌株中HEA的累积会逐步增加。在静置培养条件下，cp菌株在查氏培养基上HEA的产量明显优于沙氏培养基和PD培养基，HEA的产量是沙氏培养基的3．7倍，是PD培养基的4．48倍。以查氏培养基为基础培养基，静置培养120d进行碳、氮源的筛选中，最有利于cp菌株产HEA的是蔗糖和硝酸钠；在无机盐的筛选中，K2nP04是促进cp菌株累积HEA最主要的无机盐，其HEA产量较对照（不添加无机盐的查氏培养基）提高了58．2倍；在查氏培养基上添加不同前体物和氨基酸，发现其结构类似物腺苷、次黄嘌呤和腺嘌呤都有促进cp菌株累积HEA的能力，其中腺苷和次黄嘌呤的效果最好，能提高HEA产量60％以上；添加的14种氨基酸中有组氨酸、L-谷氨酸、甘氨酸、天门冬酰胺、丝氨酸、亮氨酸、L-丙氨酸、赖氨酸和精氨酸等9种氨基酸能促进cp菌株产HEA的能力，其中组氨酸是最有利于cp菌株累积HEA的氨基酸，其HEA产量较ck（查氏培养基）提高251．68％，HEA产量达到（45．56±2．8）mg／L，菌丝体中HEA含量达到（4633．10±65．65）肛∥g。

简介：在虎杖组织培养过程中获得1株产黄青霉菌株（Penicillumchrysogenum，39B）菌株，其发酵液经TLC和HPLC检测含白藜芦醇，对其培养条件及白藜芦醇积累特性进行了研究，通过正交优化试验得到该菌最佳培养条件：20g／L葡萄糖，2g／L硝酸铵，pH值7．0，28℃，100r／min。3mmol／L苯丙氨酸、Mg^2＋、Zn^2＋能促进其生长和白藜芦醇的积累，其白藜芦醇含量达8．6617μg/100mL。

简介：目的分析新生隐球菌荚膜多糖GXM对小鼠神经小胶质细胞能量代谢和凋亡的影响.方法①采用紫外分光光度计检测GXM干预后的神经小胶质细胞能量产物ATP含量的改变情况.②采用AnnexinV-异硫氰酸荧光素（fluoresceinisothiocyanate,FITC）/碘化丙啶（propidiumiodide,PI）双标记法流式细胞术检测GXM细胞诱导神经小胶质细胞凋亡的情况.结果①GXM体外可诱导神经小胶质细胞产ATP能力下降.②GXM体外可诱导神经小胶质细胞的凋亡.结论新生隐球菌可通过GXM诱导能量代谢紊乱和凋亡来对神经小胶质细胞产生影响.

简介：利用PCR技术克隆了产紫杉醇内生真菌EFY-21的18SrDNA序列,通过同源性分析,初步确定该菌与拟盘多毛孢属（Pestalotiopsis）有较高的同源性,相似性为99%。为了进一步了解EFY-21的有关生物学特性,分别选用PDA、PSA、查氏、玉米粉琼胶、牛肉膏蛋白胨5种培养基,按照常规方法培养,用十字法测量菌落直径;同时选用查氏培养基为基本培养基,分别观察不同碳源葡萄糖、甘露醇、麦芽糖、果糖、可溶性淀粉,不同氮源KNO3、Ca（N03）2、（NH4）2SO4、NH4N03、（NH4）2HPO4、蛋白胨、尿素,不同培养温度10,15,20,25,28,30,37℃,不同pH值4,5,6,7,8,9对内生真菌菌丝的影响。试验结果表明：EFY-21在PDA培养基上生长最快,生长状况最好;供试的碳氮源中,对EFY-21菌丝生长影响的大小顺序为葡萄糖〉甘露醇〉果糖〉麦芽糖〉可溶性淀粉;蛋白胨〉KNO3〉Ca（N03）2〉NH4N03〉（NH4）2HPO4〉（NH4）2SO4〉尿素;最适培养温度为25～30℃;最适pH为5～7。

简介：目的：构建含Ubc9的逆转录病毒表达载体,筛选建立携带该基因的高滴度产毒细胞系,深入研究SUMO化修饰的作用。方法：聚合酶链反应（PCR）扩增获取目的基因Ubc9,定向插入逆转录病毒表达载体pMSCVneo,形成重组质粒pMSCV-Ubc9;脂质体法将pMSCV-Ubc9转染逆转录病毒包装细胞PT67;G418筛选产毒细胞克隆,扩大培养产毒细胞克隆,收获病毒感染NIH3T3细胞。结果：限制性酶切和测序鉴定证实Ubc9正确插入逆转录病毒表达载体。G418筛选获得稳定产毒的抗性细胞克隆,收获病毒能有效感染NIH3T3细胞。结论：携带Ubc9基因的重组逆转录病毒表达载体pMSCV-Ubc9构建成功,转染PT67细胞后包装出重组逆转录病毒,进而筛选获得了能转录表达Ubc9的产毒细胞系PT67-Ubc9。