简介:目的:从海参体壁组织中分离提取蛋白酶体,研究其酶学性质。方法:新鲜海参组织经匀浆、Tris-HCl缓冲液浸提后得到粗提物,再经(NH4)2SO4盐析、二乙氨乙基葡聚糖纤维素和丙烯葡聚糖凝胶S-300分离纯化后得到海参蛋白酶体。经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,其分子质量200ku。结果:海参蛋白酶体特异性最强的检测底物Boc-GAA-MCA,最适pH8.0,最适反应温度45℃。40℃时蛋白酶体活性稳定,在1h的孵育过程中呈现一定的热激活效应。在50~60℃,酶活力随孵育时间的延长迅速下降。K+、Ca2+、Mg2+、Zn2+均可明显抑制其活性。抗痛素、N-甲苯磺酰-L-赖氨酸氯甲基化酮、N-甲苯磺基-L-苯乙胺酰氯甲基酮及E-64均可显著抑制该蛋白酶体活性。结论:海参体壁蛋白酶体具有典型的蛋白酶体的复合型活性,其中胰蛋白酶样活性较强,之后是糜蛋白酶样活性,而肽基谷氨酰肽水解酶样活性最弱。
简介:目的探究柠檬酸、乙酸、氯化钠、亚硝酸钠和乙醇5种化学保藏剂对离体中华枝睾吸虫囊蚴生命力的影响。方法从感染中华枝睾吸虫的鱼肉中消化分离出中华枝睾吸虫囊蚴,吸取一定数量的囊蚴置于添加有不同食品化学保藏剂的PBS缓冲液中,观察其活动能力及形态结构随时间的变化。结果柠檬酸、氯化钠、亚硝酸钠对中华枝睾吸虫囊蚴的致死效果微弱,浓度〉5%的乙酸溶液及浓度〉10%的乙醇溶液能够使囊蚴失去活动力而死亡,但作用时间较长。低浓度乙醇则会刺激囊蚴、囊蚴内幼虫,使其活动加剧,但随时间延长,活动力减弱。结论化学保藏剂对中华枝睾吸虫囊蚴的致死效果微弱,其他非热处理方式及作用效果仍值得进一步研究探讨。
简介:在电子商务领域“火”了若干年的“双十一”,终于在2013年火到了传统的白酒行业。11月11日当天,以洒仙网为代表的酒类电子商务网站单日销售额达到221亿元就是证明——一年前的11月11日,洒仙网单日销售额不过6000余万元——虽然这一数字天猫商城350亿元的销售总额相比还相去甚远,但在酒仙网董事长郝鸿峰看来,更大的变化在于酒类企业和经销商对电子商务态度的转变,“去年参与‘双十一’的酒类企业(供应商)只有七八家,但是今年已经有上百家企业(供应商)参与到我们的活动里,这才是让我们惊喜的。”正因如此,郝鸿峰更愿意将2013年的“双十一”看作“中国酒类电商元年”。
简介:本研究报道了以紫外诱变结合化学诱变方法选育一株高产色素低产桔霉素的红曲菌种.通过平板分离的方法从红曲米中分离红曲菌种,挑选出一株产色价较高,产桔霉素较低的菌种CG009;以CG009为出发菌种进行紫外诱变,使用紫外线照射孢子悬液90s,而后进行分离筛选得到一株突变株CG009-UV-1,其产桔霉素比出发菌株降低了87.7%,而色价基本没有太大的变化;以CG009-UV-1为出发菌株进一步使用硫酸二乙酯诱变,采用5%浓度的硫酸二乙酯处理CG009-UV-1的孢子悬液,经分离筛选得到一株突变株CG009-UV-D-9,与出发菌株CG009相比桔霉素降低93.3%,与CG009-UV-1相比桔霉素降低45.2%,产色素能力未降低.对筛选到的菌种CG009-UV-D-9进行遗传稳定性试验,检测其产色素和桔霉素情况.结果显示:经过10次传代实验,所产红曲米色价基本稳定在5000u左右,桔霉素含量均低于1mg/kg,与原始菌种相比较桔霉素含量降低了90%以上.