简介:目的建立-种灵敏、可靠、快速对水中大肠埃希菌富集和DNA提取的最佳方法组合,以便应用TaqMan探针实时荧光PCR技术进行定量检测。方法膜过滤洗脱环节,采用3种不同的方法进行富集洗脱,通过平板计数法比较各方法富集洗脱效果;DNA提取环节,采用4种方法进行DNA提取。所得DNA进行实时荧光PCR扩增,定量检测DNA拷贝数,比较各方法的DNA提取效率;并采用最优的方法组合,对模拟水样进行膜过滤和DNA提取,考察全过程的回收率和灵敏度。结果采用加表皮葡萄球菌过滤+漩涡混合器+玻璃棒刮擦洗脱方法(C法),洗脱效率能达到75%-93%;TritonX-100法和磁珠法的线性范围达到6个数量级稀释度(10^0-10^-5),r2分别为0.998和0.999,然而,TritonX—100法更省时,更简便,经济性更好。采用该最优的方法组合,其全过程的回收率为79.7%~104.0%且灵敏度达到1cfu/ml。结论c法+Triton-100法组合可以快速、准确、经济地对饮用水中大肠埃希菌进行富集和DNA提取。
简介:原花青素的抗氧化活性与聚合度有很大的关系,高聚体的抗氧化活性不及低聚体,且难以被人体吸收利用。将高聚体水解成活性更高的低聚体或单体,可以充分利用天然植物资源。葡萄籽原花青素粗提液用AB-8大孔树脂吸附纯化,以不同浓度乙醇溶液梯度洗脱,采用亚硫酸作为酸介质将乙醇浓度为33%、35%、37%、39%、41%的洗脱液原花青素高聚体水解。以平均聚合度、自由基清除率和VC当量浓度为指标对原花青素高聚体水解效果进行评价,并检测水解产物中副产物,讨论了水解过程机理与酸介质影响。水解后原花青素的平均聚合度显著降低,抗氧化活性提高。用分光光度法定性检测,产物中没有副产物生成。水解液进行分级分离,表明水解产物主要为低聚体。
简介:菲律宾稻米研究所和STRIVE基金会的研究显示,该国大多数消费者有可能接受转基因稻米。研究所所长宣称多数农民渴望尝试新的水稻品种,希望藉此降低成本及害虫带来的损失。由菲国生技公司DA—BPO(theDABiotechnologyProgramOffice)提供经费的三合一稻研究,目前已有所进展。专家们认为2011年,菲律宾的转基因水稻将首次通过所有管控,展开商业推广。三合一稻的育种目标,不仅把β-胡萝卜素转入地方品种,还通过传统育种技术将抗水稻衰退杆状病毒及抗白叶枯病的基因一起转移到稻米中。三合一稻被视为转基因稻米是因其父母本之一的黄金米含有β-胡萝卜素,而β-胡萝卜素由其它植物的基因转殖进入。
简介:目的探究柠檬酸、乙酸、氯化钠、亚硝酸钠和乙醇5种化学保藏剂对离体中华枝睾吸虫囊蚴生命力的影响。方法从感染中华枝睾吸虫的鱼肉中消化分离出中华枝睾吸虫囊蚴,吸取一定数量的囊蚴置于添加有不同食品化学保藏剂的PBS缓冲液中,观察其活动能力及形态结构随时间的变化。结果柠檬酸、氯化钠、亚硝酸钠对中华枝睾吸虫囊蚴的致死效果微弱,浓度〉5%的乙酸溶液及浓度〉10%的乙醇溶液能够使囊蚴失去活动力而死亡,但作用时间较长。低浓度乙醇则会刺激囊蚴、囊蚴内幼虫,使其活动加剧,但随时间延长,活动力减弱。结论化学保藏剂对中华枝睾吸虫囊蚴的致死效果微弱,其他非热处理方式及作用效果仍值得进一步研究探讨。