简介：目的建立-种灵敏、可靠、快速对水中大肠埃希菌富集和DNA提取的最佳方法组合，以便应用TaqMan探针实时荧光PCR技术进行定量检测。方法膜过滤洗脱环节，采用3种不同的方法进行富集洗脱，通过平板计数法比较各方法富集洗脱效果；DNA提取环节，采用4种方法进行DNA提取。所得DNA进行实时荧光PCR扩增，定量检测DNA拷贝数，比较各方法的DNA提取效率；并采用最优的方法组合，对模拟水样进行膜过滤和DNA提取，考察全过程的回收率和灵敏度。结果采用加表皮葡萄球菌过滤＋漩涡混合器＋玻璃棒刮擦洗脱方法（C法），洗脱效率能达到75％-93％；TritonX-100法和磁珠法的线性范围达到6个数量级稀释度（10^0-10^-5），r2分别为0．998和0．999，然而，TritonX—100法更省时，更简便，经济性更好。采用该最优的方法组合，其全过程的回收率为79．7％～104．0％且灵敏度达到1cfu／ml。结论c法＋Triton-100法组合可以快速、准确、经济地对饮用水中大肠埃希菌进行富集和DNA提取。

简介：从贝类中诺如病毒的污染现状、检测组织靶点、病毒浓缩方法及效率、检测方法有效性等多个方面评述贝类中诺如病毒的研究现状、进展、急需解决的问题和未来的发展方向，以期为制定诺如病毒检测技术标准及我国贝类进出口贸易提供参考。

简介：为了解赣榆地区公共场所从业人员健康人群中低浓度血清乙肝病毒表面抗原(HBsAg)的人群分布及其相关乙肝病毒血清标志物模式特征,应用微粒子酶免疫发光分析技术(MEIA)测定8002例健康人群血清HBsAg阳性及其表面抗原、乙肝病毒e抗原及其e抗体、(HBeAg、抗-Hbe)和乙肝病毒核心抗体(抗-HBc),并结合PCR试验结果,确定浓度在5μg/L以下的HBsAg阳性例数,并分析相关乙肝病毒(HBV)血清标志物模式.共检出HBsAg阳性369例,HBsAg浓度在5μg/L以下的有85例,占总数的1.06%,占HBsAg阳性人群的23.04%,其中HBsAg浓度在1μg/L以下的38例(44.70%);1～2μg/L的有15例(17.64%);2～5μg/L的有32例(37.65%).对上述低浓度HBsAg人群的5项HBV血清标志物检测获得8种模式,以"HBsAg、抗HBc、抗Hbe阳性"和"HBeAg和抗HBs阴性"模式为主(70.59%);累计HBsAg和抗-HBc同时阳性者占91.77%;HBsAg与抗-HBs同时阳性只出现在HBsAg1μg/L以下人群中(6.45%).结果显示低浓度血清HBsAg人群不容忽视,提高HBsAg检测灵敏度具有重要意义,同时检测相关HBV血清标志物,对于确定上述人群有帮助.

简介：目的建立不同水源中GⅡ型诺如病毒(NoVGⅡ)实时荧光逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法,对某市疾病预防控制中心送检的10份疑似引起诺如病毒中毒的水样进行NoVGⅡ检测。方法以瓶装水、河水和生活污水为研究对象,采用硝酸纤维素膜-聚乙二醇(PEG)沉淀法富集病毒,对取样体积、病毒洗脱条件、PEG终浓度及PEG沉淀条件等进行了优化,提取病毒RNA、建立实时荧光RT-PCR检测方法;通过外加MS2计算方法的回收率,评价所建方法对水样中诺如病毒的回收效果。结果建立的方法对瓶装水、河水和生活污水中NoVGⅡ的平均回收率分别为(60.1±8.0)%、(22.0±6.5)%和(35.7±8.1)%,10份送检水样中3份检出NoVGⅡ。结论建立的实时荧光RT-PCR方法适用于瓶装水、河水和生活污水中NoVGⅡ的检测,饮用水被NoVGⅡ是引发某市人员中毒的原因之一。