简介:以痢疾志贺氏菌为抗原免疫产蛋母鸡.从鸡卵黄中提取免疫球蛋白.建立抗痢疾志贺氏菌的特异性IgY的效价检测方法.并研究母鸡的免疫应答性以及抗体的提取方法和体外抑菌效果。研究结果表明:用10^8cfu/mL和1^9cfu/mL剂量的抗原分别免疫的鸡的卵黄中.于初洗免疫后的第12天出现抗痢疾志贺氏菌IgY,两组效价均为1:3600。经加强免疫后效价迅速上升,至第48天低剂量免疫组达到最高效价1:28800;第60天高剂量免疫组达到最高效价1:57600。低剂量免疫组的效价维持了210d,高剂量免疫组的效价在免疫后360d时仍维持在1:7200水平。用水稀释法、硫酸铵溶液分级盐析、SephadexG-25凝胶过滤CA提取IgY,提纯后IgY的效价翻倍。SDS—PAGE鉴定抗体的纯度,电泳图谱中出现抗体的轻链和重链两条带。体外抑茼实验表明,IgY能抑制痢疾志贺氏菌的生长.
简介:目的:探讨菲律宾蛤仔酶解多肽的制备方法以及体外抗前列腺癌PC-3、DU-145细胞的活性。方法:以胰蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶4种蛋白酶为供选酶种,以酶解液中游离ANN含量和腥味值为测量指标,对酶种进行筛选,以获得最佳酶解工艺。选择分子质量3ku以下的酶解液分离纯化,所得多肽通过MTT法、AO/EB染色,做体外抗前列腺癌细胞试验。结果:胰蛋白酶酶解效果最佳,最佳酶解条件组合是pH8.0,温度50℃,酶解时间8h,加酶量1200u/g。分子质量3ku以下的酶解液能抑制PC-3、DU-145细胞生长,出现细胞凋亡的形态学改变。结论:由胰蛋白酶酶解所得多肽,在体外能抑制前列腺癌PC-3和DU-145细胞生长,诱导细胞凋亡。
简介:根据转基因抗除草剂玉米DAS-40278-9外源基因的旁侧序列,采用ABIPrimerExpress3.0设计引物和TaqMan探针,建立转基因抗除草剂玉米DAS-40278-9品系特异实时荧光定量PCR检测方法。采用该检测方法对DAS-40278-9玉米含量为1%(质量分数)的标准样品进行检测,结果显示,采用建立的方法获得的标准曲线,通过斜率、相关系数、扩增效率判断是可靠的,待测样品的定量检测结果为1.024%,非常接近真实值。本试验表明建立的转基因抗除草剂玉米DAS-40278-9品系特异定量PCR检测方法的特异性好,灵敏度和准确度高,值得推广应用。