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13 个结果
  • 简介:目的:构建高产谷氨酰胺酶且具有活性的基因工程菌。方法:以茂原链霉菌总DNA为模板,利用PCR技术扩增目的基因,构建重组质粒pET-22b-MTG,使其在大肠杆菌中得到高效表达并优化表达时间和温度。结果:成功构建产谷氨酰胺酶的基因工程菌,酶活为15.9U/mL,最优表达时间5h,温度25℃。结论:成功构建TG基因工程菌,TG基因在大肠杆菌中得到高效表达,为后续试验提供原材料,为微生物发酵生产TG打下基础。

  • 标签: 转谷氨酰胺酶 大肠杆菌 表达 改性 大豆分离蛋白
  • 简介:脯氨酸内肽酶(Prolylendopeptidase,PEP)是一类能够特异性水解低分子质量多肽链中脯氨酸残基羧基端肽键的内切酶,与胶原蛋白的后期降解有密切关系。以淡水鱼草鱼为原料。采用硫酸铵分级沉淀。DEAE—Sephacel阴离子交换,Phenyl—Sepharose疏水层析和羟基磷灰石层析等方法从草鱼肌肉中分离纯化得到一种脯氨酸内肽酶。SDS—PAGE结果显示,草鱼PEP的分子质量为75ku。酶学性质分析表明,其最适pH为6.0,在pH5.5~7.5间有较好的稳定性。酶的最适温度为30℃,其热稳定性较差。PEP能够特异性分解肽链羧基端为脯氨酸残基的荧光底物,PEP的特异性抑制剂SUAM以及丝氨酸蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氟对其有强烈的抑制作用。酶动力学研究表明,草鱼PEP的k为19.23μmol/L,kca为2.5s-1。肽指纹质谱分析结果表明,草鱼PEP与青锵鱼、罗非鱼、斑马鱼PEP的序列同源性分别为98-3%.96.1%和94.4%。

  • 标签: 脯氨酸内肽酶 草鱼 纯化 性质分析
  • 简介:二肽基肽酶Ⅳ(dipeptidylpeptidaseⅣ,DPP—Ⅳ;EC3.4.14.5/CD26)属于丝氨酸肽酶中脯氨酸寡肽酶家族成员之一,是目前糖尿病新药研发的热点之一。体内外研究显示胰高血糖素样肽-1(GLP-1)具有较好的抗糖尿病效应,但是由于其体内被以DPP-Ⅳ为主的酶降解,半衰期仅2min,因而限制了其在临床上的应用。研究表明DPP—Ⅳ抑制剂能延长GLP-1在体内的半衰期,从而有效地降低血糖。

  • 标签: 二肽基肽酶Ⅳ 抑制剂 药物筛选 降血糖
  • 简介:为了开发香蕉果皮中谷氨酸脱羧酶(GAD)的高效提取技术,以香蕉果皮为对象,测定了可溶性糖含量和GAD活力在香蕉成熟过程中的变化,并在此基础上探讨了GAD活力与可溶性糖含量的关系以及香蕉催熟对GAD活力的影响,分析了果皮中GAD的分布状态。试验结果表明,香蕉果皮的可溶性糖含量和GAD活力随香蕉的成熟而增加。香蕉催熟改变了果皮中GAD活力随可溶性糖含量的变化模式,提高了GAD活力。催熟香蕉果皮的GAD活力在可溶性糖含量为41.0%时达最大值10.2U/g。香蕉果皮中,果皮层的GAD活力和比活力均高于角质层和近果肉层。本文为香蕉果皮中GAD的高效提取及其在GABA生产中的应用提供了技术依据。

  • 标签: 香蕉果皮 谷氨酸脱羧酶 可溶性糖 催熟 Γ-氨基丁酸
  • 简介:利用谷氨酰胺转氨酶和谷氨酰胺转氨酶与花生蛋白结合来改善燕麦-小麦混合粉(燕麦粉占30%)面团特性.结果表明,谷氨酰胺转氨酶显著降低了混合粉的面筋含量、弱化度和延伸性,延长了面团的形成时间和稳定时间,增加了面团的拉伸阻力.

  • 标签: 谷氨酰胺转氨酶 面团特性 混合粉 小麦 燕麦 形成时间
  • 简介:用分光光度法研究了过氧化苯甲(BPO)被还原剂盐酸羟胺还原后和β环糊精(β-CD)作用,β—CD与苯甲酸形成主体:客体为1:1的包结物,此法用于测定面粉中的过氧化苯甲得到较为满意的结果。由于β—CD具有较强的分子识别性能,此法最大的优点为选择性好,操作简便。

  • 标签: 分光光度法 Β环糊精 过氧化苯甲酰 苯甲酸 面粉
  • 简介:建立高效液相色谱二极管阵列法对小麦粉中苯甲酸和过氧化苯甲的同时分析方法。对影响2种物质分离和定量的因素(流动相、洗脱程序、提取试剂、色谱柱和提取时间等)进行选择。优化分析后的方法表明,样品用乙腈提取10min后采用普通C18分析柱,以乙腈/20mmol/L乙酸铵水溶液为流动相梯度洗脱可对苯甲酸、过氧化苯甲进行有效分离,具有良好的线性、精密度、正确度和回收率。该方法可用于同时测定小麦粉中苯甲酸和过氧化苯甲

  • 标签: 过氧化苯甲酰 同时测定 苯甲酸 小麦粉 液相法 高效液相色谱
  • 简介:根据《食品安全法》关于食品添加剂应当在技术上确有必要且经过风险评估证明安全可靠,方可列入允许使用范围的规定,经审查,食品添加剂过氧化苯甲、过氧化钙已无技术上的必要性.现决定予以撤销并公告如下:

  • 标签: 过氧化苯甲酰 食品添加剂 过氧化钙 撤销 公告 卫生部