简介：CD40是分子量为45—50KD的Ⅰ型跨膜糖蛋白，属于肿瘤坏死因子受体（TNFR）超家族成员，表达于多种抗原递呈细胞、内皮细胞、上皮细胞、造血前体细胞、成纤维细胞以及某些肿瘤细胞。通过单克隆抗体激发CD40分子不仅可以直接作用于CD40^＋分子的肿瘤细胞，其介导的信号还可在多个环节影响肿瘤发生、发展，如调控细胞增殖／凋亡，增强其它治疗手段的敏感性，并能通过调节适应性和固有免疫应答而起到抗肿瘤作用，广泛应用于肿瘤治疗。

简介：细胞免疫在机体对恶性肿瘤的免疫应答中发挥重要作用。人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA4）通过抑制T细胞的激活，参与T细胞免疫耐受的诱导和维持。因此通过单克隆抗体阻断CTLA4的作用，可刺激免疫细胞大量增殖，从而增强机体对肿瘤的免疫反应。本文主要综述了近年来CTLAg单克隆抗体药物（Ipilimumab、Tremelimumab）的研究及其在临床的应用进展。

简介：原发性肝癌是目前常见的消化系统恶性肿瘤之一,其中90%为肝细胞癌（HCC）。多数HCC患者确诊时已属中晚期,而手术、放化疗、介入治疗等临床常用治疗手段对中晚期HCC的疗效不甚理想。放射免疫治疗（RIT）是近几年发展起来的治疗HCC的新方法,以具有靶向结合能力的单克隆抗体（McAb）为载体,通过耦联放射性核素来特异性杀伤目标肿瘤细胞。其中^131I标记的McAb因其物理特性优良且具有高度靶向特异性,在HCC综合治疗中具有良好的应用前景。本文对近年来^131I标记的McAb介导的肝癌RIT取得的新进展作一综述。

简介：目的利用逆病毒表达载体快速构建梯度过表达人MTA1稳转单克隆细胞系。方法利用噬菌斑原位杂交筛选人肺噬菌体文库，以阳性克隆为模板，RT-PCR获得人MTA1完整CDS序列。以逆病毒表达载体pMX为基础，经过多次酶切连接，构建逆病毒表达载体pMX—MTA1-flag—IRES—EGFP。将构建好的逆病毒载体系统，转染293-gag／pol细胞，包装出含该表达载体的逆病毒颗粒。以含病毒上清多次感染HCT116细胞，获得稳定转染MTA1的HCT116多克隆细胞系。将该多克隆细胞系按合适比例稀释后接种至10cm大皿，获得大量单克隆细胞系，以GFP为筛选标志，筛选不同荧光强度的单细胞克隆进行扩增并分析MTA1与GFP表达水平的线性关系。结果测序结果显示成功克隆出人MTA1表达序列。免疫荧光、WesternBlot结果证实成功构建出梯度过表达MTA1的稳转细胞系。相关性验证结果显示构建的非融合载体MTA1与GFP的表达呈明显的线性相关，相关系数r=0．932，P〈0．01。结论利用逆病毒表达系统，快速成功构建并筛选出MTA1与GFP非融合梯度过表达稳转单克隆细胞系，为MTA1基因功能研究提供了良好模型。该逆转录病毒平台可用于快速建立其他基因的稳转单克隆细胞系。

简介：目的：克隆COPS3基因cDNA,构建其原核融合蛋白表达载体并表达和鉴定。方法：从培养的人骨肉瘤细胞系SOSP-9607细胞中提取总RNA,经RT-PCR获得COPS3基因。将该基因克隆到pGEM-T-Easy载体中,酶切及测序鉴定。将COPS3基因插入pET28a融合蛋白表达载体中,IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE分析。免疫印迹法鉴定COPS3蛋白的表达。结果：cDNA测序证明,获得了COPS3基因cDNA,其序列与Genebank中报道序列完全一致。酶切分析表明,成功构建了含COPS3基因的pET28a融合蛋白表达载体。SDS-PAGE以及免疫印迹法鉴定分析表明,COPS3蛋白获得高效表达,分子质量为51Ku,表达量约占菌体总蛋白的30%。结论：成功克隆和表达了COPS3cDNA。

简介：目的研究和克隆新的肝癌相关基因，探索肝癌发生的分子基础。方法采用同源筛选、RT-PCR等克隆肝癌相关基因JST，分析其在肝癌及癌旁组织中的表达，并进行序列比对，阐明其与肝癌临床病理特征间相关性。结果克隆了一个肝癌相关基因，cDNA全长为247bp。其在肝癌及癌旁组织中序列存在一定差异。50例肝癌中12％(6／50)为上调表达，88％(44／50)为下调表达(P<0．01)。其表达程度与性别、AFP、HBsAg无关(P>0．05)，但与肿瘤大小(P<0．05)、分化程度(P<0．05)、临床分期(P<0．05)、包膜侵犯(P<0．01)、血管癌栓(P<0．01)、癌旁卫星灶(P<0．01)、Ki-67蛋白表达(P<0．05)、P53蛋白表达(P<0．05)、细胞凋亡(P<0．05)等密切相关。结论JST可能为一个肝癌抑制基因，通过下调作用影响肝癌发生发展，与肝癌的一些病理特性密切相关。

简介：目的探讨131I-EGF动态显像技术对肺癌倚瘤裸鼠化疗疗效的评价。方法将肺癌细胞株A549种植到BALB／cA—nil裸鼠体内，待移植瘤长至直径0．8～1．2cm时，随机分为4组：空白对照组、实验组（紫杉醇组、顺铂组和联合化疗组）。空白对照组腹腔注射0．1ml生理盐水；紫杉醇组腹腔注射紫杉醇5mg／kg；顺铂组腹腔注射ill@34rag／kg；联合化疗组腹腔注射紫杉醇5mg／kg和顺铂4mg／kg。裸鼠化疗后分别丁即刻和第7、14、21及28犬注射131I-EGF0．5h后开始显像，勾画感兴趣区（ROI），计算肿瘤／健侧对应部位放射性（T／NT）比值，并测量肿瘤体积。第28天完成显像后，处死裸鼠，测量肿瘤／血液及肿瘤／肌肉放射性比值，计算抑瘤率和131I-EGF的生物学分布。结果肿瘤组织吸收131I-EGF较多，肿瘤／肌肉放射性比值对照组为5．65，高于联合化疗组（1．55，t=9．829，P〈0．01）、紫杉醇组（1．14，t=12．636，P〈0．01）和顺铂组（0．99，t=12．313，P〈0．01）。肿瘤／血液放射性比值对照组为3．15，高于联合化疗组（0．76，t=3．384，P〈0．05）、紫杉醇组（1．22，t=2．826，P〈0．05）和顺铂组（1．22，t=2．713，P〈0．05）。131I-EGF可使肿瘤组织清晰显像，联合化疗组肿瘤体积401．9mm3，与对照组（1134．2mm3）差异有统计学意义（t=9．393，P〈0．01）；紫杉醇组肿瘤体积634．73mm3（t=7．140，P〈0．01），顺铂组肿瘤体积700．7mm3（t=6．820，P〈O．01），这2组与对照组差异有统计学意义。各化疗组与对照组间T／NT比值差异有统计学意义（F=1011．251，P〈0．01）。结论化疗效果好的肿瘤，131I-EGF显像示肿瘤体积较小，瘤体内放射性分布较少；而化疗效果差的肿瘤体积逐渐增大，瘤体内放射性分布较多。131I-EGF显像可用于指导倚瘤裸鼠的化疗。

简介：目的：探讨TRAIL对3AO裸鼠皮下及腹腔移植瘤的治疗作用。方法：5×10^6和2×10^7对数生长期3AO分别接种于。BALB／C裸鼠右下肢皮下和腹腔内；皮下组移植瘤长至0．25cm^3，腹腔移植瘤组移植后96h，随机分为五组。裸鼠皮下和腹腔移植瘤A、B组为TRAIL组，剂量分别取0．50g／mL和1μg／mL;C组为TRAIL0．5μg／mL加cDDP1．5mg／kg，D组为cDDP3mg／kg；E组对照组，为生理盐水，分别瘤周和腹腔注射，观察移植瘤成瘤率、裸鼠生存期和生存期延长率。同时观察停药后1d、1wk、2wk裸鼠移植瘤细胞的细胞凋亡率及CD95、Apo2．7、P53、Bcl-2基因表达的变化。各组裸鼠肝、脾和肾行病理学检查。结果：①A、B、C和D组裸鼠皮下移植瘤的抑制率为23％、49．1％、62.3％；和52．6％，差异具有显著性(P<0．05)。②腹腔移植瘤组：A、B、C、D组裸鼠移植瘤的成瘤率分别为89．1％、72．3％、51．7％和D组为61．5％；差异具有显著性(P<0．05)。③TRAIL作用裸鼠移植瘤后CD95与Apo2．7的表达均有升高，P53基因表达微有升高，Bcl-2基因表达降低。④病理学检查A、B组裸鼠肝、脾和肾无明显的损害，C、D组裸鼠有明显的肝、脾和肾损害。结论：①TRAIL对人卵巢癌裸鼠移植瘤具有明显的抑制作用，而且对裸鼠正常器官无毒性损害作用，TRAIL能明显降低裸鼠的成瘤率及死亡率，延长其生存期。②其机制可能与基因CD95、Apo2．7、Bcl-2的调节有关。

简介：目的：评价^131I种子源对裸鼠U87移植瘤的抑制效果。方法：将^131I液体密封制成2.4、3.1、5.0、9.2mCi的放射性^131I种子源,分别植入裸小鼠的U87移植瘤旁,定期测量肿瘤大小变化。结果：131I种子源植入后,肿瘤生长速度减慢或缩小,未见肿瘤消失。结论：^131I种子源对肿瘤有一定的抑制作用。

简介：目的：探讨人参皂苷Rg3对人类肝癌细胞在裸鼠体内生长和转移的抑制作用及其相关机制。方法：构建裸鼠肝癌高转移模型LCI-D20,共21只荷瘤裸鼠,分为3组,即人参皂苷Rg3组、5-FU对照组和生理盐水对照组,每组7只,于肝移植瘤块后第11天开始用药,人参皂苷Rg3组采用灌胃给药,5-FU对照组和生理盐水对照组采用腹腔注射,每日1次,连续3周,于停药后次日解剖裸鼠,观察人参皂苷Rg3对裸鼠肝移植瘤的抑制作用以及对肝、肺转移的影响;通过免疫组化SP法观察人参皂苷Rg3对裸鼠肝移植瘤MMP-2、nm23、CD44和VEGF基因蛋白表达的影响。结果：人参皂苷Rg3组和5-FU对照组的瘤重抑制率分别为23.66%和62.31%,与生理盐水组比较,前者无显著性差异（P〉0.05）,后者则差异明显（P〈0.01）;人参皂苷Rg3组肝、肺转移灶的数量较生理盐水对照组为少,但未达到统计学差异（P〉0.05）。免疫组化结果显示,人参皂苷Rg3组的nm23和CD44的表达率分别为100.00%和71.42%,与生理盐水组比较均有统计学意义（P〈0.05）,MMP-2、VEGF的表达率均为85.71%,与生理盐水组比较无统计学意义（P〉0.05）。结论：人参皂苷Rg3对裸鼠肝癌高转移模型LCI-D20具有抑制肝癌细胞生长和转移的作用,但作用较弱,其机制可能与调节nm23和CD44的表达有关,需要作进一步深入的研究。

简介：探讨牛磺酸对裸鼠乳腺癌模型肿瘤生长的影响及机制。方法10只SPF级5周龄裸鼠接种MDA-MB-231乳腺癌细胞后随机分为牛磺酸干预组和对照组，每组5只。牛磺酸干预组给予添加5%的牛磺酸饮水，对照组给予正常无菌饮水。测量两组小鼠肿瘤体积和肿瘤质量，采用蛋白免疫印迹法检测雌激素受体（estrogenreceptor，ER）、孕激素受体（progesteronereceptor，PR）、人类表皮生长因子受体2（humanepidemicgrowthfactorreceptor2，HER-2）和鸟苷三磷酸酶激活蛋白（guanosinetriphosphataseactivatingprotein，p21ras）表达量的变化。结果实验结束时所有裸鼠均存活，裸鼠乳腺癌模型造模成功。牛磺酸对裸鼠乳腺癌模型肿瘤的抑制率为41.6%。相对于对照组，牛磺酸干预组裸鼠肿瘤组织中ER表达量提高了134%（P〈0.05），PR表达量提高了47.5%（P〈0.05），HER-2表达量降低了67%（P〈0.05），p21ras表达量降低了62.2%（P〈0.01）。结论牛磺酸可抑制裸鼠乳腺癌模型肿瘤生长，其机制可能与上调ER、PR和下调HER-2、p21ras有关。

简介：目的:探讨赫赛汀(Herceptin)对HER-2/neu基因蛋白高表达的鼻咽癌荷瘤裸鼠肿瘤生长的影响.方法:用鼻咽癌CNE-2Z细胞株接种于裸小鼠右腋下建立HER-2/neu基因蛋白高表达的裸鼠移植瘤模型.将已构建模型的裸鼠24只随机分为4组,每组6只,分别设阴性和阳性对照两组,Herceptin10mg/kg和20mg/kg两实验组,以观察Herceptin对移植瘤体内生长的影响.结果:用Herceptin处理后的裸鼠移植瘤肿瘤体积均低于阴性对照组,其中10mg/kg剂量组与阴性对照组相比有统计学差异(P<0.05),但无量效关系;瘤重抑制率Herceptin10mg/kg和20mg/kg分别为33.7%和23.3%,均未达到阳性标准;对裸小鼠生长无明显影响.结论:Herceptin对HER-2/neu基因过表达的鼻咽癌细胞株移植的荷瘤裸鼠肿瘤体内的生长具有一定的抑制作用,但效果并不满意.

简介：目的：研究还原型谷胱甘肽是否可以影响伊立替康导致的肝脏脂肪变性的发生。方法：建立结肠癌HCT116细胞裸鼠皮下移植瘤模型,皮下注射伊立替康单药或联合还原型谷胱甘肽,7天后处死裸鼠,取肝脏制作肝脏病理切片观察肝脏损伤情况并制备10%肝脏组织匀浆检测肝脏组织内丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）的表达情况。结果：成功建立了结肠癌HCT116细胞裸鼠皮下移植瘤模型;联合还原型谷胱甘肽组肝脏脂肪变性的发生率降低,肝脏SOD的表达较不联合还原型谷胱甘肽升高（P〈0.05）;MDA的表达较不联合还原型谷胱甘肽降低（P〈0.05）。结论：还原型谷胱甘肽可以通过增强肝细胞的清除氧自由基能力抑制脂质过氧化过程,最终起到保护肝脏的作用,降低伊立替康引起的肝脏脂肪变性的发生率。

简介：目的检测EB病毒Rta蛋白抗体Igc在鼻咽癌初治患者血清中的表达水平，并探讨其与鼻咽癌临床分期的关系。方法采用酶联免疫吸附试验检测274例鼻咽癌未治疗患者及353例健康体检者血清中Rta—IgG水平，比较鼻咽癌患者和健康体检者Rta—Igc的表达水平及与临床分期的关系。结果鼻咽癌组与对照组比较，Rta-IgG表达水平的差异有统计学意义（P〈0．01）。Rta—IgG表达水平与鼻咽癌临床分期无统计学意义（P〉0．05）。结论应用ELISA法检测Rta—IgG的表达可以应用于鼻咽癌的诊断和鉴别诊断，但与鼻咽癌临床分期无关。

简介：目的：观察熊果酸对人肝癌SMMC-7721裸小鼠移植瘤生长的抑制作用及其强度,为本药的进一步临床应用研究提供基础数据。方法：采用荷瘤裸小鼠作为移植性肿瘤实验动物模型。将裸鼠随机分为3组,每组8只,分别为阴性对照组、环磷酰胺阳性对照组和熊果酸组。阳性对照组给予环磷酰胺20mg/kg,熊果酸组给药剂量为4.5mg/kg,阴性对照组给予等量无菌注射用水,每日一次腹腔注射,连续14天。给药期间定期测定动物体重和瘤体积。实验结束后处死裸鼠,取出瘤体称重,计算肿瘤抑制率。结果：给药期间动物一般状况未见明显改变,饮食未见异常,体重较实验前有所增加。熊果酸组瘤体积缩小,瘤株抑瘤率达53.7%,阳性对照组的抑瘤率为39.2%,两组与阴性对照组比较,均有显著差异（P〈0.05）。熊果酸组和阳性对照组的相对肿瘤体积（RTV）分别为33.16±22.36,21.61±12.88,明显低于阴性对照组（62.09±32.80）（P〈0.05）,两组的相对肿瘤增殖率均小于60%。结论：熊果酸对人肝癌SMMC-7721裸小鼠移植瘤有明显的抑制作用。

简介：背景与目的：5．氨基乙酰丙酸（5-ALA）荧光引导手术切除神经胶质瘤的基础研究一直较为薄弱，本文旨在探讨5-AM诱导C6胶质瘤内生性卟啉荧光随时间的动力学变化及卟啉在C6胶质瘤和正常鼠脑中的分布。方法：将C6细胞与5-ALA共培养后，使用流式细胞仪检测细胞内原卟啉Ⅸ（ProtoporphyrinⅨ，PpⅨ）含量。经股静脉向C6／Wistar大鼠脑胶质瘤模型体内注入5-ALA后，使用荧光显微镜和激光扫描共聚焦显微镜观察C6胶质瘤和正常鼠脑组织中卟啉荧光的分布。用鼠的冻伤皮质切片分析血脑屏障的破坏在卟啉产生中的影响。结果：体外C6细胞在加入5-ALA后1h检测到卟啉生成，主要集中在5～15h，11h达到高峰。C6胶质瘤切片荧光主要集中在注入5-ALA后2～10h，6h表现出最强荧光。肿瘤整体荧光呈斑片状分布，边界欠清楚。给药后对侧脑组织未检测到低水平荧光。给药后5h在皮质冻伤切片中检测到微量荧光。无瘤鼠脑组织在注入5-ALA后没有检测到荧光。结论：5-AM能诱导卟啉在C6细胞中积聚，其荧光表现是一个动态过程。5-ALA介导胶质瘤内生性卟啉蓄积与血脑屏障具有密切关系。肿瘤与正常脑组织具有不同荧光表现强度。可以为临床选择性应用5-ALA荧光引导胶质瘤切除术提供有益的指导作用。

简介：目的通过基因重组改善P53蛋白的功能，并研究它对肿瘤细胞的作用。方法构建人野生型P53(wtP53)融合蛋白的原核细胞表达载体PGEX-3X—PTD—P53，诱导表达和亲和层析纯化后，采用MTT法和流式细胞仪检测它对肿瘤细胞的增殖抑制作用和促细胞凋亡。结果成功构建P53融合蛋白的原核细胞表达载体PGEX-3X—PTD—P53，通过诱导表达和纯化获得重组人wtP53融合蛋白。MTT法和细胞流式分析证明该蛋白对几种癌细胞有明显的增殖抑制作用和促细胞凋亡。结论这种原核细胞表达的重组人wtP53融合蛋白保留了wtP53蛋白的生物学性状。

简介：背景与目的：胶质瘤是颅内常见恶性肿瘤，治疗效果一直不令人满意，本文探讨雷公藤红素治疗人脑胶质瘤的丌丁行性。方法：建立BALB／c裸小鼠SHG-44胶质瘤同种移植动物模型，将34只荷瘤裸鼠随机分为5组，空白对照组、高、中、低剂量雷公藤红素作用组、阳性对照组，采用腹腔内注射给药方法。雷公藤红素按三种浓度4mg／kg、2mg／kg、1mg／kg分组给药，每日1次，每周5天；阳性对照顺铂组按2mg／kg给药，每周两次；空白对照组只喂养不做任何处理。共给药四周。全部荷SHG44胶质瘤裸鼠于给药后第28天断颈处死并剔出肿瘤，将肿瘤组织分块处置。定期观察肿瘤生长情况测量肿瘤体积，绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率。结果：5组荷SHG44胶质瘤裸鼠的移植瘤体积（处死后测量）比较，差异显著（F=5．519，P=0．002）；与空白对照组相比。雷公藤红素4mg／kg组、雷公藤红素2mg／kg组均能抑制肿瘤生长（P〈0．05），其体积抑瘤率分别为35％、26．9％。结论：雷公藤红素能明显抑制荷SHG44胶质瘤裸鼠的移植瘤生长，并存在剂量依赖性。

简介：目的了解二硝基氯苯（DNCB）结合乙肝免疫球蛋白（HBIG）后对其抗体功能的影响。方法把HBIG（13mg／500μLPBS）分别与不同剂量（0．025，0．25，2．5mg）的DNCB（预先溶于DMSO，10mg／mL）结合，并予系列倍比稀释十次后，分别以DMSO及无菌水为两对照组，共组成五组，55个标本。以ELISA法分别检测乙肝表面抗体的效价。结果DMSO、无菌水、低剂量、中剂量与高剂量组五组的抗体阳性率分别为90．91％（10／11）、72．73％（8／11）、81．82％（9／11）、81．82％（9／11）和72．73％（8／11），其抗体阳性率以，检验无差异（P〉0．05）。经双因素方差分析（two-wayanalysisofvariance），五组间在各稀释度的吸光值（OD450）上无差异（P〉0．05），而各稀释度处理组间则有非常显著差异（P〈0．01）。结论在一定范围内，DNCB的结合对HBIG的抗体效价没有影响，推测免疫球蛋白（抗体或单克隆抗体）可作为DNCB（或其它类似半抗原）靶向治疗的一种有效载体。

简介：目的探讨c-jun基因沉默对人鼻咽癌放射抗拒CNE-2R细胞裸鼠移植瘤生长及血管生成的影响。方法用携带shRAN慢病毒载体感染CNE-2R细胞以沉默c-jun基因,构建c-jun-shRNA-CNE-2R细胞组（c-jun-shRNA组）以及阴性对照NC-shRNA-CNE-2R细胞组（NC组）,以CNE-2R细胞为空白对照组,采用Westernblot检测3组细胞中血管内皮生长因子（vascularendothelialgrowthfactor,VEGF）蛋白的表达水平。构建裸鼠模型,观察3组细胞裸鼠皮下种植瘤生长曲线及体积;采用免疫组化法检测移植瘤组织中VEGF、CD34的表达,并检测组织内微血管密度（microvesseldensity,MVD）。结果Westernblot结果显示,c-jun-shRNA组细胞VEGF蛋白表达较NC组及空白对照组明显下调（P〈0.05）。裸鼠模型实验中,c-jun-shRNA组移植瘤体积为（720.85±72.10）mm3,质量为（0.42±0.04）g,MVD为11.69±3.30;NC组移植瘤体积为（1196.81±90.69）mm3,质量为（0.80±0.08）g,MVD为32.56±7.33;空白对照组移植瘤体积为（1203.76±100.42）mm3,质量为（0.83±0.05）g,MVD为35.45±4.87;c-jun-shRNA组种植瘤体积、质量、MVD较NC组和空白对照组低（P〈0.05）。免疫组化检测结果显示,移植瘤组织中VEGF蛋白表达c-jun-shRNA组呈弱阳性,NC组及空白对照组组均呈强阳性。结论c-jun基因沉默可抑制放射抗拒性鼻咽癌移植瘤生长及血管生成。