简介：石蜡切片进行免疫组织化学染色的优势在于能得到极为清晰美观的组织形态，其中修复待检测物质的抗原性（抗原修复）是一个关键步骤。抗原修复的效果直接影响到最终的染色结果。用pH值6．0的枸橼酸（柠檬酸）缓冲液进行微波修复或高压修复目前使用最广，是国内外绝大多数实验室的首选方法。该方法能有效修复大多数物质的抗原性，得到阳性强、结果美观的图像，重复性好，颇受广大实验工作者的欢迎。但经过长期实践和总结发现枸橼酸缓冲液用于抗原修复有一个比较隐蔽的缺陷：它能使某些膜受体的阳性分布区域向细胞质内扩大。比如NMDA-R2A是一种广泛分布于脑内的促离子型谷氨酸受体，免疫电镜显示它应当分布在神经细胞的突触后膜上。但使用枸橼酸缓冲液对大鼠中脑石蜡切片进行抗原修复后，阳性结果分布于神经细胞的整个胞质（图113）；这与NMI）A-R2A的实际分布有明显出入。由于细胞质阳性的图像比较美观，并且这种阳性的成因也有解释的余地，因此常常被实验人员误认为是正常的。我们尝试了其它一些修复方法，综合比较后认为乙二胺四乙酸（EDTA）溶液对于NMDA-R2A这类膜受体的检测是一种更好的抗原修复液，并对其使用方法和效果探讨如下。

简介：目的了解我院TORCH的感染率,为临床指导优生优育提供更多的参考依据。方法采用捕获ELISA法对样本进行检测。结果TORCH特异性IGM抗体的总阳性率为0.82%,其中TOX未查见阳性,RV占0.11%,CMV占0.35%,HSV占0.35%。发病季节,RV主要在冬季,CMV主要在秋冬两季,HSV发病季节主要在春秋冬季。结论尽管遂宁地区TORCH的感染率较低,但严格执行预防和控制TORCH系列病原体感染仍是优生优育的一项重要措施。

简介：体外组织块培养成年、老年哺乳动物室管膜下区(SVZ)神经干细胞的研究甚少.本研究的目的是探索体外培养神经干细胞的实用方法及扩充神经干细胞作为移植或基因转移的供体细胞来源.取8、14及24月龄SD大鼠(雌雄不拘)SVZ组织块作体外培养,在DMEM/F12+B27培养液中加入bFGF(20ng/ml),促进其组织块形成神经小球,刺激神经干细胞增殖,并用Nestin免疫组化鉴定.结果显示,培养7～10d产生的神经小球数量多,细胞生长状态佳,绝大多数细胞为Nestin阳性的神经干细胞,此期的神经干细胞较适宜于作细胞移植或基因转移.此法尚有取材方便、组织细胞损伤小、细胞易存活及经济等优点,不失为一种具有实用价值的通过体外培养扩增神经干细胞的方法.

简介：过去常用经典的Nadi反应显示细胞色素氧化酶以定位线立体的存在部位,现在广泛使用DAB法.我们对这两种方法进行了比较.方法如下:取Wistar大鼠的心、肝、肾组织,用液氮骤冷,恒冷箱切片(厚7μm),进行以下实验:Nadi反应:切片入孵育液(N-苯基-对-苯二胺3mg、1-羟基-2-萘酸3mg溶于二甲基亚砜0.1ml,0.05M的磷酸缓冲液pH7.210ml,混匀后过滤)室温30min.入Lugol碘液2min,入5%硫代硫酸钠4min,入1%醋酸钴60min,蒸馏水洗,甘油明胶封固.DAB法:切片入孵育液(0.05M磷酸缓冲液pH7.210ml,3,3′-二氨基联苯胺四盐酸盐(DAB)9mg,细胞色素C15mg,混匀后过滤)室温5min.切片用缓冲液清洗,入蒸馏水,甘油明胶封固.HE染色:切片先用10%Formalin固定10min,再做常规HE染色.对照:Nadi反应和DAB法都用迭氮钠预孵育5min(10ml缓冲液中含6mM迭氮钠),再入含6mM迭氮钠的孵育液中孵育,以下的步骤与上述步骤相同.DAB法还用不含细胞色素C的孵育液做对照.实验结果:HE染色的切片显示组织结构正常.Nadi反应的阳性产物为黑绿色的颗粒,可见弥散的现象.DAB染色的阳性产物为棕色颗粒,很少见有弥散现象.对照切片的结果:用迭氮钠制酶活性的Nadi反应有弱阳性产物,而用迭氮钠的DAB法细胞色素C的切片均呈阴性反应.我们认为显示细胞色素氧化酶的经典方法Nadi反应存在反应产物弥散的现象,用迭氮钠抑制酶的活性后仍有阳性产物出现,因而该法只能表明线粒体的存在,而其定位不够准确.DAB法的方法简便,反应产物不易扩散,可较准确地定位线粒体的存在部位.另外,DAB的沉淀物能与四氧化锇反应形成锇黑,可用于电镜观察.经以上的实验观察和比较,我们认为无论从反应的特异性、定位的准确性,还是电镜应用性等方面看,显示细胞色素氧化酶的DAB法都优于Nadi反应.

简介：超声检测已成为对妊娠中胎儿生长发育监测的主要时段.它对优生、优育愈渐起着主要的作用.目前,超声检测项目繁多,有关以超声检测得到的数据来估计胎儿在宫内的生长发育情况,以及这些数据与胎龄的相关分析、推算公式的文章资料也非常多见.但是这些分析和推算公式哪些更准确、更可信却不一定都能成为定论,其重要原因之一,就是在超声检测妊娠中胎儿的这项工作中还缺乏一种更为科学的、正确可信的,又是大家必须遵循的统一标准.本文就对胎龄的认识和测量点的认定等方面存在的问题提出看法,以期与同行求得共识:

简介：目的了解降钙素原（PCT）与常见晚期妊娠并发症包括妊娠期糖尿病（GDM）,妊娠期高血压综合征（PIHS）和妊娠期肝内胆汁淤积症（ICP）的关系。方法对190例妊娠晚期合并并发症的孕妇和50例晚期健康孕妇的PCT、WBC、NEU%结果进行统计分析和比较。结果与健康对照组比较,GDM、PIHS、ICP患者PCT检测值均显著升高（P〈0.05）,而WBC、NEU%检测值的差异无统计学意义（P〉0.05）。与单纯GDM患者和单纯PIHS患者比较,GDM合并PIHS患者PCT检测值显著升高（P〈0.05）。结论常见晚期妊娠期并发症患者PCT检测值显著增高,应引起临床关注,需及时采取相应措施。

简介：表皮生长因子受体（EGFR）属受体酪氨酸激酶家族,调控细胞的增殖、分化、血管生成及凋亡,其信号通路与恶性肿瘤的增殖、侵袭及转移关系紧密。非小细胞肺癌（NSCLC）中发现EGFR酪氨酸激酶区常发生各种突变,这些突变和酪氨酸激酶抑制剂（TKIs）的疗效密切相关。因此,EGFR基因突变的检测是靶向药物EGFR-TKIs治疗有效的一个重要因素及预测指标。本文就NSCLC患者EGFR基因突变不同标本来源,如原发灶肿瘤组织、转移淋巴结组织、外周血、胸腔积液标本检测,做一介绍。

简介：目的数字散斑法测试钢板螺钉的位移,为临床上分析螺钉断裂之原因提供理论依据。材料与方法取6根成人防腐股骨标本,于股骨干中点横行锯断,制造股骨干中段骨折模型。将骨折标本进行复位并使用10孔钢板加压固定,骨折线两端各使用5枚螺丝钉固定。设计成10种状态进行对比测量锁钉位移,分别是：a.模拟骨折愈合后的受力状态（钢板固定后,未锯断）;b.骨折后加压钢板坚强内固定组;c.在b组基础上近端去一枚螺丝钉;d.在c组基础上远端去一枚螺丝钉;e.在d组基础上近端去一枚螺丝钉;f.在e组基础上远端去一枚螺丝钉;g.在f组基础上近端去一枚螺丝钉;h.在g组基础上远端去一枚螺丝钉;i.在h组的基础上近端去一枚螺丝钉;j.在i组基础上远端去一枚螺丝钉。在200N、500N（牛顿）拉力下,电子万能试验机加载测量,相关软件计算位移。结果（1）螺丝钉1与10、2与9、3与8、4与7、5与6的比较差异无统计学意义（P〉0.05）,其余两两比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论应选择6孔以上的钢板,以减少由于钢板的强度损失所引发的螺钉断裂。

简介：目的探讨宫颈癌患者血清当中肿瘤标志物检测的临床价值。方法选2017年2月至2018年3月我院收治的宫颈癌患者60例作为观察组,选同期健康体检者60例作为参照组,两组人员均实施血清肿瘤标志物检测,观察血清中肿瘤标志物检测的临床价值。结果观察组两种肿瘤标志物平均值要显著高于参照组（P〈0.05）。观察组阳性检出率要显著高于参照组（P〈0.05）。结论血清中肿瘤标志物在宫颈癌诊断当中具有重要应用价值,可以有效提高宫颈癌检出率,减少了漏诊及误诊的发生,有利于临床准确判断与治疗病症,值得推广与应用。

简介：一氧化氮合酶(NOS)为一含铁的单氧化酶,可催化左旋精氨酸转化为瓜氨酸和NO.而阿霉素(ADR)是一种有效的广谱抗肿瘤药物,由于其心脏毒性作用,使临床应用受到限制.我们在探讨阿霉素对心脏损伤病理机制的实验研究中,用双重组化法同时显示心室肌NOS与糖元获得成功,现报道如下:1.材料和方法:1.1动物模型新西兰纯种白兔于耳缘静脉注射ADR,每次2mg/kg,ADR以生理盐水稀释成1mg/ml,每周一次,共八周,做心室肌损伤模型.取心室肌组织做冰冻切片,厚12μm.1.2主要试剂(1)还原型尼克酰胺嘌呤二核苷酸脱氢酶(NADPH-d);(2)四唑仑硝基兰(NBT);(3)0.5%过碘酸氧化液;(4)Schiff液:先将200ml双蒸水煮沸,微火,加入1g碱性复红,再煮沸1min.冷却至50℃加入20ml1N盐酸,待35℃时加入1g偏重亚硫酸钠.室温中静置5小时,变为无色液体后装入棕色瓶内并封口,放入冰箱避光保存待用.1.3双重组化法.(1)将冰冻切片置入丙酮固定1min;(2)经pH7.4PBS液清洗三次,每次5min;(3)入NADPH-d与NBT配制的孵育液,37℃恒温孵育1h;(4)经pH7.4PBS液清洗三次,每次3min;(5)入0.5%过碘酸氧化10～20min;(6)经pH7.4PBS液充分清洗;(7)入Schiff液10min液10min;(8)流水冲洗10min;(9)无水乙醇脱水;(10)二甲苯透明,中性树胶封片.1.4单一组化法显示NOS.(步骤参照双重组化法1～4步)1.5单一组化法显示糖元.(步骤参照双重组化法5～8步).2.实验结果:2.1双重组化法显示心室肌中NOS呈蓝色、糖元呈红色.2.2单一组化法显示心室肌中NOS呈蓝色.2.3单一组化法显示心室肌中糖元呈红色.结论:通过三组切片的比较,发现使用两种方法所显示NOS与糖元的颜色及其深浅无明显变化.3.意义3.1用双重组化法可以同时显示心室肌NOS和糖元.此法与单一显示NOS组化法和单一显示糖元组化法进行比较,结果显示NOS与糖元的颜色均无明显改变.此结果说明两组试剂的染色过程不产生交叉影

简介：目的检测原发性肺癌患者外周血PD-1淋巴细胞亚型,并进行临床随访,分析其与临床预后的关系。方法采集2015年1月至2016年11月在河南省肿瘤医院呼吸内科诊治的35例可疑原发性肺癌患者的血液学标本,并进行外周血淋巴细胞亚型分析以及PD-1表达,然后进行临床随访。结果35例患者中,31例患者最终病理确诊为原发性肺癌（腺癌23例,鳞癌3例,小细胞肺癌5例）,剩余4例患者为炎症。CD3＋CD8＋T细胞比例数值高、CD4＋/CD8＋的比值低、PD-1＋/PBMC比例高的患者近期疗效越好。未发现治疗前淋巴细胞亚型比例异常患者与正常患者之间存在PFS的差异。结论在本项回顾性小样本研究中,发现原发性肺癌治疗前特定淋巴细胞亚型与近期疗效相关,尤其是PD-1＋PBMC比例升高的患者近期疗效更佳。需要进一步前瞻性大样本研究验证。