简介:过去常用经典的Nadi反应显示细胞色素氧化酶以定位线立体的存在部位,现在广泛使用DAB法.我们对这两种方法进行了比较.方法如下:取Wistar大鼠的心、肝、肾组织,用液氮骤冷,恒冷箱切片(厚7μm),进行以下实验:Nadi反应:切片入孵育液(N-苯基-对-苯二胺3mg、1-羟基-2-萘酸3mg溶于二甲基亚砜0.1ml,0.05M的磷酸缓冲液pH7.210ml,混匀后过滤)室温30min.入Lugol碘液2min,入5%硫代硫酸钠4min,入1%醋酸钴60min,蒸馏水洗,甘油明胶封固.DAB法:切片入孵育液(0.05M磷酸缓冲液pH7.210ml,3,3′-二氨基联苯胺四盐酸盐(DAB)9mg,细胞色素C15mg,混匀后过滤)室温5min.切片用缓冲液清洗,入蒸馏水,甘油明胶封固.HE染色:切片先用10%Formalin固定10min,再做常规HE染色.对照:Nadi反应和DAB法都用迭氮钠预孵育5min(10ml缓冲液中含6mM迭氮钠),再入含6mM迭氮钠的孵育液中孵育,以下的步骤与上述步骤相同.DAB法还用不含细胞色素C的孵育液做对照.实验结果:HE染色的切片显示组织结构正常.Nadi反应的阳性产物为黑绿色的颗粒,可见弥散的现象.DAB染色的阳性产物为棕色颗粒,很少见有弥散现象.对照切片的结果:用迭氮钠制酶活性的Nadi反应有弱阳性产物,而用迭氮钠的DAB法细胞色素C的切片均呈阴性反应.我们认为显示细胞色素氧化酶的经典方法Nadi反应存在反应产物弥散的现象,用迭氮钠抑制酶的活性后仍有阳性产物出现,因而该法只能表明线粒体的存在,而其定位不够准确.DAB法的方法简便,反应产物不易扩散,可较准确地定位线粒体的存在部位.另外,DAB的沉淀物能与四氧化锇反应形成锇黑,可用于电镜观察.经以上的实验观察和比较,我们认为无论从反应的特异性、定位的准确性,还是电镜应用性等方面看,显示细胞色素氧化酶的DAB法都优于Nadi反应.
简介:传统上我们都采用10%福尔马林固定组织.福尔马林系甲醛液的俗称,是由甲醛(FormaldenydeHCHO)气体饱和于水而成.一般市售的福尔马林含甲醛37%~40%.配法:取40%甲醛液10ml与蒸馏水90ml混合,即得4%甲醛,亦即10%福尔马林.由于福尔马林久存则氧化产生甲酸,呈酸性,固定标本不适宜,特别是需长期固定的组织更不适合,故我们主张采用中性福尔马林固定组织标本.其配法如下:40%甲醛100ml酸性磷酸钠(或无水磷酸二氢钾)4.0g磷酸氢二钠6.5g蒸馏水900ml因中性福尔马林中加入了磷酸缓冲液,不易被氧化,能长期保持pH7.0,故对组织标本的固定(特别是长期固定)、染色效果非常有利.为了证实两种固定液对组织标本的固定效果,我们将皮肤组织分成两组,每组五块皮肤组织标本.其固定方法如下:第一组由10%福尔马林固定组织3m.第二组由中性福尔马林固定组织3m结果显示:(1)从肉眼观察:第一组固定后组织标本的收缩程度及变硬度明显大于第二组.(2)镜下观察:第二组的正常组织细胞形态、层次分明、色彩鲜艳,正常组织细胞基本上无萎缩、变形.而第一组的正常组织形态有明显萎缩,较第二组层次模糊、色彩暗淡.综上所述,我们建议日常活体组织检查应采用中性的福尔马林固定.
简介:体外组织块培养成年、老年哺乳动物室管膜下区(SVZ)神经干细胞的研究甚少.本研究的目的是探索体外培养神经干细胞的实用方法及扩充神经干细胞作为移植或基因转移的供体细胞来源.取8、14及24月龄SD大鼠(雌雄不拘)SVZ组织块作体外培养,在DMEM/F12+B27培养液中加入bFGF(20ng/ml),促进其组织块形成神经小球,刺激神经干细胞增殖,并用Nestin免疫组化鉴定.结果显示,培养7~10d产生的神经小球数量多,细胞生长状态佳,绝大多数细胞为Nestin阳性的神经干细胞,此期的神经干细胞较适宜于作细胞移植或基因转移.此法尚有取材方便、组织细胞损伤小、细胞易存活及经济等优点,不失为一种具有实用价值的通过体外培养扩增神经干细胞的方法.
简介:目的为壁冠状动脉比较解剖学积累资料,为选择动物模型提供依据。方法家猪心脏塑化染料灌注,10%甲醛溶液固定,大体解剖显示壁冠状动脉,测量数据,并与既往文献报道的犬的壁冠状动脉分析比较。结果家猪壁冠状动脉出现率为50.0%,前室间支、后室间支壁冠状动脉出现率为15.0%、27.5%。前室间支壁冠状动脉近端径(1.96±0.71)mm,远端径(1.52±0.80)mm,长度(9.19±6.58)mm。总壁冠状动脉长度(9.20±4.99)mm。一支血管上可出现1-2处的壁冠状动脉壁。壁冠状动脉可以扭曲和发出细小的分支血管。结论家猪可以作为动物模型研究壁冠状动脉,但犬比家猪更为适合。
简介:目的对腹腔镜输尿管上段结石切开取石术的经腹腔以及经后腹膜腔手术入路的疗效指标进行比较。方法收治56例上尿路结石病例,包括32例经后腹膜腔手术入路切开取石术,24例经腹腔手术人路切开取石术。两种手术人路方式均采用气管插管全麻。并且两组术中均予以留置双J管。结果56例手术方式均获成功。两组在手术时问、术中出血无统计学差异,在住院时间、以及住院费用上有统计学差异。两组间在术后进行复查均未见结石残留,随访12月无输尿管狭窄等并发症发生。结论输尿管上段结石腹腔镜输尿管切开取石术经腹腔手术入路及经后腹膜腔手术入路均是安全和有效的。在缩短住院时间和节省住院费用上经后腹膜腔手术入路有一定优势。
简介:目的分析对比输尿管软镜与微通道经皮肾镜在治疗肾结石上的有效性及安全性。通过分析对比结果,选择最优的治疗效果运用到临床治疗中。方法选取自本院2016年5月~2018年5月期间的肾结石住院患者,利用抽签法选取160例患者,随机分成两组,80例输尿管软镜组行输尿管软镜治疗,80例微通道经皮肾镜组行微通道经皮肾镜治疗,对比两组不同治疗方法患者的手术时间,术中出血量,住院天数,结石清除率,术后舒适度结果。结果碎石手术过程中两组均无死亡病例,通过对比得出如下结论:输尿管软镜组从手术时间,术后住院天数,明显好于微通道经皮肾镜组(P〈0.05),结石清除率及并发症发生率比较无统计学意义(P〉0.05)。结论通过对比两组患者的治疗数据得出结论,在临床碎石手术中,经输尿管软镜手术更适合临床治疗和推广。
简介:目的探讨经颅超声治疗联合常规康复对脑性瘫痪患儿躯体感觉功能的影响。方法选取2015年1月至2016年1月在我院就诊的58例脑性瘫痪患儿作为研究对象,按随机数字表法将患儿分为对照组以及观察组,每组各29例。对照组给予常规康复治疗,观察组在对照组的治疗基础上给予经颅超声治疗。观察比较两组患儿治疗前后SEPs波幅以及治疗总有效率。结果(1)两组患儿治疗前N20波幅、P37波幅比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组患儿N20波幅、P37波幅均较前明显升高,且观察组升高程度高于对照组(P<0.05);(2)对照组总有效率为79.31%,观察组总有效率为96.55%,观察组总有效率高于对照组(P<0.05)。结论经颅超声治疗联合常规康复对脑性瘫痪患儿躯体感觉功能具有良好的临床疗效,可有效改善患儿躯体感觉功能,值得临床推广应用。
简介:目的研究丁苯酞对急性缺血性脑卒中患者神经功能缺损的改善效果。方法选取我院2016年1月~2017年3月期间收治的100例急性缺血性脑卒中患者作为研究对象,按照治疗方法将患者分成两组。对照组患者采用基础治疗方法,观察组在对照组的基础上给予患者丁苯酞治疗,以1个月为1个疗程。治疗1个疗程后比较两组患者神经功能缺损评分(NIHSS)、日常生活能力评分(Barthel指数)和出院后1年内患者病死率。结果两组患者在治疗1个疗程后较治疗前NIHSS评分都有所降低,Barthel指数评分都有所升高,但是观察组神经功能缺损评分(NIHSS)明显低于对照组,日常生活能力评分(Barthel指数)明显高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组死亡率18.00%,明显低于对照组死亡率40.00%,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论丁苯酞治疗急性缺血性脑卒中患者能有效地改善神经功能缺损,提高患者日常生活的能力,降低了出院后患者的病死率,疗效肯定,值得临床推广应用。
简介:目的数字散斑法测试钢板螺钉的位移,为临床上分析螺钉断裂之原因提供理论依据。材料与方法取6根成人防腐股骨标本,于股骨干中点横行锯断,制造股骨干中段骨折模型。将骨折标本进行复位并使用10孔钢板加压固定,骨折线两端各使用5枚螺丝钉固定。设计成10种状态进行对比测量锁钉位移,分别是:a.模拟骨折愈合后的受力状态(钢板固定后,未锯断);b.骨折后加压钢板坚强内固定组;c.在b组基础上近端去一枚螺丝钉;d.在c组基础上远端去一枚螺丝钉;e.在d组基础上近端去一枚螺丝钉;f.在e组基础上远端去一枚螺丝钉;g.在f组基础上近端去一枚螺丝钉;h.在g组基础上远端去一枚螺丝钉;i.在h组的基础上近端去一枚螺丝钉;j.在i组基础上远端去一枚螺丝钉。在200N、500N(牛顿)拉力下,电子万能试验机加载测量,相关软件计算位移。结果(1)螺丝钉1与10、2与9、3与8、4与7、5与6的比较差异无统计学意义(P〉0.05),其余两两比较差异有统计学意义(P〈0.05)。结论应选择6孔以上的钢板,以减少由于钢板的强度损失所引发的螺钉断裂。