简介:目的:观察芪麝丸对长期直立大鼠腰椎骨质增生的作用,探讨药物可能的作用机制。方法:30只SD大鼠随机分为四组,对照组不进行处理,普通饲养笼喂养;模型组和芪麝丸组建立长期直立大鼠模型。用药组在术后8个月开始灌胃,连续灌胃一月,所有动物术后9个月处死,L5椎体藏红染色、天狼猩红染色、免疫组织化学法观察;余下腰椎生长板及椎间盘应用实时荧光定量聚合酶链反应(realtimereversetranscriptionpolymerasschainreaction,realtimeRT-PCR)技术检测(typeIcollegan,ColI的亚型Colla2)、(typeXcollegan,ColX的亚型ColIOGtl)、转化生长因子betal(Vansformgrowthfactorbetal,TGF-β1)、血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)、一种核转录因子(corebindingfactoralphal,Runx2)基因的表达。结果:藏红染色显示模型组椎体边缘.椎间盘连接处非基质成分增加,发生骨质增生;对照组改变不明显。用药组较模型组比,相同部位非基质成分较少;天狼猩红染色示正常组椎体边缘一椎间盘连接处胶原排列致密,模型组该处I型胶原增多,IⅡ型胶原增多;用药组椎体边缘.椎间盘连接处胶原致密,以ColI为主。免疫组化示模型组骨质增生形成部位ColX,VEGF,TGF-β1表达均较对照组增强,用药组ColX表达均较模型组减少,而TGF.131表达无明显改变,用药组VEGF表达量较模型组稍有减少。RealtimeRT.PCR示用药组较模型组下调Colloal和Runx2基因表达(P〈0.01)。结论:芪麝丸能延缓腰椎边缘一椎间盘连接处骨质增生,与减少X型胶原表达有关。
简介:目的:研究复方复方芪麝片对双前肢去势大鼠直立模型退变椎间盘形态及细胞外基质的影响。方法:1月龄SD大鼠双前肢90只(雌雄各半),随机分为模型组、复方芪麝片组、空白对照组,每组30只(雌雄各半),分别在术后4、6、8月随机提取10只复方芪麝片组大鼠进行灌胃给药一个月,并于术后5、7、9月处死三组大鼠,取下腰部椎间盘,并进行藏红和天狼猩红形态学染色、免疫组化分析以及实时定量Realtime.PCR检测。结果:形态学藏红染色显示复方芪麝片增加椎间盘高度,防止纤维环撕裂和板层紊乱情况,增加软骨终板非钙化层胶原基质,防止其排列紊乱;免疫组化染色见到,复方芪麝片可以明显增加椎间盘髓核细胞外基质中Ⅱ型胶原的蛋白表达,降低软骨终板x型胶原表达;实时定量Realtime.PCR分析发现复方芪麝片在各时间点可以均显著增加Col2almRNA的表达,在术后7月和9月降低Colloal,MMP3,MMP13和IL.1betamRNA表达。结论:本研究证实复方芪麝片可以改善直立造成的腰椎间盘的退变情况。
简介:目的:探讨颈椎病的发病机理及桂枝加葛根汤防治该病的作用机制。方法:采用自制桂枝加葛根汤大鼠含药血清,对培养的椎间盘纤维环细胞进行不同浓度的药物干预,光镜和电镜观察未干预和桂枝加葛根汤含药血清不同浓度干预后纤维环细胞的细微和超微结构特点,利用荧光定量PCR检测椎间盘纤维环中主要蛋白多糖AggreeanmRNA的表达变化情况。结果:电镜观察结果显示,空白组细胞形态各异,大多呈椭圆形,部分线粒体空泡化,粗面内质网扩张;低剂量组见线粒体增多、浓缩密度增高,胞质内粗面内质网扩张,偶见脂滴或糖原;中剂量组见内质网扩张增多,密度增高,可见较多中等密度的蛋白质沉淀,线粒体增多;高剂量组见粗面内质网增多,扩张明显,镜下见较多高电子密度的蛋白质沉淀,可见较多线粒体及分泌颗粒;荧光定量PCR检测结果显示,中、高剂量组AggrecanmRNA表达的Ct值明显高于空白组fP〈0.05),低剂量组Ct值与空白组比较无明显差异,而高剂量组Ct值明显高于中剂量组(P〈0.05)。结论:(1)中、高剂量组细胞内出面内质网较空白组及低剂量组明显增多,出现电子密度较大的蛋白质沉淀,以高剂量组最为明显;(2)中、高剂量组桂枝加葛根汤大鼠含药血清能增强纤维环细胞AggrecanmRNA的表达,高剂量组效果最为明显;(3)桂枝加葛根汤在防止因纤维环细胞而引起的椎间盘退变具有重要作用。