简介:为获得宿主菌,研究了十二烷基硫酸钠(SDS)对枯草芽孢杆菌中质粒的消除.将过夜培养的枯草芽孢杆菌24/pMX45接种于含SDS(0-0.00800)的LB培养基中,当SDS浓度(w/v)大于或等于0.00600时,菌体不能生长.SDS的亚致死浓度为0.00500,其致死率达9900.菌液稀释后涂LB平板,再随机挑选单菌落至抗性平板,检测由质粒编码的红霉素抗性是否丢失.氯化铯-溴化乙锭梯度离心及质粒DNA的电泳图像证实了24/pMX45的衍生菌株A7中的质粒已完全被消除.A7延迟期较短,并且细胞浓度高于24/pMX45.用SDS处理8h后,24/pMX45的遗传标记开始丢失,消除率持续增高至22h,随之消除质粒的菌体量保持恒定.在未经SDS处理的对照实验中,相同条件下培养24h及48h后,没有发现质粒自然丢失的现象,因此SDS能消除枯草芽孢杆菌中的质粒.